摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第一章 文献综述 | 第8-21页 |
1.1 虾青素性质,功能及应用 | 第8-11页 |
1.1.1 虾青素化学性质 | 第8-9页 |
1.1.2 虾青素的功能 | 第9-10页 |
1.1.3 虾青素的应用 | 第10-11页 |
1.2 虾青素的生产方法 | 第11-13页 |
1.2.1 从水产品的加工废弃物中提取虾青素 | 第11-12页 |
1.2.2 利用藻类如雨生红球藻等生产虾青素 | 第12页 |
1.2.3 红法夫酵母发酵生产虾青素 | 第12-13页 |
1.3 红发夫酵母的基本特性 | 第13-17页 |
1.3.1 红发夫酵母简介 | 第13页 |
1.3.2 红发夫酵母的营养组成[30] | 第13-14页 |
1.3.3 红发夫酵母虾青素合成途径 | 第14-16页 |
1.3.4 红发夫酵母生产虾青素的主要研究进展 | 第16-17页 |
1.4 红发夫酵母分子生物学研究进展 | 第17-20页 |
1.4.1 总体研究进展 | 第17-18页 |
1.4.2 crtE 基因及GGPP 合成酶的研究进展 | 第18-20页 |
1.5 本实验的选题背景和主要内容 | 第20-21页 |
第二章 实验材料和方法 | 第21-36页 |
2.1 实验材料 | 第21-25页 |
2.1.1 培养基 | 第22页 |
2.1.2 药品与试剂 | 第22-24页 |
2.1.3 实验仪器 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-36页 |
2.2.1 红发夫酵母DNA 提取 | 第25-26页 |
2.2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第26-27页 |
2.2.3 大肠杆菌质粒的提取 | 第27页 |
2.2.4 DNA 片段的回收纯化 | 第27-28页 |
2.2.5 PCR 反应体系 | 第28-29页 |
2.2.6 酶切体系 | 第29页 |
2.2.7 载体质粒的去磷酸化 | 第29-30页 |
2.2.8 酶连体系 | 第30页 |
2.2.9 凝胶回收 | 第30-31页 |
2.2.10 琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
2.2.11 引物 | 第31-32页 |
2.2.12 T 载体连接反应 | 第32页 |
2.2.13 转化反应与蓝白筛选 | 第32页 |
2.2.14 质粒构建及转化方法 | 第32-33页 |
2.2.15 重组质粒的电转化 | 第33-34页 |
2.2.16 红发夫酵母转化株的培养 | 第34页 |
2.2.17 类胡萝卜素总量的测定方法 | 第34页 |
2.2.18 测量虾青素含量:HPLC 分析法 | 第34-36页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第36-52页 |
3.1 红发夫酵母DNA 提取 | 第36页 |
3.2 重组质粒pSX-pc 的构建 | 第36-43页 |
3.2.1 pcrtE DNA 片段的克隆 | 第37-39页 |
3.2.2 rDNA 基因的克隆与pFA-rDNA 中间载体的构建 | 第39-41页 |
3.2.3 crtE 段基因重组载体pSX-pc的构建 | 第41-43页 |
3.3 重组质粒pSX-gc 的构建 | 第43-48页 |
3.3.1 红发夫酵母crtE 基因的克隆 | 第43-45页 |
3.3.2 pMD-gpd-crtE 中间载体的获得 | 第45-46页 |
3.3.3 gcrtE DNA 片段的获得与pSX-gc 载体的构建 | 第46-48页 |
3.4 重组质粒的电转化 | 第48-49页 |
3.5 红发夫酵母生长曲线的测定 | 第49-50页 |
3.6 类胡萝卜素含量的测定 | 第50-51页 |
3.7 虾青素含量测定 | 第51-52页 |
第四章 结论与展望 | 第52-54页 |
4.1 结论 | 第52页 |
4.2 展望 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |