| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 Fus的研究进展 | 第9-11页 |
| 1.2 RNA结合蛋白研究概述 | 第11-15页 |
| 1.2.1 RNA结合蛋白简介 | 第11页 |
| 1.2.2 RNA结合蛋白识别模块及作用机制 | 第11-14页 |
| 1.2.3 RNA结合蛋白在生物体中功能的研究简述 | 第14-15页 |
| 1.3 生长通路相关基因及鱼类两性生长异形的研究概述 | 第15-17页 |
| 1.4 CRIS PER/Cas9基因编辑技术概述 | 第17页 |
| 1.5 实验动物研究背景 | 第17-18页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 实验材料与方法 | 第19-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-36页 |
| 2.2.1 RNA提取 | 第21-22页 |
| 2.2.2 RNA逆转录 | 第22页 |
| 2.2.3 荧光定量PCR | 第22-24页 |
| 2.2.4 斑马鱼fus GRISPR/Cas9敲除系统构建 | 第24-28页 |
| 2.2.5 显微注射 | 第28-29页 |
| 2.2.6 斑马鱼敲除靶位点有效性验证 | 第29-31页 |
| 2.2.7 斑马鱼纯合突变体筛选 | 第31-32页 |
| 2.2.8 斑马鱼体长测量 | 第32页 |
| 2.2.9 斑马鱼白光图拍照 | 第32-33页 |
| 2.2.10 斑马鱼胚胎整体原位杂交(WISH) | 第33-36页 |
| 2.2.11 斑马鱼触摸反应测试 | 第36页 |
| 2.2.12 数据分析 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-49页 |
| 3.1 fus序列分析 | 第36-37页 |
| 3.2 fus时空表达分析 | 第37-38页 |
| 3.3 斑马鱼fus CRIS PR/Cas9系统构建 | 第38-44页 |
| 3.3.1 斑马鱼fus CRIS PR/Cas9敲除靶位点的设计 | 第38-39页 |
| 3.3.2 斑马鱼fus Cas9 mRNA与gRNA的合成 | 第39-41页 |
| 3.3.3 fus靶位点有效性验证 | 第41-42页 |
| 3.3.4 fus突变类型及纯合突变体的获得 | 第42-44页 |
| 3.4 fus调控斑马鱼体型生长以及在成鱼中调控两性生长异形 | 第44-47页 |
| 3.4.1 fus调控斑马鱼幼鱼的体长 | 第44-46页 |
| 3.4.2 fus调控斑马鱼成鱼的体重体长及两性生长异形 | 第46-47页 |
| 3.5 fus突变导致生长相关基因的表达失调 | 第47-48页 |
| 3.6 fus突变对斑马鱼的运动行为没有产生影响 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
