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凹凸面基底上HUVEC生长行为的研究及其在血管生成模型构建中的应用

中文摘要第3-6页
英文摘要第6-9页
英文缩略词对照表第14-15页
1 绪论第15-31页
    1.1 问题的提出及研究意义第15-17页
        1.1.1 圆柱形凹凸面微拓扑结构对细胞极化及爬行的影响第15-16页
        1.1.2 利用微拓扑结构构建更优的体外血管生成模型第16-17页
    1.2 国内外研究现状第17-27页
        1.2.1 材料表面微拓扑结构的研究进展第17-20页
        1.2.2 基于圆形凹凸面的微拓扑结构对细胞行为的影响第20-23页
        1.2.3 细胞有限元模型的研究进展第23-25页
        1.2.4 基于微流控技术的体外血管生成模型的构建第25-27页
    1.3 本文的研究目的和研究内容第27-31页
        1.3.1 本文研究目的第27-28页
        1.3.2 本文主要研究内容第28-29页
        1.3.3 本文技术路线第29页
        1.3.4 本文研究的创新点第29-31页
2 凹凸面基底结构基底的制备及评价第31-39页
    2.1 引言第31页
    2.2 实验材料及仪器设备第31-32页
        2.2.1 主要实验试剂第31-32页
    2.3 实验方法第32-34页
        2.3.1 带沟槽结构的不锈钢模版的制备第32页
        2.3.2 用旋涂法制备PDMS薄片第32-33页
        2.3.3 PDMS凹面和凸面基底结构基底的制备第33页
        2.3.4 不同尺寸凹面和凸面基底结构表面构型特征观测第33-34页
        2.3.5 MDA-MB-231 细胞在不同尺寸凹凸面结构上的生长行为观测第34页
    2.4 实验结果第34-38页
        2.4.1 不同尺寸凹凸面基底结构的表面构型特征第34-36页
        2.4.2 MDA-MB-231 细胞在不同尺寸凹凸面结构上的生长行为第36-38页
    2.5 讨论与分析第38页
    2.6 本章小结第38-39页
3 不同细胞在PDMS凹凸面基底上的极化生长第39-57页
    3.1 引言第39-40页
    3.2 实验材料及仪器设备第40-42页
        3.2.1 主要实验试剂第40-41页
        3.2.2 主要实验仪器设备第41页
        3.2.3 实验细胞第41页
        3.2.4 主要实验试剂的配制第41-42页
    3.3 实验方法第42-45页
        3.3.1 细胞培养第42页
        3.3.2 四种细胞在PDMS凹凸面基底结构上极化行为的观察及统计分析第42-43页
        3.3.3 接种初期A7r5细胞在PDMS凹凸面基底结构上的极化行为第43页
        3.3.4 HUVEC和HFF-1 细胞在凹凸面基底上的扫描电镜观察第43页
        3.3.5 四种细胞F-actin的免疫荧光染色第43-44页
        3.3.6 HUVECs在PDMS凹凸面基底结构上培养1d后的F-actin免疫荧光染色第44页
        3.3.7 经肿瘤上清液诱导培养的HUVECs的极化行为及western-bloting检测第44-45页
        3.3.8 结果分析第45页
    3.4 实验结果第45-53页
        3.4.1 四种细胞在PDMS凹凸面基底结构上极化行为的相差显微镜观察及统计分析第45-48页
        3.4.2 接种初期A7r5在PDMS凹凸面基底结构上的极化行为第48页
        3.4.3 HUVEC和HFF-1 细胞在凹凸面基底上的扫描电镜观察第48-49页
        3.4.4 四种细胞F-actin免疫荧光染色第49-51页
        3.4.5 HUVECs在PDMS凹凸面基底结构上培养 1 d后的F-actin免疫荧光染色第51页
        3.4.6 经肿瘤上清液诱导培养的HUVECs的极化行为及western-bloting检测第51-53页
    3.5 讨论与分析第53-55页
    3.6 本章小结第55-57页
4 HUVECs在PDMS凹凸面基底结构上的爬行行为第57-65页
    4.1 引言第57页
    4.2 实验材料及仪器设备第57-58页
        4.2.1 主要实验试剂第57页
        4.2.2 主要实验仪器设备第57-58页
        4.2.3 实验细胞第58页
    4.3 实验方法第58-59页
        4.3.1 细胞培养第58页
