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CyHV-2引起的异育银鲫鳃出血病组织病理及致病机理研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
第1章 文献综述第14-28页
    1.1 我国鲫鱼生物学分类、地理种群、养殖品种与养殖概况第14-18页
        1.1.1 我国鲫鱼生物学分类第14页
        1.1.2 我国鲫鱼地理种群第14-15页
        1.1.3 养殖品种与养殖概况第15-17页
        1.1.4 小结第17-18页
    1.2 鲫鱼病毒性病害种类及研究进展第18-24页
        1.2.1 鲫鱼病毒性病害种类第18页
        1.2.2 鲫鱼病毒性病害研究进展第18-23页
        1.2.3 小结第23-24页
    1.3 异育银鲫鳃出血病的发现第24-26页
    1.4 本论文的研究目的、意义、内容和技术路线第26-28页
        1.4.1 本论文研究目的和意义第26-27页
        1.4.2 本论文研究内容第27页
        1.4.3 本论文技术路线第27-28页
第2章 鳃出血病流行病学调查第28-36页
    2.1 调查方法第28-30页
    2.2 调查用仪器设备第30页
    2.3 结果第30-34页
        2.3.1 发病历史第30-31页
        2.3.2 发病季节第31页
        2.3.3 发病症状第31-32页
        2.3.4 主要危害对象第32-33页
        2.3.5 苗种来源及养殖管理(苗种来源、养殖模式、养殖水质状况、饲料种类)第33-34页
    2.4 分析与讨论第34-36页
第3章 鳃出血病的病理学研究及病原鉴定第36-61页
    3.1 材料第36-39页
        3.1.1 主要仪器设备第36页
        3.1.2 主要试剂第36-38页
        3.1.3 样品采集第38-39页
    3.2 方法第39-41页
        3.2.1 光镜样品的制作与处理第39-40页
        3.2.2 电子显微镜样品制作与处理第40页
        3.2.3 PCR扩增与序列测定第40页
        3.2.4 柯赫氏法验证的回归感染实验第40-41页
    3.3 结果第41-57页
        3.3.1 组织病理观察第41-47页
        3.3.2 病理损伤评价第47-49页
        3.3.3 超微病理观察第49-53页
        3.3.4 PCR扩增与序列测定第53-54页
        3.3.5 回归感染试验第54-55页
        3.3.6 回归感染试验后的超微病理学验证第55-57页
    3.4 讨论第57-61页
第4章 CyHV-2荧光原位杂交检测方法的建立第61-68页
    4.1 主要试剂与仪器第61-62页
    4.2 实验方法第62-64页
        4.2.1 CyHV-2的PCR检测第62页
        4.2.2 样品固定及切片制备第62页
        4.2.3 探针合成与标记第62-63页
        4.2.4 原位杂交第63-64页
    4.3 结果第64-67页
    4.4 讨论第67-68页
第5章 基于转录组和蛋白组学研究CYHV-2的致病机理第68-112页
    5.1 实验材料第68-69页
        5.1.1 实验动物和病毒第68页
        5.1.2 主要器材及设备第68-69页
        5.1.3 主要试剂第69页
    5.2 实验方法第69-77页
        5.2.1 CyHV-2感染异育银鲫及头肾组织的取样第69-70页
        5.2.2 异育银鲫头肾总RNA的提取及浓度测定第70-71页
        5.2.3 Oligo dT富集异育银鲫头肾mRNA、片段化mRNA、反转录合成cDNA、连接adaptor第71页
        5.2.4 异育银鲫头肾转录组Illumina Hiseq上机测序、数据质量剪切及统计第71页
        5.2.5 异育银鲫头肾转录组从头组装及注释第71-73页
        5.2.6 异育银鲫头肾转录组基因表达差异分析第73-74页
        5.2.7 异育银鲫头肾总蛋白的提取、浓度测定及胰酶酶解第74页
        5.2.8 异育银鲫头肾总蛋白TMT标记、HPLC分级、液相色谱-质谱联用分析第74-75页
        5.2.9 异育银鲫头肾总蛋白数据库搜索第75页
        5.2.10 异育银鲫头肾总蛋白生物信息学分析第75-76页
        5.2.11 实时荧光定量PCR检测差异表达蛋白基因水平表达变化第76-77页
    5.3 实验结果第77-109页
        5.3.1 异育银鲫头肾转录组测序试验结果与分析第77-87页
        5.3.2 异育银鲫头肾蛋白质组结果与分析第87-93页
        5.3.3 异育银鲫头肾转录组与蛋白质组联合分析第93-107页
        5.3.4 qRT-PCR验证差异基因的表达变化第107-109页
    5.4 讨论第109-112页
第6章 基于代谢组学研究CYHV-2对异育银鲫代谢的影响第112-130页
    6.1 实验材料第112页
        6.1.1 主要器材及设备第112页
        6.1.2 主要试剂第112页
    6.2 实验方法第112-116页
        6.2.1 CyHV-2感染异育银鲫血清取样第112-113页
        6.2.2 异育银鲫血清代谢组样品处理方法第113-114页
        6.2.3 色谱-质谱分析第114页
        6.2.4 数据处理第114-115页
        6.2.5 差异代谢物的筛选第115页
        6.2.6 差异代谢物的生物信息学分析第115-116页
    6.3 实验结果第116-128页
        6.3.1 异育银鲫血清代谢组质量控制第116-117页
        6.3.2 异育银鲫血清代谢组数据分析第117-121页
        6.3.3 感染CyHV-2过程中异育银鲫血清代谢第121-128页
        6.3.4 差异代谢物生物信息学分析第128页
    6.4 讨论第128-130页
全文小结第130-133页
参考文献第133-143页
在读期间发表的学术论文及研究成果第143-144页
致谢第144页

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