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白桦BpIAA10基因通过生长素信号途径调控白桦营养器官形成的机制研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
1 绪论第16-31页
    1.1 前言第16-17页
    1.2 Aux/IAA转录因子第17-18页
    1.3 生长素响应元件第18-19页
    1.4 与Aux/IAA转录因子/Aux/IAA基因互作的蛋白质第19页
    1.5 Aux/IAA转录因子研究概况第19-21页
        1.5.1 Aux/IAA转录因子在植物生长发育过程中的作用第19-21页
        1.5.2 Aux/IAA转录因子与其他植物激素、光信号的交互作用第21页
    1.6 Aux/IAA转录因子的作用机制第21-22页
    1.7 植物启动子研究第22-24页
        1.7.1 植物启动子简介第22-23页
        1.7.2 植物启动子分类第23页
        1.7.3 植物启动子研究现状第23-24页
    1.8 生长素调控植物发育的相关生物进程第24-29页
        1.8.1 生长素参与植物幼叶的发生第24-25页
        1.8.2 生长素参与调控植物休眠芽的形成第25页
        1.8.3 生长素影响植物根的起始和发育第25-27页
        1.8.4 生长素影响植物的顶端优势第27页
        1.8.5 生长素影响植物气孔的起始和分化第27-28页
        1.8.6 生长素参与调控植物功能叶的极性发育第28-29页
    1.9 本研究的目的意义和技术路线第29-31页
        1.9.1 目的意义第29-30页
        1.9.2 技术路线第30-31页
2 白桦Aux/IAA家族基因的时序表达及生物信息学分析第31-44页
    2.1 材料第31-32页
        2.1.1 植物材料第31页
        2.1.2 主要仪器设备与试剂第31-32页
    2.2 方法第32-34页
        2.2.1 白桦BpIAA基因家族成员的鉴定与序列分析第32页
        2.2.2 进化树的构建、内含子-外显子结构分析、染色体定位及基序预测第32-33页
        2.2.3 qRT-PCR分析第33页
        2.2.4 激素测定第33-34页
    2.3 结果与分析第34-42页
        2.3.1 白桦BpIAA家族基因序列分析第34-36页
        2.3.2 BpIAA家族基因的染色体定位以及基因结构分析第36页
        2.3.3 BpIAA家族的蛋白结构及进化关系第36-40页
        2.3.4 不同倍性白桦中20条BpIAA基因时序的时序表达特性第40-41页
        2.3.5 四倍体白桦和二倍体白桦中内源激素IAA测定第41-42页
    2.4 小结第42-44页
3 白桦BpIAA10启动子功能研究第44-57页
    3.1 材料第44-45页
        3.1.1 植物材料第44页
        3.1.2 菌种和质粒第44页
        3.1.3 引物合成第44页
        3.1.4 分子试剂与化学药品第44-45页
        3.1.5 主要仪器设备第45页
    3.2 方法第45-48页
        3.2.1 白桦BpIAA10启动子的预测及序列分析第45页
        3.2.2 白桦BpIAA10启动子的克隆及载体构建第45-46页
        3.2.3 p1300-BpProIAA10::Luc在拟南芥中的遗传转化第46-47页
        3.2.4 白桦BpIAA10基因的表达特性研究第47-48页
    3.3 结果与分析第48-56页
        3.3.1 BpIAA10启动子序列分析第48页
        3.3.2 BpIAA10启动子克隆、载体构建及遗传转化第48-52页
        3.3.3 白桦BpIAA10基因的表达特性研究第52-56页
    3.4 小结第56-57页
4 白桦BpIAA10基因的功能研究第57-96页
    4.1 材料第57-59页
        4.1.1 植物材料第57页
        4.1.2 载体和菌株第57-58页
        4.1.3 试剂和培养基第58-59页
        4.1.4 主要仪器、耗材和相关软件第59页
    4.2 方法第59-66页
        4.2.1 白桦BpIAA10基因的克隆及植物超表达载体的构建第59-60页
        4.2.2 白桦BpIAA10蛋白的亚细胞定位第60-61页
        4.2.3 白桦BpIAA10基因的植物抑制表达载体的构建第61页
        4.2.4 白桦的遗传转化第61-62页
        4.2.5 转基因株系的分子检测第62-63页
        4.2.6 白桦转基因株系的表型观察第63-65页
        4.2.7 石蜡切片的制作第65页
        4.2.8 相关激素测定第65页
        4.2.9 转录组测序及分析第65-66页
        4.2.10 qRT-PCR分析第66页
    4.3 结果与分析第66-93页
        4.3.1 BpIAA10基因克隆及植物超表达载体构建第66-70页
        4.3.2 白桦BpIAA10转录因子的亚细胞定位第70-71页
        4.3.3 白桦BpIAA10基因的遗传转化及转基因白桦的多重分子检测第71-74页
        4.3.4 BpIAA10基因影响白桦顶端幼叶的发育第74-81页
        4.3.5 BpIAA10基因影响白桦休眠芽形成第81-88页
        4.3.6 BpIAA10参与调控白桦不定根发育第88-89页
        4.3.7 BpIAA10参与白桦气孔发育第89-90页
        4.3.8 BpIAA10基因参与白桦高生长第90-93页
        4.3.9 BpIAA10影响白桦功能叶基顶轴方向发育第93页
    4.4 小结第93-96页
5 酵母单杂交和酵母双杂交筛选BpIAA10启动子/BpIAA10转录因子的互作蛋白第96-119页
    5.1 材料第96-99页
        5.1.1 植物材料第96页
        5.1.2 菌种与质粒第96页
        5.1.3 引物合成第96-98页
        5.1.4 主要仪器设备第98页
        5.1.5 试剂与培养基第98-99页
    5.2 方法第99-106页
        5.2.1 白桦cDNA文库构建第99页
        5.2.2 酵母单杂交筛选BpIAA10启动子的互作蛋白第99-102页
        5.2.3 验证酵母单杂交结果第102页
        5.2.4 pGBKT7-IAA10诱饵载体的构建第102-103页
        5.2.5 pGBKT7-IAA10的自激活和毒性检测第103页
        5.2.6 pGBKT7-IAA10和pGADT7-cDNA文库质粒共转化酵母细胞第103-104页
        5.2.7 阳性克隆的生物信息学分析第104页
        5.2.8 双分子荧光互补(BiFC)验证酵母双杂交筛选出的互作蛋白第104-106页
    5.3 结果与分析第106-116页
        5.3.1 白桦cDNA文库的构建及质量检测第106-107页
        5.3.2 酵母单杂交筛选BpIAA10基因的上游调控因子第107-110页
        5.3.3 植物细胞中验证酵母单杂交筛选结果第110页
        5.3.4 诱饵载体构建第110-111页
        5.3.5 诱饵载体的自激活及毒性检测第111-114页
        5.3.6 pGBKT7-IAA10与pGADT7-cDNA共转化后的筛选第114页
        5.3.7 阳性克隆的生物信息学分析第114-115页
        5.3.8 双分子荧光互补(BiFC)在植物细胞内验证候选蛋白的互作第115-116页
    5.4 小结第116-119页
6 讨论第119-126页
结论第126-128页
工作展望第128-129页
参考文献第129-147页
攻读学位期间发表的学术论文第147-148页
致谢第148-151页
附件第151-152页

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