内容摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
1 综述 | 第12-24页 |
1.1 蛋白酶体降解系统 | 第12-15页 |
1.1.1 20S核心蛋白酶体 | 第12-13页 |
1.1.2 蛋白酶体激活因子 | 第13-15页 |
1.2 REGγ的研究进展 | 第15-17页 |
1.3 蛋白质氧化 | 第17-18页 |
1.4 氧化蛋白降解 | 第18-23页 |
1.4.1 氧化蛋白降解的研究进展 | 第18-21页 |
1.4.2 p21的降解 | 第21-22页 |
1.4.3 血红蛋白的降解 | 第22-23页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-46页 |
2.1 材料 | 第24-28页 |
2.1.1 细胞和质粒 | 第24-25页 |
2.1.2 抗体及抗体亲和凝胶颗粒 | 第25页 |
2.1.3 试剂 | 第25-26页 |
2.1.4 仪器设备 | 第26-28页 |
2.2 方法 | 第28-46页 |
2.2.1 免疫印迹(Western Blotting) | 第28-31页 |
2.2.2 RNA提取 | 第31-32页 |
2.2.3 反转录 | 第32-33页 |
2.2.4 荧光实时定量PCR(QPCR,Real-time PCR) | 第33-35页 |
2.2.5 半定量PCR扩增目的片段 | 第35-36页 |
2.2.6 细胞蛋白酶体trypsin-like活性的检测 | 第36-37页 |
2.2.7 质粒提取 | 第37-38页 |
2.2.8 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP) | 第38-39页 |
2.2.9 亚克隆构建 | 第39-41页 |
2.2.10 慢病毒包装 | 第41-42页 |
2.2.11 细胞免疫荧光(Immunofluorescence) | 第42-43页 |
2.2.12 免疫组化(Immunohistochemistry) | 第43-46页 |
3 结果与分析 | 第46-65页 |
3.1 REG γ在氧化应激条件下对p21的影响 | 第46-53页 |
3.1.1 氧化应激对p21蛋白水平和mRNA水平的影响 | 第46-49页 |
3.1.2 REGγ促进氧化p21的降解 | 第49-51页 |
3.1.3 REGγ在多种细胞系中促进氧化p21 | 第51-52页 |
3.1.4 抗氧化剂对氧化p21降解的调节 | 第52-53页 |
3.2 REG γ调控氧化p21降解的机制探究 | 第53-59页 |
3.2.1 氧化p21的降解依赖于蛋白酶体 | 第53-55页 |
3.2.2 氧化应激增强依赖于REGγ的蛋白酶体的trypsin-like位点活性 | 第55-57页 |
3.2.3 氧化应激促进REGγ-蛋白酶体的组装 | 第57-59页 |
3.3 REG γ与血红蛋白的探究 | 第59-65页 |
3.3.1 REGγ对HBD蛋白水平的下调 | 第59-61页 |
3.3.2 REGγ促进氧化应激下HBD蛋白水平降低 | 第61-62页 |
3.3.3 REGγ在小鼠组织中对血红蛋白的下调 | 第62-65页 |
4 讨论与展望 | 第65-67页 |
附录 | 第67-73页 |
参考文献 | 第73-82页 |
后记 | 第82-83页 |