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枸杞LcGGPS和LcGS基因的克隆及抗逆功能分析

中文摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 文献综述第10-23页
    1.1 类胡萝卜素简介第10页
    1.2 植物中类胡萝卜素代谢途径第10-14页
        1.2.1 类异戊二烯途径中的关键酶第11-14页
    1.3 类胡萝卜素在植物中的功能第14-15页
        1.3.1 参与光合系统第14页
        1.3.2 具有抗氧化的作用第14-15页
    1.4 UV-B辐射对植物的影响第15-20页
        1.4.1 UV光谱效应第15页
        1.4.2 UV-B辐射对植物生长发育的影响第15-16页
        1.4.3 UV-B辐射对植物光合作用的影响第16-17页
        1.4.4 UV-B辐射对叶绿素含量的影响第17页
        1.4.5 UV-B辐射对植物膜脂质过氧化的影响第17-18页
        1.4.6 UV-B辐射对呼吸和蒸腾作用的影响第18页
        1.4.7 UV-B辐射对类胡萝卜素的影响第18-20页
    1.5 UV-B辐射的实验方法第20页
    1.6 GSH逆境生理第20-21页
    1.7 枸杞简介第21页
    1.8 研究目的与意义第21-22页
    1.9 技术路线第22-23页
第二章 枸杞GGPS1/2 基因的克隆第23-41页
    2.1 实验材料第23-25页
        2.1.1 植物材料第23页
        2.1.2 质粒和菌株第23页
        2.1.3 试剂和仪器第23-25页
    2.2 实验方法第25-32页
        2.2.1 枸杞叶片总RNA的提取第25-26页
        2.2.2 LcGGPS1和LcGGPS2基因的克隆第26-29页
        2.2.3 目的片段的回收第29页
        2.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备第29页
        2.2.5 携带LcGGPS基因的克隆载体的构建第29-30页
        2.2.6 重组质粒的筛选与鉴定第30-31页
        2.2.7 生物信息学分析第31页
        2.2.8 LcGGPS基因在不同器官中的表达差异分析第31-32页
    2.3 结果与分析第32-40页
        2.3.1 枸杞总RNA提取第32-33页
        2.3.2 LcGGPS1/LcGGPS2基因的克隆第33页
        2.3.3 序列分析第33-37页
        2.3.4 LcGGPS1/2 蛋白的多序列比对第37-38页
        2.3.5 LcGGPS系统进化树分析第38页
        2.3.6 LcGGPS1/2 基因在不同器官中的表达差异分析第38-40页
    2.4 小结第40-41页
第三章 植物表达载体的构建及烟草的遗传转化第41-53页
    3.1 实验材料第41-42页
        3.1.1 植物材料第41页
        3.1.2 质粒和菌株第41页
        3.1.3 实验所用培养基第41-42页
        3.1.4 实验所用主要溶液第42页
    3.2 实验方法第42-47页
        3.2.1 植物表达载体pCAMBIA2300-LcGGPS1/2 的构建第42-43页
        3.2.2 转化农杆菌第43-44页
        3.2.3 烟草叶盘转化第44-46页
        3.2.4 转基因烟草分子检测第46-47页
    3.3 结果与讨论第47-52页
        3.3.1 植物表达载体pCAMBIA2300-LcGGPS1/2 的构建第47-49页
        3.3.2 植物表达载体的农杆菌转化第49页
        3.3.3 烟草的遗传转化第49-50页
        3.3.4 转基因烟草的分子检测第50-52页
    3.4 小结第52-53页
第四章 转基因烟草对类胡萝卜素代谢及UV-B辐射的影响第53-65页
    4.1 实验材料第53页
        4.1.1 植物材料第53页
        4.1.2 溶液配制第53页
    4.2 实验方法第53-57页
        4.2.1 烟草类胡萝卜素含量测定第53-55页
        4.2.2 UV-B辐射下烟草叶片生理生化指标的测定第55-57页
    4.3 结果第57-62页
        4.3.1 转基因烟草类胡萝卜素含量的变化第57页
        4.3.2 UV-B辐射对烟草光合特性的影响第57-58页
        4.3.3 UV-B辐射对烟草叶绿素含量的影响第58-60页
        4.3.4 UV-B辐射对烟草叶片形态的影响第60页
        4.3.5 组织化学染色第60-62页
    4.4 讨论第62-64页
    4.5 小结第64-65页
第五章 过表达LcGS基因增强烟草对镉的耐受性第65-74页
    5.1 实验材料第65页
    5.2 实验方法第65-67页
        5.2.1 LcGS基因的克隆与序列分析第65-66页
        5.2.2 LcGS基因在重金属胁迫下的表达与分析第66页
        5.2.3 植物表达载体的构建及其对烟草的遗传转化第66页
        5.2.4 转基因植株在重金属胁迫下的表达与分析第66-67页
    5.3 结果与分析第67-72页
        5.3.1 LcGS基因的克隆第67页
        5.3.2 序列分析第67-68页
        5.3.3 LcGS功能位点预测及多序列比对第68-69页
        5.3.4 重金属胁迫下LcGS基因在枸杞叶片中的表达第69-70页
        5.3.5 植物表达载体pCAMBIA2300-LcGS的构建第70页
        5.3.6 烟草的遗传转化及其阳性植株的分子检测第70-71页
        5.3.7 转基因植株在重金属胁迫下的表达与分析第71-72页
    5.4 讨论第72-74页
第六章 结论与展望第74-75页
参考文献第75-82页
发表论文和参与项目第82-83页
致谢第83-84页

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