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裂谷热病毒G(n+c)基因在昆虫杆状病毒中表达及免疫原性研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略词第8-9页
文献综述一第9-17页
文献综述二第17-21页
第一章 Gn、Gc蛋白原核截短表达与抗原性分析第21-49页
    1 材料第21-23页
        1.1 菌株与质粒第21页
        1.2 主要试剂和材料第21-22页
        1.3 仪器第22-23页
    2 方法第23-34页
        2.1 抗原表位分析与引物设计第23-24页
        2.2 携带Gn1、Gn2、Gc1和Gc2片段原核载体构建第24-28页
            2.2.1 目的片段PCR与纯化第24-25页
            2.2.2 酶切与连接第25-26页
            2.2.3 重组质粒转化第26-27页
            2.2.4 菌液PCR鉴定第27页
            2.2.5 重组质粒筛选第27-28页
        2.3 重组蛋白的诱导表达与纯化第28-30页
            2.3.1 重组蛋白诱导表达与鉴定第28-29页
            2.3.2 重组蛋白的纯化与鉴定第29-30页
        2.4 高免血清制备第30-31页
            2.4.1 重组蛋白浓度测定第30-31页
            2.4.2 动物免疫与血清收集第31页
        2.5 原核表达蛋白抗原性分析第31-34页
            2.5.1 Western-blot分析第31-32页
            2.5.2 ELISA分析第32-34页
    3 结果第34-47页
        3.1 主要抗原区分析结果第34页
        3.2 目的基因PCR扩增结果第34-35页
        3.3 重组质粒的PCR鉴定结果第35-36页
        3.4 原核重组表达蛋白鉴定结果第36-41页
            3.4.1 重组蛋白表达形式鉴定结果第36-37页
            3.4.2 重组蛋白的纯化鉴定结果第37-41页
        3.5 原核表达的重组蛋白抗原性分析结果第41-47页
            3.5.1 Western-blot分析结果第41-42页
            3.5.2 ELISA分析结果第42-47页
    4 讨论第47-49页
        4.1 表达载体的选择第47页
        4.2 特异性片段的选择第47-48页
        4.3 表达体系的摸索第48-49页
第二章 G(n+c)基因在昆虫杆状病毒中的表达及抗原性分析第49-63页
    1 材料第49-51页
        1.1 菌株、质粒和细胞第49页
        1.2 酶、抗体及试剂盒第49-50页
        1.3 仪器第50-51页
    2 方法第51-58页
        2.1 SF 9 细胞传代培养第51页
        2.2 引物设计第51页
        2.3 重组质粒pFastBac TMHT A-G(n+c) 的构建第51-54页
            2.3.1 目的基因的扩增与纯化第51-53页
            2.3.2 重组质粒酶切与连接第53页
            2.3.3 重组质粒pFastBacTMHT A-G(n+c) 的转化第53-54页
            2.3.4 菌液PCR鉴定第54页
            2.3.5 重组质粒pFastBacTMHT A-G(n+c) 的鉴定第54页
        2.4 穿梭质粒rBacmid-G(n+c)的构建与PCR鉴定第54-57页
            2.4.1 同源重组构建穿梭质粒rBacmid-G(n+c)第54-55页
            2.4.2 穿梭质粒rBacmid-G(n+c)的PCR鉴定第55-57页
        2.5 重组杆状病毒rBac-G(n+c)的制备第57-58页
        2.6 Western-blot鉴定第58页
    3 结果第58-61页
        3.1 G(n+c)基因的PCR扩增结果第58页
        3.2 重组质粒pFastBac~(TM) HT A-G(n+c)构建结果第58-59页
        3.3 穿梭质粒r-Bacmid-G(n+c) 构建结果第59-60页
        3.4 重组杆状病毒rBac-G(n+c)的制备结果第60-61页
        3.5 Western-blot分析结果第61页
    4 讨论第61-63页
全文结论第63-64页
参考文献第64-71页
附录二 各种培养基、溶液及试剂的配制第71-75页

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