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基于SV40的微米荧光磁性颗粒用于单细胞双模检测

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
1 引言第11-15页
2 微米荧光磁性颗粒标记细胞的磁共振单细胞检测第15-37页
    2.1 材料第15-18页
        2.1.1 质粒、菌株与细胞株第15页
        2.1.2 主要试剂与材料第15-16页
        2.1.3 培养基与溶液配方第16-18页
    2.2 主要仪器第18-19页
    2.3 方法第19-23页
        2.3.1 VP1的表达、纯化及五聚体的制备第19页
        2.3.2 VP1五聚体浓度通过SDS-PAGE/光密度分析法测定第19-20页
        2.3.3 量子点诱导VP1五聚体在解聚条件下组装第20页
        2.3.4 SV40病毒样颗粒-量子点(VLP-QDs)的纯化第20-21页
        2.3.5 SV40病毒样颗粒-量子点的表征第21页
        2.3.6 SV40病毒样颗粒-量子点的生物素化与磁性颗粒的连接第21页
        2.3.7 Vero细胞的传代培养第21-22页
        2.3.8 荧光磁性复合体侵染Vero细胞第22页
        2.3.9 不同浓度微米荧光磁性颗粒和微米磁性颗粒对细胞活性的影响第22页
        2.3.10 体外磁共振成像第22-23页
    2.4 实验结果第23-35页
        2.4.1 VP1的表达、纯化及五聚体的制备第23-24页
        2.4.2 VP1五聚体包装量子点及包装产物的纯化第24-26页
        2.4.3 SV40病毒样颗粒-量子点生物素化及微米荧光磁性颗粒的构建第26-27页
        2.4.4 荧光磁性微米颗粒可以特异性吸附在Vero细胞的表面第27-28页
        2.4.5 荧光磁性微米颗粒可以穿过Vero细胞膜到达核周第28页
        2.4.6 细胞活性分析第28-29页
        2.4.7 7.0 T Bruker磁共振成像仪下标记细胞分析第29-31页
        2.4.8 9.4 TAgilent强场磁共振成像装置下标记细胞分析第31-35页
    2.5 讨论第35-37页
3 SV40介导微米荧光磁性颗粒入胞的活细胞行为示踪第37-49页
    3.1 材料第37-38页
        3.1.1 质粒、菌株与细胞株第37页
        3.1.2 主要试剂第37-38页
        3.1.3 溶液配方第38页
    3.2 主要仪器第38页
    3.3 方法第38-40页
        3.3.1 微米荧光磁性颗粒的构建见2.3.6第39页
        3.3.2 Vero细胞的传代培养见2.3.7第39页
        3.3.3 荧光磁性微米颗粒侵染Vero细胞见2.3.8第39页
        3.3.4 活细胞中微米荧光磁性颗粒与Caveolin-1共定位实验第39页
        3.3.5 VP1,golgin97和clathrin的免疫荧光染色第39-40页
        3.3.6 内质网活细胞染色第40页
        3.3.7 药物抑制实验第40页
    3.4 实验结果第40-48页
        3.4.1 SV40可以介导微米荧光磁性颗粒进入Vero细胞第40-41页
        3.4.2 微米荧光磁性颗粒内吞途径的探索第41-45页
        3.4.3 微米荧光磁性颗粒的胞内运输依赖微管第45-46页
        3.4.4 微米荧光磁性颗粒是由SV40递送至细胞核周围的第46-47页
        3.4.5 微米荧光磁性颗粒最终定位在内质网第47-48页
    3.5 讨论第48-49页
4 结论第49-51页
参考文献第51-55页
文献综述第55-91页
    1. 单细胞检测的需求与应用第56-59页
    2. 分子影像学磁共振单细胞检测的现状与问题第59-71页
        2.1 磁共振单细胞检测现状第59-71页
            2.1.1 纳米氧化铁颗粒标记细胞的磁共振单细胞成像第59-62页
            2.1.2 微米氧化铁颗粒标记细胞的磁共振单细胞成像第62-69页
            2.1.3 微米尺寸氧化铁颗粒的优越性第69-71页
        2.2 对磁共振单细胞成像的讨论第71页
    3. 双模成像在生物医学领域的应用第71-79页
        3.1 双模成像的应用现状第71-72页
        3.2 荧光成像的优势第72-73页
        3.3 磁共振和荧光双模成像的发展第73-77页
        3.4 提高双模成像多功能复合材料标记效率的策略第77-79页
    4. 展望第79-81页
    参考文献第81-91页
致谢第91页

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