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REGγ在氧化蛋白降解中的作用及其相关靶蛋白研究

内容摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
1 综述第12-24页
    1.1 蛋白酶体降解系统第12-15页
        1.1.1 20S核心蛋白酶体第12-13页
        1.1.2 蛋白酶体激活因子第13-15页
    1.2 REGγ的研究进展第15-17页
    1.3 蛋白质氧化第17-18页
    1.4 氧化蛋白降解第18-23页
        1.4.1 氧化蛋白降解的研究进展第18-21页
        1.4.2 p21的降解第21-22页
        1.4.3 血红蛋白的降解第22-23页
    1.5 本研究的目的和意义第23-24页
2 材料与方法第24-46页
    2.1 材料第24-28页
        2.1.1 细胞和质粒第24-25页
        2.1.2 抗体及抗体亲和凝胶颗粒第25页
        2.1.3 试剂第25-26页
        2.1.4 仪器设备第26-28页
    2.2 方法第28-46页
        2.2.1 免疫印迹(Western Blotting)第28-31页
        2.2.2 RNA提取第31-32页
        2.2.3 反转录第32-33页
        2.2.4 荧光实时定量PCR(QPCR,Real-time PCR)第33-35页
        2.2.5 半定量PCR扩增目的片段第35-36页
        2.2.6 细胞蛋白酶体trypsin-like活性的检测第36-37页
        2.2.7 质粒提取第37-38页
        2.2.8 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)第38-39页
        2.2.9 亚克隆构建第39-41页
        2.2.10 慢病毒包装第41-42页
        2.2.11 细胞免疫荧光(Immunofluorescence)第42-43页
        2.2.12 免疫组化(Immunohistochemistry)第43-46页
3 结果与分析第46-65页
    3.1 REG γ在氧化应激条件下对p21的影响第46-53页
        3.1.1 氧化应激对p21蛋白水平和mRNA水平的影响第46-49页
        3.1.2 REGγ促进氧化p21的降解第49-51页
        3.1.3 REGγ在多种细胞系中促进氧化p21第51-52页
        3.1.4 抗氧化剂对氧化p21降解的调节第52-53页
    3.2 REG γ调控氧化p21降解的机制探究第53-59页
        3.2.1 氧化p21的降解依赖于蛋白酶体第53-55页
        3.2.2 氧化应激增强依赖于REGγ的蛋白酶体的trypsin-like位点活性第55-57页
        3.2.3 氧化应激促进REGγ-蛋白酶体的组装第57-59页
    3.3 REG γ与血红蛋白的探究第59-65页
        3.3.1 REGγ对HBD蛋白水平的下调第59-61页
        3.3.2 REGγ促进氧化应激下HBD蛋白水平降低第61-62页
        3.3.3 REGγ在小鼠组织中对血红蛋白的下调第62-65页
4 讨论与展望第65-67页
附录第67-73页
参考文献第73-82页
后记第82-83页

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