| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-15页 |
| 英文缩略语 | 第16-20页 |
| 第一部分 ：利用在线数据库分析袢状核酸内切酶FEN1在乳腺癌患者中的表达和价值 | 第20-38页 |
| 1 前言 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-25页 |
| 2.1 试剂 | 第21页 |
| 2.2 仪器 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-25页 |
| 2.3.1 基于oncomine肿瘤数据库的生物信息学分析 | 第21-22页 |
| 2.3.2 利用在线数据库Kaplan–Meierplotter进行FEN1与乳腺癌患者的预后分析 | 第22-23页 |
| 2.3.3 乳腺癌标本收集及乳腺癌组织芯片制作 | 第23页 |
| 2.3.4 免疫组织化学SP方法及免疫组化结果判断 | 第23-24页 |
| 2.3.5 统计学分析 | 第24-25页 |
| 3 实验结果 | 第25-35页 |
| 3.1 Oncomine分析结果 | 第25-28页 |
| 3.1.1 FEN1mRNA在乳腺正常组织和癌组织中表达差异 | 第25页 |
| 3.1.2 FEN1mRNA表达与乳腺癌临床病理学参数的相关性分析 | 第25-27页 |
| 3.1.3 FEN1mRNA表达与乳腺癌患者临床结局的相关性分析 | 第27页 |
| 3.1.4 FEN1mRNA表达与乳腺癌患者分子分型的相关性分析 | 第27-28页 |
| 3.2 应用在线数据KaplanMeierplotter分析FEN1mRNA表达与乳腺癌患者的预后 | 第28-30页 |
| 3.3 本中心乳腺癌患者组织芯片分析FEN1蛋白表达与乳腺癌患者临床病理学参数的相关性和预后 | 第30-35页 |
| 3.3.1 病例纳入标准 | 第30-31页 |
| 3.3.2 FEN1蛋白表达与全部乳腺癌患者临床病理参数的相关性和生存分析 | 第31-33页 |
| 3.3.3 FEN1蛋白与三阴性乳腺癌患者临床病理学参数相关性和生存分析 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 第二部分 ：袢状核酸内切酶FEN1通过调控miR-26b-5p/PTEN/AKT参与三阴性乳腺癌细胞侵袭转移的机制研究 | 第38-59页 |
| 1 前言 | 第38-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-46页 |
| 2.1 试剂 | 第39页 |
| 2.2 仪器 | 第39-40页 |
| 2.3 实验方法 | 第40-46页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第40-41页 |
| 2.3.2 构建慢病毒转染的三阴性乳腺癌细胞系 | 第41页 |
| 2.3.3 脂质体介导siRNA转染 | 第41页 |
| 2.3.4 脂质体介导miRNA的mimic和inhibitor转染 | 第41-42页 |
| 2.3.5 mRNA和miRNA表达谱芯片 | 第42页 |
| 2.3.6 Westernblot检测蛋白水平 | 第42-43页 |
| 2.3.7 Transwell实验 | 第43页 |
| 2.3.8 动物实验 | 第43-44页 |
| 2.3.9 实时定量PCR(Real-TimePCR) | 第44-45页 |
| 2.3.10 统计学分析 | 第45-46页 |
| 3 实验结果 | 第46-56页 |
| 3.1 FEN1表达对三阴性乳腺癌细胞侵袭转移的影响 | 第46-48页 |
| 3.2 FEN1调控PI3K/AKT信号通路 | 第48-52页 |
| 3.3 FEN1负调控PTEN蛋白表达从而调控PI3K/AKT通路活化 | 第52-53页 |
| 3.4 FEN1通过miR-26b-5p负调控PTEN介导三阴性乳腺癌细胞的迁移 | 第53-56页 |
| 4 讨论 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 第三部分 ：FEN1参与ER阳性乳腺癌细胞对他莫昔芬敏感性的研究 | 第59-72页 |
| 1 前言 | 第59-60页 |
| 2 材料与方法 | 第60-64页 |
| 2.1 试剂 | 第60页 |
| 2.2 实验方法 | 第60-64页 |
| 2.2.1 GEO数据库筛选他莫昔芬耐药的乳腺癌数据集 | 第60-62页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第62页 |
| 2.2.3 脂质体介导siRNA转染和慢病毒转染 | 第62-63页 |
| 2.2.4 MTT法进行细胞活力检测 | 第63-64页 |
| 2.2.5 集落形成实验检测细胞增殖能力 | 第64页 |
| 2.2.6 Westernblot检测蛋白水平 | 第64页 |
| 2.2.7 统计学分析 | 第64页 |
| 3 实验结果 | 第64-70页 |
| 3.1 FEN1在他莫昔芬耐药的乳腺癌细胞系中的表达显著增高 | 第64-65页 |
| 3.2 过表达FEN1降低乳腺癌细胞对他莫昔芬的敏感性 | 第65-67页 |
| 3.3 敲减FEN1增加乳腺癌细胞对他莫昔芬的敏感性 | 第67-68页 |
| 3.4 FEN1表达的增高提示他莫昔芬治疗乳腺癌患者的不良预后 | 第68-70页 |
| 4 讨论 | 第70-71页 |
| 5 结论 | 第71-72页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 综述 | 第81-87页 |
| 参考文献 | 第84-87页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 个人简介 | 第89页 |
