摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 综述 | 第12-41页 |
1.1 选题的依据、目的和意义 | 第12-15页 |
1.1.1 选题的依据 | 第12-14页 |
1.1.2 目的和意义 | 第14-15页 |
1.2 根瘤菌国内外研究概况 | 第15-17页 |
1.2.1 根瘤菌多样性研究进展 | 第15-16页 |
1.2.2 根瘤菌分子遗传学的研究进展 | 第16-17页 |
1.3 细菌耐盐机制的研究进展 | 第17-36页 |
1.3.1 细菌渗透调节机制 | 第18-29页 |
1.3.2 外膜孔道蛋白(porin):OmpC 和 OmpF | 第29页 |
1.3.3 双组份调节系统 EnvZ/OmpR | 第29-30页 |
1.3.4 细菌中的阳离子运输蛋白或系统 | 第30-35页 |
1.3.5 转录因子的全细胞调控作用 | 第35-36页 |
1.4 根瘤菌-豆科植物相互作用提高植物的抗逆性 | 第36-37页 |
1.5 转座子及转座子诱变法 | 第37-39页 |
1.5.1 转座子和转座子标签技术介绍 | 第37页 |
1.5.2 Tn5 转座子的特点及应用 | 第37-39页 |
1.6 本研究的内容及技术路线 | 第39-41页 |
1.6.1 试验方案 | 第39页 |
1.6.2 研究内容 | 第39页 |
1.6.3 技术路线 | 第39-41页 |
第二章 骆驼刺中慢生根瘤菌耐盐菌株的筛选 | 第41-49页 |
2.1 前言 | 第41页 |
2.2 材料和方法 | 第41-44页 |
2.2.1 培养基与营养液 | 第41-42页 |
2.2.2 仪器及设备 | 第42页 |
2.2.3 供试菌株 | 第42页 |
2.2.4 回接实验 | 第42-43页 |
2.2.5 抗逆性测定 | 第43-44页 |
2.3 结果与分析 | 第44-47页 |
2.3.1 骆驼刺根瘤调查与结瘤分析 | 第44-45页 |
2.3.2 骆驼刺根瘤菌抗逆性分析 | 第45-47页 |
2.4 讨论 | 第47-49页 |
第三章 M. alhagi CCNWXJ12-2~T盐敏感突变体的获得及生长测定 | 第49-62页 |
3.1 前言 | 第49页 |
3.2 材料与方法 | 第49-55页 |
3.2.1 材料 | 第49-52页 |
3.2.2 实验方法 | 第52-55页 |
3.3 结果与分析 | 第55-61页 |
3.3.1 M. alhagi CCNWXJ12-~(2T)突变体筛选培养基的选择 | 第55页 |
3.3.2 M. alhagi CCNWXJ12-~(2T)突变体库的建立及盐敏感突变体的筛选 | 第55-56页 |
3.3.3 M. alhagi CCNWXJ12-~(2T)盐敏感突变体正确性的验证 | 第56-57页 |
3.3.4 盐敏感突变体的耐盐性分析 | 第57-58页 |
3.3.5 盐敏感突变株在其它渗透压条件下的生长 | 第58-60页 |
3.3.6 盐敏感突变株生长曲线的测定 | 第60-61页 |
3.3.7 盐敏感突变株 Mam4 与野生菌的表型比较观察 | 第61页 |
3.4 讨论 | 第61-62页 |
第四章 突变基因的克隆及序列分析 | 第62-90页 |
4.1 前言 | 第62页 |
4.2 材料与方法 | 第62-65页 |
4.2.1 实验材料 | 第62-63页 |
4.2.2 实验方法 | 第63-65页 |
4.3 结果与分析 | 第65-87页 |
4.3.1 侧翼序列的克隆 | 第65-67页 |
4.3.2 Tn5 插入位点 blast 比对定位及物理图谱绘制 | 第67-69页 |
4.3.3 插入突变基因的鉴定及所编码蛋白分析 | 第69页 |
4.3.4 插入突变基因序列分析及功能预测 | 第69-86页 |
4.3.5 突变基因所编码蛋白的亚细胞定位分析 | 第86-87页 |
4.4 讨论 | 第87-90页 |
第五章 突变基因全长的克隆及功能互补验证分析 | 第90-97页 |
5.1 前言 | 第90页 |
5.2 材料与方法 | 第90-93页 |
5.2.1 实验材料 | 第90-91页 |
5.2.2 实验方法 | 第91-93页 |
5.3 结果与分析 | 第93-96页 |
5.3.1 突变基因全长的扩增及测序验证 | 第93页 |
5.3.2 功能互补质粒的构建(以 952 基因为例) | 第93-94页 |
5.3.3 功能互补结果分析 | 第94-95页 |
5.3.4 突变体 Mam4 及功能互补菌多糖含量测定 | 第95-96页 |
5.4 讨论 | 第96-97页 |
第六章 全基因组测序及渗透调节网络分析 | 第97-105页 |
6.1 前言 | 第97-98页 |
6.2 材料与方法 | 第98-99页 |
6.2.1 M. alhagi CCNWXJ12-2~T的生物学特性 | 第98页 |
6.2.2 基因组测序和拼接 | 第98页 |
6.2.3 基因预测及注释 | 第98-99页 |
6.3 结果及分析 | 第99-103页 |
6.3.1 全基因组测序结果 | 第99-100页 |
6.3.2 功能基因注释及功能分类 | 第100-101页 |
6.3.3 渗透调节相关功能基因分析 | 第101-102页 |
6.3.4 M. alhagi CCNWXJ12-2~T渗透调节网络分析 | 第102-103页 |
6.4 讨论 | 第103-105页 |
第七章 结论与创新 | 第105-108页 |
7.1 结论 | 第105-106页 |
7.1.1 M. alhagi CCNWXJ12-2~T菌株的抗逆性 | 第105页 |
7.1.2 转座子突变体库的建立及盐敏感突变体的筛选及生长测定 | 第105页 |
7.1.3 突变基因的克隆及功能预测与分析 | 第105-106页 |
7.1.4 突变基因全长的扩增及功能互补分析 | 第106页 |
7.1.5 M. alhagi CCNWXJ12-2~T全基因组测序及渗透调节网络分析 | 第106页 |
7.2 创新点 | 第106-108页 |
参考文献 | 第108-121页 |
附录 | 第121-124页 |
缩略词 | 第124-125页 |
致谢 | 第125-127页 |
作者简介 | 第127页 |