| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| 1.1 Nanog基因的研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1.1 Nanog基因的发现 | 第13页 |
| 1.1.2 Nanog基因的分子结构 | 第13-14页 |
| 1.1.3 Nanog基因的表达模式 | 第14-15页 |
| 1.1.4 Nanog基因的功能 | 第15-18页 |
| 1.1.5 Nanog基因的表达调控 | 第18页 |
| 1.2 本研究的主要内容、目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 青鱼nanog基因的克隆、表达模式分析 | 第20-48页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 材料和方法 | 第20-35页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.2.2 主要试剂和仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.3 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.4 DNA提取和序列克隆 | 第26-27页 |
| 2.2.5 基因序列比对与分析 | 第27-28页 |
| 2.2.6 半定量RT-PCR | 第28页 |
| 2.2.7 原位杂交 | 第28-31页 |
| 2.2.8 交错式热不对称PCR(Tail-PCR) | 第31-33页 |
| 2.2.9 双荧光素酶质粒构建与鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.10 双荧光素酶质粒活性检测 | 第34-35页 |
| 2.3 结果 | 第35-45页 |
| 2.3.1 青鱼nanog基因克隆及序列分析 | 第35-37页 |
| 2.3.2 多物种Nanog氨基酸序列比对及系统进化树的构建 | 第37-39页 |
| 2.3.3 青鱼nanog基因半定量RT-PCR分析结果 | 第39-40页 |
| 2.3.4 青鱼nanog基因原位杂交分析结果 | 第40-42页 |
| 2.3.5 青鱼nanog基因启动子区序列的获得 | 第42页 |
| 2.3.6 青鱼nanog基因启动子生物信息学分析 | 第42-43页 |
| 2.3.7 青鱼nanog基因启动子不同区段荧光素酶报告系统活性检测 | 第43-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-48页 |
| 第三章 青鱼oct4基因的克隆、表达模式分析 | 第48-58页 |
| 3.1 引言 | 第48页 |
| 3.2 Oct4基因的研究进展 | 第48-49页 |
| 3.3 材料和方法 | 第49-51页 |
| 3.3.1 实验材料 | 第49页 |
| 3.3.2 主要试剂和仪器 | 第49页 |
| 3.3.3 实验方法 | 第49-50页 |
| 3.3.4 半定量RT-PCR | 第50-51页 |
| 3.3.5 原位杂交 | 第51页 |
| 3.4 结果 | 第51-56页 |
| 3.4.1 青鱼oct4基因克隆及序列分析 | 第51-53页 |
| 3.4.2 多物种Oct4蛋白序列比对及系统进化树的构建 | 第53-54页 |
| 3.4.3 青鱼oct4基因半定量RT-PCR分析结果 | 第54-55页 |
| 3.4.4 青鱼oct4基因原位杂交分析结果 | 第55-56页 |
| 3.5 讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 青鳉肌肉细胞系的建立 | 第58-70页 |
| 4.1 引言 | 第58页 |
| 4.2 鱼类细胞培养技术进展 | 第58-59页 |
| 4.3 材料和方法 | 第59-63页 |
| 4.3.1 主要试剂和仪器 | 第59-60页 |
| 4.3.2 实验方法 | 第60-63页 |
| 4.4 结果 | 第63-68页 |
| 4.4.1 青鳉肌肉细胞的原代培养 | 第63页 |
| 4.4.2 青鳉肌肉细胞的传代培养 | 第63-64页 |
| 4.4.3 细胞的冻存和复苏能力 | 第64页 |
| 4.4.4 细胞的核型分析 | 第64-65页 |
| 4.4.5 细胞生长曲线的测定 | 第65页 |
| 4.4.6 细胞的来源鉴定 | 第65-66页 |
| 4.4.7 细胞的脂质体转染效率分析 | 第66-67页 |
| 4.4.8 转基因细胞系的获得 | 第67-68页 |
| 4.5 讨论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 附录 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
