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红发夫酵母GGPP合成酶过量表达对虾青素产量的影响

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
第一章 文献综述第8-21页
    1.1 虾青素性质,功能及应用第8-11页
        1.1.1 虾青素化学性质第8-9页
        1.1.2 虾青素的功能第9-10页
        1.1.3 虾青素的应用第10-11页
    1.2 虾青素的生产方法第11-13页
        1.2.1 从水产品的加工废弃物中提取虾青素第11-12页
        1.2.2 利用藻类如雨生红球藻等生产虾青素第12页
        1.2.3 红法夫酵母发酵生产虾青素第12-13页
    1.3 红发夫酵母的基本特性第13-17页
        1.3.1 红发夫酵母简介第13页
        1.3.2 红发夫酵母的营养组成[30]第13-14页
        1.3.3 红发夫酵母虾青素合成途径第14-16页
        1.3.4 红发夫酵母生产虾青素的主要研究进展第16-17页
    1.4 红发夫酵母分子生物学研究进展第17-20页
        1.4.1 总体研究进展第17-18页
        1.4.2 crtE 基因及GGPP 合成酶的研究进展第18-20页
    1.5 本实验的选题背景和主要内容第20-21页
第二章 实验材料和方法第21-36页
    2.1 实验材料第21-25页
        2.1.1 培养基第22页
        2.1.2 药品与试剂第22-24页
        2.1.3 实验仪器第24-25页
    2.2 实验方法第25-36页
        2.2.1 红发夫酵母DNA 提取第25-26页
        2.2.2 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化第26-27页
        2.2.3 大肠杆菌质粒的提取第27页
        2.2.4 DNA 片段的回收纯化第27-28页
        2.2.5 PCR 反应体系第28-29页
        2.2.6 酶切体系第29页
        2.2.7 载体质粒的去磷酸化第29-30页
        2.2.8 酶连体系第30页
        2.2.9 凝胶回收第30-31页
        2.2.10 琼脂糖凝胶电泳第31页
        2.2.11 引物第31-32页
        2.2.12 T 载体连接反应第32页
        2.2.13 转化反应与蓝白筛选第32页
        2.2.14 质粒构建及转化方法第32-33页
        2.2.15 重组质粒的电转化第33-34页
        2.2.16 红发夫酵母转化株的培养第34页
        2.2.17 类胡萝卜素总量的测定方法第34页
        2.2.18 测量虾青素含量:HPLC 分析法第34-36页
第三章 实验结果与讨论第36-52页
    3.1 红发夫酵母DNA 提取第36页
    3.2 重组质粒pSX-pc 的构建第36-43页
        3.2.1 pcrtE DNA 片段的克隆第37-39页
        3.2.2 rDNA 基因的克隆与pFA-rDNA 中间载体的构建第39-41页
        3.2.3 crtE 段基因重组载体pSX-pc的构建第41-43页
    3.3 重组质粒pSX-gc 的构建第43-48页
        3.3.1 红发夫酵母crtE 基因的克隆第43-45页
        3.3.2 pMD-gpd-crtE 中间载体的获得第45-46页
        3.3.3 gcrtE DNA 片段的获得与pSX-gc 载体的构建第46-48页
    3.4 重组质粒的电转化第48-49页
    3.5 红发夫酵母生长曲线的测定第49-50页
    3.6 类胡萝卜素含量的测定第50-51页
    3.7 虾青素含量测定第51-52页
第四章 结论与展望第52-54页
    4.1 结论第52页
    4.2 展望第52-54页
参考文献第54-59页
发表论文和参加科研情况说明第59-60页
致谢第60页

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