| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-30页 |
| 0.1 概述 | 第13-15页 |
| 0.2 抗菌肽的分类及结构特点 | 第15-17页 |
| 0.2.1 α-螺旋结构类 | 第15页 |
| 0.2.2 开放性螺旋结构类 | 第15-16页 |
| 0.2.3 β-折叠型 | 第16页 |
| 0.2.4 环链结构类 | 第16-17页 |
| 0.3 抗菌肽的作用机制 | 第17-20页 |
| 0.3.1 胞外作用机制 | 第17-18页 |
| 0.3.2 胞内作用机制 | 第18-19页 |
| 0.3.3 对真核细胞无影响的原因 | 第19-20页 |
| 0.4 抗菌肽的生物学活性 | 第20-22页 |
| 0.4.1 抗菌肽对细菌的作用 | 第20页 |
| 0.4.2 抗菌肽对病毒的作用 | 第20-21页 |
| 0.4.3 抗菌肽对真菌的作用 | 第21页 |
| 0.4.4 抗菌肽对原虫的作用 | 第21页 |
| 0.4.5 抗菌肽对抗肿瘤作用 | 第21页 |
| 0.4.6 溶血活性 | 第21页 |
| 0.4.7 其他生物学功能 | 第21-22页 |
| 0.5 抗菌肽的应用前景 | 第22-23页 |
| 0.5.1 食品工业及食品保藏应用前景 | 第22页 |
| 0.5.2 药用及临床应用前景 | 第22-23页 |
| 0.5.3 畜牧水产养殖业应用前景 | 第23页 |
| 0.5.4 农业工程应用前景 | 第23页 |
| 0.6 抗菌肽基因工程表达策略 | 第23-25页 |
| 0.6.1 表达系统的选择 | 第23-24页 |
| 0.6.2 人表皮生长因子 | 第24-25页 |
| 0.6.3 表达策略 | 第25页 |
| 0.7 表达纯化 | 第25-27页 |
| 0.7.1 包涵体的洗涤 | 第26页 |
| 0.7.2 包涵体的变性溶解 | 第26页 |
| 0.7.3 影响包涵体复性的物理因素 | 第26-27页 |
| 0.7.4 包涵体复性方法 | 第27页 |
| 0.8 冻干保护剂 | 第27-29页 |
| 0.8.1 糖类 | 第28页 |
| 0.8.2 氨基酸 | 第28页 |
| 0.8.3 多羟基化合物 | 第28页 |
| 0.8.4 蛋白质 | 第28-29页 |
| 0.8.5 聚合物 | 第29页 |
| 0.8.6 其他类型的保护剂 | 第29页 |
| 0.9 本文目的和意义 | 第29-30页 |
| 第一章 hEGF-Dybowskin-2CDYa融合多肽的表达工艺优化 | 第30-40页 |
| 1.1 引言 | 第30-31页 |
| 1.2 实验材料 | 第31-33页 |
| 1.2.1 菌株 | 第31页 |
| 1.2.2 实验试剂 | 第31页 |
| 1.2.3 主要仪器 | 第31页 |
| 1.2.4 溶液和培养基配制 | 第31-33页 |
| 1.3 实验方法 | 第33-35页 |
| 1.3.1 阳性重组子的摇瓶水平活化与诱导 | 第33页 |
| 1.3.2 诱导产物的SDS-PAGE分析 | 第33-34页 |
| 1.3.3 发酵工艺优化 | 第34-35页 |
| 1.3.4 表达产物的确认 | 第35页 |
| 1.4 结果 | 第35-38页 |
| 1.4.1 诱导表达产物的SDS-PAGE分析 | 第35-36页 |
| 1.4.2 表达工艺优化 | 第36-38页 |
| 1.4.3 融合多肽的表达方式分析 | 第38页 |
| 1.5 讨论 | 第38-40页 |
| 第二章 融合多肽hEGF-Dybowskin-2CDYA的纯化与功能研究 | 第40-55页 |
| 2.1 引言 | 第40-41页 |
| 2.2 实验材料 | 第41-43页 |
| 2.2.1 菌株 | 第41页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第41-42页 |
| 2.2.3 实验主要仪器 | 第42页 |
| 2.2.4 溶液与培养基的配制 | 第42-43页 |
| 2.3 实验方法 | 第43-46页 |
| 2.3.1 包涵体的处理 | 第43-44页 |
| 2.3.2 镍离子亲和层析分离纯化 | 第44页 |
| 2.3.3 蛋白的纯化处理 | 第44页 |
| 2.3.4 纯化产物的Western Blot鉴定 | 第44-45页 |
| 2.3.5 融合多肽对NIH3T3细胞增殖的影响 | 第45页 |
| 2.3.6 划痕实验检测融合多肽对NIH3T3细胞迁移的影响 | 第45-46页 |
| 2.3.7 纯化产物的抑菌活性检测 | 第46页 |
| 2.4 实验结果 | 第46-53页 |
| 2.4.1 洗脱条件分析 | 第46-48页 |
| 2.4.2 冻干保护剂初步筛选 | 第48页 |
| 2.4.3 Western Blot鉴定分析 | 第48页 |
| 2.4.4 NIH3T3细胞增殖分析 | 第48-49页 |
| 2.4.5 融合多肽对NIH3T3细胞增殖的时间效用 | 第49-50页 |
| 2.4.6 细胞划痕实验结果 | 第50-52页 |
| 2.4.7 纯化产物活性检测分析 | 第52-53页 |
| 2.5 小结 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第64页 |
