摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第16-31页 |
1.1 前言 | 第16-17页 |
1.2 Aux/IAA转录因子 | 第17-18页 |
1.3 生长素响应元件 | 第18-19页 |
1.4 与Aux/IAA转录因子/Aux/IAA基因互作的蛋白质 | 第19页 |
1.5 Aux/IAA转录因子研究概况 | 第19-21页 |
1.5.1 Aux/IAA转录因子在植物生长发育过程中的作用 | 第19-21页 |
1.5.2 Aux/IAA转录因子与其他植物激素、光信号的交互作用 | 第21页 |
1.6 Aux/IAA转录因子的作用机制 | 第21-22页 |
1.7 植物启动子研究 | 第22-24页 |
1.7.1 植物启动子简介 | 第22-23页 |
1.7.2 植物启动子分类 | 第23页 |
1.7.3 植物启动子研究现状 | 第23-24页 |
1.8 生长素调控植物发育的相关生物进程 | 第24-29页 |
1.8.1 生长素参与植物幼叶的发生 | 第24-25页 |
1.8.2 生长素参与调控植物休眠芽的形成 | 第25页 |
1.8.3 生长素影响植物根的起始和发育 | 第25-27页 |
1.8.4 生长素影响植物的顶端优势 | 第27页 |
1.8.5 生长素影响植物气孔的起始和分化 | 第27-28页 |
1.8.6 生长素参与调控植物功能叶的极性发育 | 第28-29页 |
1.9 本研究的目的意义和技术路线 | 第29-31页 |
1.9.1 目的意义 | 第29-30页 |
1.9.2 技术路线 | 第30-31页 |
2 白桦Aux/IAA家族基因的时序表达及生物信息学分析 | 第31-44页 |
2.1 材料 | 第31-32页 |
2.1.1 植物材料 | 第31页 |
2.1.2 主要仪器设备与试剂 | 第31-32页 |
2.2 方法 | 第32-34页 |
2.2.1 白桦BpIAA基因家族成员的鉴定与序列分析 | 第32页 |
2.2.2 进化树的构建、内含子-外显子结构分析、染色体定位及基序预测 | 第32-33页 |
2.2.3 qRT-PCR分析 | 第33页 |
2.2.4 激素测定 | 第33-34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-42页 |
2.3.1 白桦BpIAA家族基因序列分析 | 第34-36页 |
2.3.2 BpIAA家族基因的染色体定位以及基因结构分析 | 第36页 |
2.3.3 BpIAA家族的蛋白结构及进化关系 | 第36-40页 |
2.3.4 不同倍性白桦中20条BpIAA基因时序的时序表达特性 | 第40-41页 |
2.3.5 四倍体白桦和二倍体白桦中内源激素IAA测定 | 第41-42页 |
2.4 小结 | 第42-44页 |
3 白桦BpIAA10启动子功能研究 | 第44-57页 |
3.1 材料 | 第44-45页 |
3.1.1 植物材料 | 第44页 |
3.1.2 菌种和质粒 | 第44页 |
3.1.3 引物合成 | 第44页 |
3.1.4 分子试剂与化学药品 | 第44-45页 |
3.1.5 主要仪器设备 | 第45页 |
3.2 方法 | 第45-48页 |
3.2.1 白桦BpIAA10启动子的预测及序列分析 | 第45页 |
3.2.2 白桦BpIAA10启动子的克隆及载体构建 | 第45-46页 |
3.2.3 p1300-BpProIAA10::Luc在拟南芥中的遗传转化 | 第46-47页 |
3.2.4 白桦BpIAA10基因的表达特性研究 | 第47-48页 |
3.3 结果与分析 | 第48-56页 |
3.3.1 BpIAA10启动子序列分析 | 第48页 |
3.3.2 BpIAA10启动子克隆、载体构建及遗传转化 | 第48-52页 |
3.3.3 白桦BpIAA10基因的表达特性研究 | 第52-56页 |
3.4 小结 | 第56-57页 |
4 白桦BpIAA10基因的功能研究 | 第57-96页 |
4.1 材料 | 第57-59页 |
4.1.1 植物材料 | 第57页 |
