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拟南芥转录因子MS1调控花粉表面蛋白表达的研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 前言第9-27页
    1.1 高等植物花器官发育的基本过程第9-10页
    1.2 花药与花粉发育过程第10-13页
    1.3 花粉表面的结构第13-15页
    1.4 绒毡层发育基本过程第15-16页
    1.5 花粉壁结构、组成与功能第16-18页
    1.6 花粉壁发育第18-22页
        1.6.1 胼胝质合成第19页
        1.6.2 初生外壁的定位与细胞膜的波浪状第19-21页
        1.6.3 外壁外层的沉积第21页
        1.6.4 外壁内层的沉积第21-22页
        1.6.5 花粉内壁的沉积第22页
    1.7 花粉包被的沉积第22-24页
    1.8 绒毡层形成的关键基因调控网络第24-26页
    1.9 本研究工作的价值和主要内容第26-27页
2 材料与方法第27-48页
    2.1 材料第27-30页
        2.1.1 植物材料第27页
        2.1.2 菌株和质粒第27页
            2.1.2.1 菌株第27页
            2.1.2.2 质粒载体第27页
        2.1.3 抗生素第27-28页
        2.1.4 试剂第28页
        2.1.5 培养基配方第28-29页
        2.1.6 仪器第29-30页
    2.2 实验方法第30-48页
        2.2.1 拟南芥的种植第30页
        2.2.2 CTAB法提取植物总DNA第30-31页
        2.2.3 目的基因的PCR扩增第31页
        2.2.4 PCR鉴定阳性克隆第31页
        2.2.5 碱解法抽提质粒DNA第31-32页
        2.2.6 双酶切反应体系第32页
        2.2.7 T4连接体系第32页
        2.2.8 大肠杆菌感受态细胞的转化第32-33页
        2.2.9 农杆菌感受态细胞的制备第33页
        2.2.10 农杆菌的转化第33页
        2.2.11 拟南芥的转化第33-34页
        2.2.12 拟南芥RNA的抽提第34页
        2.2.13 植物总RNA的纯化第34-35页
        2.2.14 RNA反转录体系第35页
        2.2.15 定量RT-PCR第35-36页
        2.2.16 转基因植株的筛选第36页
        2.2.17 烟草瞬时转化实验第36页
        2.2.18 原核表达蛋白及纯化第36-39页
        2.2.19 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第39页
        2.2.20 染色质免疫共沉淀(ChIP)第39-42页
        2.2.21 凝胶电泳迁移率实验(EMSA)第42-43页
        2.2.22 原位杂交第43-48页
3 实验结果第48-71页
    3.1 MS1在绒毡层转录因子遗传通路中处于MS188下游第48-49页
    3.2 MS188可以直接结合MS1的启动子第49-53页
    3.3 MS188能够直接激活MS1的表达第53-54页
    3.4 Pollencoat相关基因处于MS1的下游第54-55页
    3.5 MS1与Pollencoat荧光融合蛋白载体的构建第55-58页
    3.6 MS1与Pollencoat相关蛋白皆在小孢子发生过程中的绒毡层中表达第58-60页
    3.7 MS1在体内能够直接结合GRP14和GRP19的启动子第60-63页
    3.8 MS1包含PHD-finger结构域的C端部分能够特异结合DNA元件.第63-67页
    3.9 MS1直接激活GRP14和GRP19基因的表达第67-68页
    3.10 PCPs基因转录启动依赖于MS1的正常表达第68-71页
4 讨论第71-76页
    4.1 花粉包被相关蛋白在花药中的表达模式和定位第71-72页
    4.2 MS1直接调控花粉包被蛋白基因的表达第72-74页
    4.3 绒毡层的遗传途径体现着对花粉发育控制的层次性第74-76页
参考文献第76-82页
附录第82-88页
发表论文第88-89页
致谢第89-90页

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