摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
主要符号对照表 | 第10-11页 |
引言 | 第11-13页 |
第1章 青藏高原茶卡盐湖微生物多样性 | 第13-29页 |
1.1 材料 | 第13-14页 |
1.1.1 样本采集及处理 | 第13页 |
1.1.2 主要试剂和仪器 | 第13-14页 |
1.2 方法 | 第14-16页 |
1.2.1 DNA的提取与PCR扩增 | 第14页 |
1.2.2 测序数据优化处理 | 第14-15页 |
1.2.3 群落结构与多样性分析 | 第15页 |
1.2.4 样本间相似性聚类分析 | 第15页 |
1.2.5 环境因子相关性分析 | 第15页 |
1.2.6 序列登陆号 | 第15-16页 |
1.3 结果 | 第16-24页 |
1.3.1 高通量测序数据优化分析 | 第16-17页 |
1.3.2 茶卡盐湖主要微生物群落分布 | 第17-18页 |
1.3.3 茶卡盐湖微生物多样性分析 | 第18页 |
1.3.4 茶卡盐湖微生物丰度及相似性聚类分析 | 第18-20页 |
1.3.5 茶卡盐湖环境因子CCA分析 | 第20-24页 |
1.4 讨论 | 第24-29页 |
第2章 四氢嘧啶生物合成基因操纵子序列克隆表达 | 第29-44页 |
2.1 材料 | 第29-32页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第29页 |
2.1.2 主要试剂及仪器 | 第29-30页 |
2.1.3 主要溶液及配制方法 | 第30-32页 |
2.2 方法 | 第32-38页 |
2.2.1 模式菌株全基因组DNA的提取 | 第32页 |
2.2.2 目的基因引物设计 | 第32页 |
2.2.3 四氢嘧啶生物合成基因操纵子序列的PCR扩增 | 第32-33页 |
2.2.4 目的基因纯化 | 第33页 |
2.2.5 大肠杆菌克隆载体构建及鉴定 | 第33-35页 |
2.2.6 不同原核表达载体的构建及鉴定 | 第35-38页 |
2.3 结果 | 第38-42页 |
2.3.1 引物设计结果 | 第38-39页 |
2.3.2 模式菌株全基因组DNA提取结果 | 第39页 |
2.3.3 四氢嘧啶生物合成基因操纵子序列PCR结果 | 第39-40页 |
2.3.4 阳性重组质粒提取及酶切鉴定 | 第40页 |
2.3.5 原核重组表达载体的验证 | 第40-42页 |
2.4 讨论 | 第42-44页 |
第3章 重组菌株的诱导表达、SDS-PAGE和耐盐能力检测 | 第44-53页 |
3.1 材料 | 第44-45页 |
3.1.1 实验菌株 | 第44页 |
3.1.2 主要仪器 | 第44页 |
3.1.3 主要试剂及配制 | 第44-45页 |
3.2 方法 | 第45-48页 |
3.2.1 重组菌株的IPTG诱导表达 | 第45-46页 |
3.2.2 目的蛋白的制备 | 第46页 |
3.2.3 SDS-PAGE蛋白电泳 | 第46-47页 |
3.2.4 重组菌株的耐盐梯度实验 | 第47-48页 |
3.2.5 高效液相检测重组菌株胞内Ectoine含量 | 第48页 |
3.3 结果 | 第48-51页 |
3.3.1 重组载体蛋白诱导表达的结果 | 第48-49页 |
3.3.2 重组菌株的生长曲线绘制 | 第49-50页 |
3.3.3 高效液相色谱检测结果 | 第50-51页 |
3.4 讨论 | 第51-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简历 | 第62-63页 |
综述 | 第63-75页 |
综述参考文献 | 第72-75页 |
衷心感谢以下基金资助 | 第75页 |