4.1.2 载体和菌株 | 第57-58页 |
4.1.3 试剂和培养基 | 第58-59页 |
4.1.4 主要仪器、耗材和相关软件 | 第59页 |
4.2 方法 | 第59-66页 |
4.2.1 白桦BpIAA10基因的克隆及植物超表达载体的构建 | 第59-60页 |
4.2.2 白桦BpIAA10蛋白的亚细胞定位 | 第60-61页 |
4.2.3 白桦BpIAA10基因的植物抑制表达载体的构建 | 第61页 |
4.2.4 白桦的遗传转化 | 第61-62页 |
4.2.5 转基因株系的分子检测 | 第62-63页 |
4.2.6 白桦转基因株系的表型观察 | 第63-65页 |
4.2.7 石蜡切片的制作 | 第65页 |
4.2.8 相关激素测定 | 第65页 |
4.2.9 转录组测序及分析 | 第65-66页 |
4.2.10 qRT-PCR分析 | 第66页 |
4.3 结果与分析 | 第66-93页 |
4.3.1 BpIAA10基因克隆及植物超表达载体构建 | 第66-70页 |
4.3.2 白桦BpIAA10转录因子的亚细胞定位 | 第70-71页 |
4.3.3 白桦BpIAA10基因的遗传转化及转基因白桦的多重分子检测 | 第71-74页 |
4.3.4 BpIAA10基因影响白桦顶端幼叶的发育 | 第74-81页 |
4.3.5 BpIAA10基因影响白桦休眠芽形成 | 第81-88页 |
4.3.6 BpIAA10参与调控白桦不定根发育 | 第88-89页 |
4.3.7 BpIAA10参与白桦气孔发育 | 第89-90页 |
4.3.8 BpIAA10基因参与白桦高生长 | 第90-93页 |
4.3.9 BpIAA10影响白桦功能叶基顶轴方向发育 | 第93页 |
4.4 小结 | 第93-96页 |
5 酵母单杂交和酵母双杂交筛选BpIAA10启动子/BpIAA10转录因子的互作蛋白 | 第96-119页 |
5.1 材料 | 第96-99页 |
5.1.1 植物材料 | 第96页 |
5.1.2 菌种与质粒 | 第96页 |
5.1.3 引物合成 | 第96-98页 |
5.1.4 主要仪器设备 | 第98页 |
5.1.5 试剂与培养基 | 第98-99页 |
5.2 方法 | 第99-106页 |
5.2.1 白桦cDNA文库构建 | 第99页 |
5.2.2 酵母单杂交筛选BpIAA10启动子的互作蛋白 | 第99-102页 |
5.2.3 验证酵母单杂交结果 | 第102页 |
5.2.4 pGBKT7-IAA10诱饵载体的构建 | 第102-103页 |
5.2.5 pGBKT7-IAA10的自激活和毒性检测 | 第103页 |
5.2.6 pGBKT7-IAA10和pGADT7-cDNA文库质粒共转化酵母细胞 | 第103-104页 |
5.2.7 阳性克隆的生物信息学分析 | 第104页 |
5.2.8 双分子荧光互补(BiFC)验证酵母双杂交筛选出的互作蛋白 | 第104-106页 |
5.3 结果与分析 | 第106-116页 |
5.3.1 白桦cDNA文库的构建及质量检测 | 第106-107页 |
5.3.2 酵母单杂交筛选BpIAA10基因的上游调控因子 | 第107-110页 |
5.3.3 植物细胞中验证酵母单杂交筛选结果 | 第110页 |
5.3.4 诱饵载体构建 | 第110-111页 |
5.3.5 诱饵载体的自激活及毒性检测 | 第111-114页 |
5.3.6 pGBKT7-IAA10与pGADT7-cDNA共转化后的筛选 | 第114页 |
5.3.7 阳性克隆的生物信息学分析 | 第114-115页 |
5.3.8 双分子荧光互补(BiFC)在植物细胞内验证候选蛋白的互作 | 第115-116页 |
5.4 小结 | 第116-119页 |
6 讨论 | 第119-126页 |
结论 | 第126-128页 |
工作展望 | 第128-129页 |
参考文献 | 第129-147页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第147-148页 |
致谢 | 第148-151页 |
附件 | 第151-152页 |