摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩略词 | 第13-15页 |
第一章 前言 | 第15-35页 |
1. 核受体 | 第15-16页 |
1.1 核受体的结构和功能 | 第15-16页 |
2. 孤儿核受体Nur77 | 第16-23页 |
2.1 孤儿核受体Nur77的结构 | 第16-17页 |
2.2 孤儿核受体Nur77的功能 | 第17-19页 |
2.2.1 Nur77的免疫功能 | 第17-18页 |
2.2.2 Nur77在肿瘤中的生物学功能 | 第18-19页 |
2.3 Nur77和肿瘤免疫 | 第19-23页 |
2.3.1 肿瘤免疫 | 第19-22页 |
2.3.2 Nur77和肿瘤免疫密切相关 | 第22-23页 |
3. 程序性死亡配体-1和程序性死亡受体-1 | 第23-33页 |
3.1 程序性死亡配体-1 PD-L1 | 第23-25页 |
3.2 程序性死亡受体PD-1 | 第25-26页 |
3.3 PD-L1/PD-1的信号通路 | 第26-29页 |
3.4 PD-L1/PD-1和肿瘤免疫逃逸 | 第29-30页 |
3.5 基于PD-L1/PD-1的肿瘤免疫策略 | 第30-32页 |
3.6 IFN-γ和PD-L1 | 第32-33页 |
4. 本文研究的目的和意义 | 第33-35页 |
第二章 材料与方法 | 第35-58页 |
1. 实验材料 | 第35-44页 |
1.1细胞株质粒和菌株 | 第35页 |
1.2 主要实验仪器 | 第35-36页 |
1.3 主要试剂 | 第36-39页 |
1.3.1 主要实验试剂 | 第36-38页 |
1.3.2 干扰序列 | 第38页 |
1.3.3 引物 | 第38-39页 |
1.4 主要的实验配方 | 第39-44页 |
1.4.1 SDS-PAGE变性胶 | 第39-40页 |
1.4.2 细胞培养所需的溶液配方 | 第40-41页 |
1.4.3 Western BLot和CO-IP相关溶液配方 | 第41-43页 |
1.4.4 分子克隆所需配方 | 第43-44页 |
1.4.5 稀释抗体的配方 | 第44页 |
2. 实验方法 | 第44-58页 |
2.1 蛋白印迹法 | 第44-46页 |
2.2 构建重组质粒 | 第46-50页 |
2.2.1 制备DH5a感受态细菌 | 第46页 |
2.2.2 PCR基因扩增 | 第46-47页 |
2.2.3 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第47页 |
2.2.4 胶回收 | 第47页 |
2.2.5 目的片段和空载体的酶切 | 第47-48页 |
2.2.6 目的片段和载体回收 | 第48页 |
2.2.7 酶切后片段的酶连 | 第48-49页 |
2.2.8 重组质粒的转化 | 第49页 |
2.2.9 验证重组质粒 | 第49-50页 |
2.3 细胞培养涉及的相关实验方法 | 第50-52页 |
2.3.1 细胞的传代铺板冻存和复苏 | 第50页 |
2.3.2 细胞转染 | 第50-51页 |
2.3.3 细胞计数法 | 第51-52页 |
2.4 MTT法即NK-92 MI对HeLa细胞的杀伤功能检测 | 第52页 |
2.5 实时荧光定量PCR法 | 第52-54页 |
2.6 核质分离实验 | 第54-55页 |
2.7 免疫共沉淀实验 | 第55-57页 |
2.8 统计分析 | 第57-58页 |
第三章 结果与分析 | 第58-71页 |
1. 乳腺癌细胞中Nur77对PD-L1的表达调控 | 第58-60页 |
1.1 Nur77和PD-L1在不同乳腺癌细胞中的表达 | 第58-59页 |
1.2 乳腺癌细胞MDA-MB-231中Nur77调控PD-L1的表达 | 第59-60页 |
2. 宫颈癌细胞HeLa中Nur77对PD-L1的表达调控 | 第60-68页 |
2.1 宫颈癌细胞HeLa中Nur77调控PD-L1的表达 | 第60-62页 |
2.2 宫颈癌细胞HeLa中Nur77调控PD-L1的转录水平 | 第62-63页 |
2.3 HeLa细胞中敲低Nur77后对NK-92 MI的免疫杀伤功能影响 | 第63-64页 |
2.4 Nur77不影响PD-L1的细胞定位 | 第64-66页 |
2.5 HeLa细胞中Nur77和STAT1发生相互作用 | 第66-67页 |
2.6 Nur77通过STAT1调控PD-L1 | 第67-68页 |
3. IFN-γ诱导条件下Nur77对PD-L1的表达调控 | 第68-70页 |
4. 配体诱导条件下Nur77对PD-L1表达的调控 | 第70-71页 |
第四章 讨论 | 第71-74页 |
第五章 结论与展望 | 第74-75页 |
1. 结论 | 第74页 |
2. 展望 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-84页 |
致谢 | 第84页 |