        4.3.2 HUVECs在PDMS凹凸面基底结构上爬行行为的观测第58页
        4.3.3 HUVECs在凹凸面基底结构上生长密度变化的考察第58页
        4.3.4 结果分析第58-59页
    4.4 实验结果第59-63页
        4.4.1 HUVECs在PDMS凹凸面基底结构上爬行行为的观察及统计分析第59-61页
        4.4.2 HUVECs在凹凸面基底结构上生长密度变化的考察第61-63页
    4.5 讨论与分析第63-64页
    4.6 本章小结第64-65页
5 细胞在凹凸面基底上粘附行为的有限元模拟第65-77页
    5.1 引言第65-66页
    5.2 实验方法第66-68页
        5.2.1 HUVEC在不同基底上的粘附行为的有限元模拟第66-67页
        5.2.2 A7r5和MDA-MB-231 细胞的粘附行为的有限元模拟第67-68页
        5.2.3 EC和E_A对细胞在凹凸面基底上粘附行为的影响第68页
        5.2.4 HUVEC在不同曲率半径的凹凸面基底上的粘附行为的有限元模拟第68页
    5.3 实验结果第68-75页
        5.3.1 HUVEC在不同基底上的粘附行为的有限元模拟第68-70页
        5.3.2 A7r5和MDA-MB-231 细胞的粘附行为的有限元模拟第70-71页
        5.3.3 EC和E_A对细胞在凹凸面基底上粘附行为的影响第71-73页
        5.3.4 HUVEC在不同曲率半径的凹凸面基底上的粘附行为的有限元模拟第73-75页
    5.4 讨论与分析第75-76页
    5.5 本章小结第76-77页
6 微流控芯片的制备及功能表征第77-91页
    6.1 引言第77-78页
    6.2 实验材料及仪器设备第78-79页
        6.2.1 主要实验试剂第78页
        6.2.2 主要实验仪器设备第78-79页
        6.2.3 实验细胞第79页
        6.2.4 主要实验试剂的配制第79页
    6.3 实验方法第79-83页
        6.3.1 微流控芯片主体的制备第79-80页
        6.3.2 PDMS微孔栅栏的制备第80-81页
        6.3.3 PDMS微孔结构的扫描电镜观察第81页
        6.3.4 胶原的灌注第81-82页
        6.3.5 可溶性因子在 3D胶原凝胶中浓度梯度的形成及表征第82页
        6.3.6 VEGF浓度梯度场的仿真模拟第82-83页
    6.4 实验结果第83-88页
        6.4.1 微流控主芯片的制备第83页
        6.4.2 PDMS微孔结构第83-84页
        6.4.3 微流腔芯片中的胶原灌注浓度第84页
        6.4.4 可溶性因子在 3D胶原凝胶中的梯度分布及其仿真模拟第84-88页
    6.5 讨论与分析第88-89页
    6.6 本章小结第89-91页
7 基于微流控芯片构建体外血管生成模型第91-103页
    7.1 引言第91页
    7.2 实验材料及仪器设备第91-92页
        7.2.1 主要实验试剂第91-92页
        7.2.2 主要实验仪器设备第92页
        7.2.3 实验细胞第92页
    7.3 实验方法第92-93页
        7.3.1 脐静脉内皮细胞与微孔结构的复合培养第92-93页
        7.3.2 CFDA-SE活细胞染色示踪第93页
        7.3.3 HUVECs在VEGF浓度梯度诱导下迁移、出芽及腔管样结构形成能力的考察第93页
    7.4 实验结果第93-100页
        7.4.1 HUVECs在平置微孔结构上的生长行为第93-94页
        7.4.2 HUVECs在带栅栏芯片中的生长行为第94-95页
        7.4.3 HUVECs在 3D胶原凝胶中出芽及管腔样结构的形成第95-97页
        7.4.4 3D胶原凝胶中HUVECs生长行为的定量分析第97-100页
    7.5 讨论与分析第100-101页
    7.6 本章小结第101-103页
8 结论与展望第103-107页
    8.1 主要结论第103-104页
    8.2 后续研究工作的展望第104-107页
致谢第107-109页
参考文献第109-121页
附录第121-122页
    A作者在攻读博士期间发表的论文第121-122页
    B作者在攻读博士期间参加科研项目情况第122页
    C作者在攻读博士期间取得的科研成果第122页

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