| 致谢 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-16页 |
| 1.1 乳脂分泌的分子决定因素 | 第8-14页 |
| 1.1.1 CLD和细胞膜之间的接触方式 | 第8-9页 |
| 1.1.2 CLD、分泌囊泡和质膜之间的联系 | 第9页 |
| 1.1.3 乳脂分泌的三部模型 | 第9-13页 |
| 1.1.4 乳脂分泌的嗜乳脂蛋白模型 | 第13-14页 |
| 1.1.5 CLD的分泌机制 | 第14页 |
| 1.2 嗜乳脂蛋白基因BTN的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 嗜乳脂蛋白基因家族简介 | 第14-15页 |
| 1.2.2 Butyrophilin1A1(BTN1A1)的分子结构与功能 | 第15-16页 |
| 2 引言 | 第16-17页 |
| 3 材料与方法 | 第17-28页 |
| 3.1 试验材料 | 第17-18页 |
| 3.1.1 试验所需细胞 | 第17页 |
| 3.1.2 试验相关感受态和质粒 | 第17页 |
| 3.1.3 试验相关主要仪器设备 | 第17页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第17页 |
| 3.1.5 常规生化试剂的配制 | 第17-18页 |
| 3.2 试验方法 | 第18-28页 |
| 3.2.1 构建BTN-PEGFP-N1重组载体 | 第18-20页 |
| 3.2.2 构建Btn超表达重组载体 | 第20-24页 |
| 3.2.3 慢病毒的包装 | 第24-25页 |
| 3.2.4 Btn超表达细胞系的构建 | 第25-26页 |
| 3.2.5 脂滴荧光染色和定量分析 | 第26页 |
| 3.2.6 BTNmRNA及脂滴形成相关基因相对表达量检测 | 第26-28页 |
| 4 结果与分析 | 第28-34页 |
| 4.1 乳腺上皮细胞中BTN蛋白与脂滴的共定位 | 第28-29页 |
| 4.2 Btn慢病毒超表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 4.2.1 Btn基因的扩增以及LenticrisprV2(52961)载体双酶切 | 第29-30页 |
| 4.2.2 LenticrisprV2(52961)载体双酶切产物与BtnPCR产物非酶连接 | 第30页 |
| 4.3 BTN超表达MAC-T细胞系的构建 | 第30-33页 |
| 4.3.1 慢病毒包装 | 第30-31页 |
| 4.3.2 Btn超表达MAC-T细胞系基因型鉴定 | 第31-33页 |
| 4.4 Btn超表达超表达对细胞脂滴荧光染色和定量分析 | 第33-34页 |
| 4.5 超表达Btn对乳腺细胞中脂肪合成基因mRNA表达的影响 | 第34页 |
| 5 讨论与结论 | 第34-37页 |
| 5.1 讨论 | 第34-35页 |
| 5.2 结论 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 英文摘要 | 第42页 |
