摘要 | 第12-15页 |
ABSTRACT | 第15-17页 |
符号说明 | 第18-21页 |
第一章 前言 | 第21-33页 |
1. 硫酸乙酰肝素与肝素的结构特征 | 第21页 |
2. HS寡糖的生物活性及构效关系 | 第21-27页 |
2.1 抗凝活性 | 第21-22页 |
2.2 抗病毒活性 | 第22-23页 |
2.3 调节细胞增殖 | 第23-24页 |
2.4 参与炎症反应 | 第24页 |
2.5 抗阿尔兹海默症 | 第24-25页 |
2.6 抑制肿瘤增殖及迁移 | 第25-27页 |
3. HS寡糖的合成 | 第27-32页 |
3.1. 化学合成法 | 第28-29页 |
3.2. 化学酶法合成 | 第29-32页 |
4. 本课题研究目的及意义 | 第32-33页 |
4.1 前期研究基础 | 第32页 |
4.2 本课题拟解决的关键问题 | 第32-33页 |
第二章 糖基供体的化学酶法合成与规模化制备 | 第33-44页 |
1. 实验材料 | 第33-34页 |
1.1 试剂 | 第33-34页 |
1.2 仪器 | 第34页 |
2. 实验方法 | 第34-37页 |
2.1 UDP-GlcA的合成及纯化 | 第34-35页 |
2.2 UDP-GlcNAc(UDP-GlcNTFA)的合成及纯化 | 第35-37页 |
3. 结果 | 第37-43页 |
3.1 UDP-GlcA的合成 | 第37页 |
3.2 UDP-GlcA的纯化 | 第37-39页 |
3.3 GlcNTFA的合成与纯化 | 第39页 |
3.4 UDP-GlcNAc(UDP-GlcNTFA)的合成 | 第39-40页 |
3.5 UDP-GlcNAc(UDP-GlcNTFA)的纯化 | 第40-43页 |
4. 讨论 | 第43页 |
5. 本章小结 | 第43-44页 |
第三章 硫酸基供体PAPS的制备及纯化 | 第44-49页 |
1. 实验材料 | 第44-45页 |
1.1 试剂 | 第44页 |
1.2 仪器 | 第44-45页 |
2. 实验方法 | 第45-46页 |
2.1 KAST-APSK的提取 | 第45页 |
2.2 PAPS的合成及分离纯化 | 第45-46页 |
3. 结果 | 第46-48页 |
3.1 PAPS的合成 | 第46页 |
3.2 PAPS的纯化 | 第46-48页 |
4. 讨论 | 第48页 |
5. 本章小结 | 第48-49页 |
第四章 硫酸乙酰肝素寡糖骨架的酶法合成 | 第49-57页 |
1. 实验材料 | 第49页 |
1.1 试剂 | 第49页 |
1.2 仪器 | 第49页 |
2. 实验方法 | 第49-51页 |
2.1 KfiA及PmHS2的提取及纯化 | 第49-50页 |
2.2 HS寡糖骨架的合成与纯化 | 第50-51页 |
2.3 结构表征 | 第51页 |
3. 实验结果 | 第51-56页 |
3.1 HS寡糖骨架的纯化 | 第51-52页 |
3.2 HS寡糖骨架表征 | 第52-56页 |
4. 讨论 | 第56页 |
5. 本章小结 | 第56-57页 |
第五章 N-和6-O-硫酸化的HS寡糖的化学酶法合成 | 第57-66页 |
1. 实验材料 | 第57页 |
1.1 试剂 | 第57页 |
1.2 仪器 | 第57页 |
2. 实验方法 | 第57-59页 |
2.1 NST及6OST1/3酶的提取及纯化 | 第57-58页 |
2.2 N-硫酸化(NS)修饰 | 第58-59页 |
2.3 6-O-硫酸化(6S)修饰 | 第59页 |
3. 实验结果 | 第59-64页 |
3.1 NS-3mer合成及纯化 | 第59-62页 |
3.2 NS6S-3mer合成及纯化 | 第62-64页 |
4. 讨论 | 第64-65页 |
5. 本章小结 | 第65-66页 |
第六章 HS骨架寡糖的HPLC-CAD/MS分析 | 第66-74页 |
1. 实验材料 | 第66页 |
1.1 试剂 | 第66页 |
1.2 仪器 | 第66页 |
2. 实验方法 | 第66-67页 |
2.1 TFA对HS骨架寡糖色谱行为的影响 | 第66-67页 |
2.2 甲醇对HS骨架寡糖色谱行为的影响 | 第67页 |
2.3 温度对HS骨架寡糖色谱行为的影响 | 第67页 |
2.4 最优色谱条件的获取 | 第67页 |
3. 实验结果 | 第67-72页 |
3.1 TFA对HS骨架寡糖色谱行为的影响 | 第67-68页 |
3.2 甲醇对HS骨架寡糖色谱行为的影响 | 第68-69页 |
3.3 温度对HS骨架寡糖色谱行为的影响 | 第69-70页 |
3.4 最优色谱条件 | 第70-72页 |
4. 讨论 | 第72-73页 |
5. 本章小结 | 第73-74页 |
总结与展望 | 第74-75页 |
1. 总结 | 第74页 |
2. 展望 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读硕士学位期间学术成果 | 第80-81页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第81页 |