| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| 1.1 1-氰基环己基乙酸简介 | 第12-13页 |
| 1.2 1-氰基环己基乙酸的合成方法 | 第13-14页 |
| 1.2.1 化学合成方法 | 第13页 |
| 1.2.2 化学-酶法合成 1-氰基环己基乙酸 | 第13-14页 |
| 1.3 腈水解酶概述 | 第14-17页 |
| 1.3.1 腈水解酶的来源 | 第14页 |
| 1.3.2 腈水解酶的催化机理 | 第14-15页 |
| 1.3.3 腈水解酶的应用 | 第15-17页 |
| 1.4 腈水解酶的固定化 | 第17-22页 |
| 1.4.1 固定化酶技术 | 第17-18页 |
| 1.4.2 固定化酶方法 | 第18-19页 |
| 1.4.3 固定化酶载体 | 第19-20页 |
| 1.4.4 腈水解酶固定化的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.4.5 氧化硅凝胶固定化的研究 | 第21页 |
| 1.4.6 仿生硅化固定化的研究 | 第21-22页 |
| 1.5 腈水解酶全细胞的固定化 | 第22-26页 |
| 1.5.1 固定化细胞发展进程 | 第22-23页 |
| 1.5.2 固定化微生物细胞载体的简介 | 第23页 |
| 1.5.3 固定化细胞方法简介 | 第23-25页 |
| 1.5.4 腈水解酶全细胞固定化的研究进展 | 第25-26页 |
| 1.6 本论文的研究意义和内容 | 第26-28页 |
| 第二章 仿生法制备氧化硅载体固定化腈水解酶催化合成1-氰基环己基乙酸的研究 | 第28-44页 |
| 2.1 前言 | 第28-29页 |
| 2.2 材料和方法 | 第29-33页 |
| 2.2.1 化学试剂与主要仪器 | 第29页 |
| 2.2.2 实验菌株及培养条件 | 第29-30页 |
| 2.2.3 细胞超声破碎 | 第30页 |
| 2.2.4 仿生氧化硅固定化方法 | 第30页 |
| 2.2.5 仿生氧化硅固定化酶的表征 | 第30页 |
| 2.2.6 固定化酶和游离酶的pH稳定性 | 第30页 |
| 2.2.7 固定化酶和游离酶的温度稳定性 | 第30页 |
| 2.2.8 固定化酶和游离酶的储藏稳定性 | 第30-31页 |
| 2.2.9 固定化酶的操作稳定性 | 第31页 |
| 2.2.10 固定化酶和游离酶的活力测定 | 第31页 |
| 2.2.11 固定化酶各参数的测定 | 第31页 |
| 2.2.12 蛋白含量测定 | 第31-33页 |
| 2.2.13 底物和产物的分析方法 | 第33页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第33-43页 |
| 2.3.1 不同固定化酶载体的筛选 | 第33-34页 |
| 2.3.2 氧化硅固定化酶的表征 | 第34-36页 |
| 2.3.3 固定化酶制备条件的优化 | 第36-39页 |
| 2.3.3.1 不同诱导剂对固定化酶的影响 | 第36页 |
| 2.3.3.2 诱导剂浓度对固定化酶的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.3.3 偏硅酸浓度对固定化酶的影响 | 第37-38页 |
| 2.3.3.4 添酶量对固定化酶的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.4 固定化酶的催化性质 | 第39-43页 |
| 2.3.4.1 固定化酶和游离酶的pH稳定性 | 第39-40页 |
| 2.3.4.2 固定化酶和游离酶的温度稳定性 | 第40-41页 |
| 2.3.4.3 固定化酶和游离酶的储藏稳定性 | 第41-42页 |
| 2.3.4.4 固定化酶的操作稳定性 | 第42-43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 聚乙烯亚胺/戊二醛交联腈水解酶固定化全细胞 | 第44-56页 |
| 3.1 前言 | 第44页 |
| 3.2 材料和方法 | 第44-46页 |
| 3.2.1 化学试剂与主要仪器 | 第44-45页 |
| 3.2.2 实验菌株及培养条件 | 第45页 |
| 3.2.3 聚乙烯亚胺/戊二醛交联固定化细胞方法 | 第45页 |
| 3.2.4 聚乙烯亚胺/戊二醛交联固定化细胞的表征 | 第45页 |
| 3.2.5 SDS-PAGE法蛋白泄漏检测 | 第45页 |
| 3.2.6 固定化细胞与游离细胞活力检测 | 第45-46页 |
| 3.2.7 底物和产物的分析方法 | 第46页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第46-55页 |
| 3.3.1 固定化细胞载体的筛选 | 第46-47页 |
| 3.3.2 固定化细胞制备条件优化 | 第47-53页 |
| 3.3.2.1 聚乙烯亚胺浓度对固定化细胞制备的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.2.2 聚乙烯亚胺交联时间对固定化细胞制备的影响 | 第48-49页 |
| 3.3.2.3 戊二醛浓度对固定化细胞制备的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.2.4 戊二醛交联时间对固定化细胞制备的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.2.5 细胞浓度对固定化细胞制备的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.2.6 交联体系pH对固定化细胞制备的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.2.7 硅藻土浓度对固定化细胞制备的影响 | 第53页 |
| 3.3.3 固定化腈水解酶全细胞的表征及蛋白检测 | 第53-55页 |
| 3.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 固定化腈水解酶全细胞催化性质的研究 | 第56-69页 |
| 4.1 前言 | 第56页 |
| 4.2 材料和方法 | 第56-58页 |
| 4.2.1 化学试剂与主要仪器 | 第56页 |
| 4.2.2 实验菌株及培养条件 | 第56-57页 |
| 4.2.3 固定化细胞和游离细胞催化性质 | 第57-58页 |
| 4.2.4 固定化细胞和游离细胞活力检测 | 第58页 |
| 4.2.5 固定化细胞各参数的测定 | 第58页 |
| 4.2.6 底物和产物分析方法 | 第58页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第58-67页 |
| 4.3.1 固定化细胞和游离细胞最适pH及pH稳定性 | 第58-60页 |
| 4.3.2 固定化细胞和游离细胞最适温度及温度稳定性 | 第60-62页 |
| 4.3.3 不同细胞量对固定化细胞转化的影响 | 第62-63页 |
| 4.3.4 不同底物浓度对固定化细胞转化的影响 | 第63页 |
| 4.3.5 底物浓度和细胞量比例的优化 | 第63-64页 |
| 4.3.6 固定化细胞和游离细胞的储藏稳定性 | 第64-65页 |
| 4.3.7 固定化细胞和游离细胞的操作稳定性 | 第65-67页 |
| 4.3.8 2L规模下固定化细胞催化合成 1-氰基环己基乙酸 | 第67页 |
| 4.4 本章小结 | 第67-69页 |
| 第五章 结论和展望 | 第69-72页 |
| 5.1 结论 | 第69-70页 |
| 5.2 展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
