摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 引言 | 第14-27页 |
1.1 环形泰勒虫概述 | 第14-16页 |
1.1.1 病原形态结构 | 第14页 |
1.1.2 环形泰勒虫的生活史 | 第14-15页 |
1.1.3 环形泰勒虫的分布和流行 | 第15-16页 |
1.2 环形泰勒虫的诊断方法 | 第16页 |
1.3 环形泰勒虫遗传多样性的研究现状 | 第16-17页 |
1.4 Toll样受体与寄生虫感染 | 第17-22页 |
1.4.1 TLRs概述 | 第17-19页 |
1.4.2 TLRs在抗寄生虫感染免疫中的作用 | 第19-22页 |
1.4.2.1 TLRs在抗弓形虫感染中的作用 | 第19-20页 |
1.4.2.2 TLRs在抗锥虫感染中的作用 | 第20页 |
1.4.2.3 TLRs在抗利什曼原虫感染中的作用 | 第20-21页 |
1.4.2.4 TLRs在抗蠕虫感染中的作用 | 第21页 |
1.4.2.5 TLRs在抗混合感染中的作用 | 第21-22页 |
1.5 NLR家族与寄生虫感染 | 第22-25页 |
1.5.1 NLRs概述 | 第22-23页 |
1.5.2 NLRs在抗寄生虫感染免疫中的作用 | 第23-25页 |
1.5.2.1 NLRs在抗弓形虫感染中的作用 | 第23-24页 |
1.5.2.2 NLRs在抗疟原虫感染中的作用 | 第24页 |
1.5.2.3 NLRs在抗锥虫感染中的作用 | 第24-25页 |
1.5.2.4 NLRs在抗利什曼原虫感染中的作用 | 第25页 |
1.6 研究目的与意义 | 第25-27页 |
第二章 牛环形泰勒虫LF-RPA检测方法的建立 | 第27-35页 |
2.1 材料和方法 | 第27-30页 |
2.1.1 试验材料 | 第27页 |
2.1.2 仪器设备和试剂 | 第27-28页 |
2.1.3 动物感染和环形泰勒虫红细胞阶段裂殖子纯化 | 第28页 |
2.1.4 基因组DNA提取 | 第28-29页 |
2.1.5 LF-RPA反应引物和探针的设计 | 第29页 |
2.1.6 LF-RPA反应和检测结果的读取 | 第29页 |
2.1.7 PCR试验 | 第29-30页 |
2.2 结果与分析 | 第30-33页 |
2.2.1 试验动物 | 第30页 |
2.2.2 LF-RPA最佳反应温度和时间 | 第30-31页 |
2.2.3 LF-RPA反应的特异性分析 | 第31-32页 |
2.2.4 LF-RPA反应的敏感性分析 | 第32-33页 |
2.2.5 临床样品的检测 | 第33页 |
2.3 讨论 | 第33-35页 |
第三章 中国地区环形泰勒虫遗传多样性的研究 | 第35-45页 |
3.1 材料和方法 | 第35-38页 |
3.1.1 试验材料 | 第35-36页 |
3.1.2 仪器设备和试剂 | 第36页 |
3.1.3 环形泰勒虫阳性样品的筛选 | 第36页 |
3.1.4 微卫星和小卫星的基因分型 | 第36-37页 |
3.1.5 数据分析 | 第37-38页 |
3.2 结果与分析 | 第38-43页 |
3.2.1 PCR检测阳性样品结果 | 第38-39页 |
3.2.2 种群多样性和MOI分析 | 第39-40页 |
3.2.3 种群连锁平衡分析 | 第40-41页 |
3.2.4 种群遗传分化分析 | 第41页 |
3.2.5 种群遗传结构分析 | 第41-43页 |
3.3 讨论 | 第43-45页 |
第四章 环形泰勒虫体外刺激牛PBMC免疫相关基因的转录表达谱分析 | 第45-64页 |
4.1 材料和方法 | 第45-51页 |
4.1.1 试验材料 | 第45-46页 |
4.1.2 仪器设备和试剂 | 第46页 |
4.1.3 环形泰勒虫子孢子悬液的制备 | 第46页 |
4.1.4 牛PBMC的分离、感染和培养 | 第46-47页 |
4.1.5 环形泰勒虫子孢子感染后的牛PBMC鉴定和样品收集 | 第47页 |
4.1.6 RNA提取和质量鉴定 | 第47页 |
4.1.7 文库构建和测序 | 第47-48页 |
4.1.8 转录表达谱数据分析 | 第48页 |
4.1.9 差异表达基因分析 | 第48页 |
4.1.10 荧光定量PCR验证 | 第48-50页 |
4.1.11 细胞上清中细胞因子检测及数据分析 | 第50-51页 |
4.2 结果与分析 | 第51-61页 |
4.2.1 环形泰勒虫子孢子悬液鉴定结果 | 第51页 |
4.2.2 环形泰勒虫子孢子感染牛PBMC鉴定结果及RNA质量检测 | 第51-52页 |
4.2.3 RNA质量检测 | 第52页 |
4.2.4 转录组测序数据分析 | 第52-53页 |
4.2.5 差异表达基因的筛选 | 第53-54页 |
4.2.6 差异表达基因GO富集分析 | 第54-56页 |
4.2.7 差异表达基因KEGG富集分析 | 第56-57页 |
4.2.8 差异表达基因参与的免疫反应 | 第57-60页 |
4.2.9 荧光定量PCR验证差异基因的表达水平 | 第60-61页 |
4.2.10 细胞上清中细胞因子检测结果 | 第61页 |
4.3 讨论 | 第61-64页 |
第五章 环形泰勒虫感染对牛TLRs和NLRs信号通路的影响 | 第64-76页 |
5.1 材料和方法 | 第64-69页 |
5.1.1 试验材料 | 第64-65页 |
5.1.2 仪器设备和试剂 | 第65页 |
5.1.3 环形泰勒虫子孢子悬液的制备及动物感染试验 | 第65页 |
5.1.4 血液样品的收集及处理 | 第65页 |
5.1.5 环形泰勒虫感染鉴定 | 第65-66页 |
5.1.6 牛PBMC的分离 | 第66页 |
5.1.7 RNA提取和质量鉴定 | 第66页 |
5.1.8 cDNA合成 | 第66-67页 |
5.1.9 PCRArray试验及数据分析 | 第67-68页 |
5.1.10 荧光定量PCR验证 | 第68-69页 |
5.1.11 血清中细胞因子检测及数据分析 | 第69页 |
5.2 结果与分析 | 第69-73页 |
5.2.1 环形泰勒虫感染鉴定结果 | 第69-70页 |
5.2.2 TLRs和NLRs信号通路相关基因的筛选结果 | 第70-72页 |
5.2.3 荧光定量PCR验证差异基因的表达水平 | 第72-73页 |
5.2.4 血清中细胞因子检测结果 | 第73页 |
5.3 讨论 | 第73-76页 |
第六章 结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
作者简介 | 第91页 |