| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 精原干细胞研究进展 | 第10-15页 |
| 1.1.1 精原干细胞的定义与其生物学特性 | 第10-13页 |
| 1.1.2 精原干细胞的分离研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.3 精原干细胞长期培养以及鉴定 | 第14-15页 |
| 1.2 小分子化合物研究进展 | 第15-18页 |
| 第二章 通过不同细胞培养基质的筛选优化pSSCs的无饲养层长期培养体系 | 第18-30页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 实验动物与材料 | 第18-19页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第18页 |
| 2.2.2 主要仪器与耗材 | 第18-19页 |
| 2.3 方法 | 第19-23页 |
| 2.3.1 主要溶液的配置 | 第19-20页 |
| 2.3.2 猪睾丸原代细胞的分离 | 第20页 |
| 2.3.3 精原干细胞的培养与传代 | 第20-21页 |
| 2.3.4 猪睾丸组织切片免疫荧光染色 | 第21页 |
| 2.3.5 总RNA提取 | 第21页 |
| 2.3.6 引物设计 | 第21页 |
| 2.3.7 cDNA合成 | 第21-22页 |
| 2.3.8 PCR反应程序 | 第22页 |
| 2.3.9 多能性染料CDY1染色 | 第22页 |
| 2.3.10 碱性磷酸酶染色 | 第22页 |
| 2.3.11 细胞培养板处理 | 第22页 |
| 2.3.12 Imageproplus软件统计克隆的数量以及面积 | 第22-23页 |
| 2.4 结果 | 第23-28页 |
| 2.4.1 2D赛天然有利于猪精原干细胞的培养 | 第23-25页 |
| 2.4.2 培养过程中不同时期出现两种不同形态的克隆 | 第25-28页 |
| 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 筛选小分子化合物优化pSSCs的无饲养层长期培养体系 | 第30-34页 |
| 3.1 材料 | 第30页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 3.1.3 主要仪器与耗材 | 第30页 |
| 3.2 方法 | 第30-31页 |
| 3.2.1 Giemsa染色 | 第30页 |
| 3.2.2 CCK-8检测添加不同化学物质之后细胞活力 | 第30-31页 |
| 3.2.3 细胞免疫荧光检测添加不同化学物质之后细胞特性 | 第31页 |
| 3.2.4 细胞培养分组 | 第31页 |
| 3.3 结果 | 第31-33页 |
| 3.3.1 Lipid以及一些小分子有助于猪精原干细胞的长期培养 | 第31-33页 |
| 3.4 讨论 | 第33-34页 |
| 第四章 猪精原干细胞异种移植曲细精管 | 第34-42页 |
| 4.1 材料 | 第34页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第34页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 4.1.3 主要仪器与耗材 | 第34页 |
| 4.2 方法 | 第34-36页 |
| 4.2.1 主要溶液的配制 | 第34-35页 |
| 4.2.2 生精缺陷小鼠模型的构建 | 第35页 |
| 4.2.3 PKH26标记猪精原干细胞 | 第35页 |
| 4.2.4 曲精小管移植 | 第35页 |
| 4.2.5 冰冻切片观察 | 第35页 |
| 4.2.6 石蜡切片免疫荧光染色 | 第35-36页 |
| 4.3 结果 | 第36-40页 |
| 4.3.1 异种移植猪精原干细胞之后依然有自我更新以及增殖能力 | 第36-39页 |
| 4.3.2 异种移植猪精原干细胞之后向下游继续分化能力受到限制 | 第39-40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-41页 |
| 4.5 小结 | 第41-42页 |
| 结论 | 第42页 |
| 创新点 | 第42页 |
| 进一步研究课题 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 附录 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
