摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第11-15页 |
第一部分 :miR-3189-3p增强S100A4-siRNA对胃癌细胞增殖、迁移和干细胞样特性的抑制作用 | 第15-32页 |
1 前言 | 第15-17页 |
2 材料和方法 | 第17-24页 |
2.1 细胞系 | 第17页 |
2.2 主要试剂和仪器 | 第17-18页 |
2.2.1 主要试剂 | 第17页 |
2.2.2 主要仪器 | 第17-18页 |
2.3 生物信息学网址和计算机分析软件 | 第18页 |
2.4 实验方法 | 第18-24页 |
2.4.1 细胞培养 | 第18页 |
2.4.2 细胞转染 | 第18-19页 |
2.4.3 细胞总RNA提取 | 第19页 |
2.4.4 反转录实时定量PCR检测mRNA及miRNA表达水平 | 第19-22页 |
2.4.5 CCK8细胞增殖实验 | 第22页 |
2.4.6 Transwell实验 | 第22页 |
2.4.7 划痕实验 | 第22页 |
2.4.8 低吸附悬浮培养观察细胞成球能力 | 第22-23页 |
2.4.9 软琼脂集落形成实验 | 第23页 |
2.4.10 统计学分析 | 第23-24页 |
3 结果 | 第24-30页 |
3.1 S100A4基因沉默抑制胃癌细胞MGC803中miR-3189-3p表达 | 第24页 |
3.2 MiR-3189-3p抑制胃癌细胞MGC803增殖 | 第24-25页 |
3.3 MiR-3189-3p抑制胃癌细胞MGC803迁移 | 第25-26页 |
3.4 MiR-3189-3p对胃癌细胞MGC803干样特性的影响 | 第26-27页 |
3.5 MiR-3189-3pmimics增强S100A4-siRNA对MGC803细胞增殖、迁移及干样特 | 第27-30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
第二部分 :miR-3189-3p靶向CFL2基因影响胃癌细胞MGC803的增殖、迁移和糖酵解 | 第32-54页 |
5 前言 | 第32-34页 |
6 材料和方法 | 第34-42页 |
6.1 细胞系 | 第34页 |
6.2 主要试剂和仪器 | 第34-35页 |
6.2.1 主要试剂 | 第34页 |
6.2.2 主要仪器 | 第34-35页 |
6.3 生物信息学网址和计算机分析软件 | 第35页 |
6.4 实验方法 | 第35-42页 |
6.4.1 细胞培养 | 第35-36页 |
6.4.2 细胞转染 | 第36页 |
6.4.3 细胞总RNA提取 | 第36页 |
6.4.4 实时定量PCR检测mRNA表达水平 | 第36-38页 |
6.4.5 Westernblotting检测细胞中蛋白表达 | 第38-39页 |
6.4.6 双荧光素酶报告基因实验 | 第39页 |
6.4.7 CCK8细胞增殖实验 | 第39页 |
6.4.8 Transwell实验 | 第39-40页 |
6.4.9 划痕实验 | 第40页 |
6.4.10 生存分析 | 第40页 |
6.4.11 lactate产量测定 | 第40页 |
6.4.12 乳酸脱氢酶(LDH)活性测定 | 第40-41页 |
6.4.13 统计学分析 | 第41-42页 |
7 结果 | 第42-50页 |
7.1 CFL2是miR-3189-3p的直接靶基因 | 第42-43页 |
7.2 CFL2-siRNA抑制MGC803细胞的增殖和迁移 | 第43-45页 |
7.3 CFL2介导miR-3189-3p在胃癌MGC803细胞中的功能效应 | 第45-46页 |
7.4 CFL2是胃癌的预后不良因子 | 第46页 |
7.5 miR-3189-3p抑制胃癌MGC803细胞糖酵解 | 第46-47页 |
7.6 miR-3189-3p对胃癌MGC803细胞LDH活性及糖酵解相关基因表达的影响.. | 第47-48页 |
7.7 CFL2促进胃癌MGC803细胞糖酵解 | 第48页 |
7.8 CFL2对胃癌MGC803细胞LDH活性及糖酵解相关基因表达的影响 | 第48-50页 |
8 讨论 | 第50-53页 |
9 结论 | 第53-54页 |
本研究创新性的自我评价 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
综述 | 第61-74页 |
参考文献 | 第66-74页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
个人简历 | 第76页 |