| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩写词 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-21页 |
| 1.1 磷的生物学意义 | 第13页 |
| 1.2 磷的吸收及其利用 | 第13页 |
| 1.3 植物吸收转运磷素 | 第13-15页 |
| 1.4 植物应对低磷胁迫机制 | 第15-17页 |
| 1.4.1 根系形态的改变应对低磷胁迫 | 第15-16页 |
| 1.4.2 根系生理生化水平上应对低磷胁迫 | 第16-17页 |
| 1.5 低磷应答信号网络 | 第17-19页 |
| 1.5.1 磷信号感知通路 | 第17-18页 |
| 1.5.2 转录调控 | 第18-19页 |
| 1.6 论文的选题意义及依据 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1 实验仪器 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.3 药品和试剂 | 第21-22页 |
| 2.4 常用培养基与常用溶液的配制 | 第22-24页 |
| 2.4.1 常用培养基的配置 | 第22页 |
| 2.4.2 常用溶液的配制 | 第22-24页 |
| 2.5 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.5.1 拟南芥的种植方法 | 第24页 |
| 2.5.2 突变体库的建立 | 第24页 |
| 2.5.3 低磷胁迫实验方法 | 第24页 |
| 2.5.4 指示剂溴甲酚紫培养基pH原位显示法 | 第24-25页 |
| 2.5.5 拟南芥根际酸化能力的测定方法 | 第25页 |
| 2.5.6 无机磷浓度测定方法 | 第25页 |
| 2.5.7 总磷浓度测定 | 第25页 |
| 2.5.8 花青素含量的测定方法 | 第25-26页 |
| 2.5.9 叶绿素含量的测定方法 | 第26页 |
| 2.5.10 侧根密度的统计方法 | 第26页 |
| 2.5.11 根毛密度以及根毛长度的统计方法 | 第26页 |
| 2.5.12 H~+-ATPase活性测定方法 | 第26-27页 |
| 2.5.13 拟南芥杂交的方法 | 第27页 |
| 2.5.14 图位克隆技术 | 第27-29页 |
| 2.5.15 拟南芥基因组DNA提取方法 | 第29页 |
| 2.5.16 拟南芥总RNA的提取 | 第29页 |
| 2.5.17 反转录制备拟南芥cDNA | 第29-30页 |
| 2.6 DNA测序及引物合成 | 第30-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-59页 |
| 3.1 拟南芥突变体筛选方法的建立 | 第33-35页 |
| 3.1.1 溴甲酚紫原位显色筛选突变体 | 第33-34页 |
| 3.1.2 难溶磷处理下筛选突变体 | 第34-35页 |
| 3.2 低磷诱导根际酸化减弱突变体p328的筛选和表型分析 | 第35-48页 |
| 3.2.1 突变体p328根际酸化能力弱于WT | 第35-36页 |
| 3.2.2 突变体p328酸化定量 | 第36-37页 |
| 3.2.3 突变体p328的H~+-ATPase酶活性低于WT | 第37-38页 |
| 3.2.4 突变体p328对H~+-ATPase酶活性的影响 | 第38页 |
| 3.2.5 突变体p328磷浓度测定 | 第38-40页 |
| 3.2.6 突变体p328磷相关基因半定量分析 | 第40页 |
| 3.2.7 突变体p328低磷处理条件下积累更多花青素 | 第40-41页 |
| 3.2.8 突变体p328含有更低的叶绿素 | 第41-42页 |
| 3.2.9 突变体p328低磷处理下侧根密度低于WT | 第42页 |
| 3.2.10 突变体p328根毛密度更低,根毛长度更短 | 第42-43页 |
| 3.2.11 突变体p328遗传背景分析 | 第43-44页 |
| 3.2.12 突变体p328的图位克隆 | 第44-46页 |
| 3.2.13 突变体p328突变位点的确定 | 第46-47页 |
| 3.2.14 生物信息学分析 | 第47-48页 |
| 3.3 低磷诱导根际酸化增强突变体p250的筛选和表型分析 | 第48-54页 |
| 3.3.1 突变体p250根际酸化能力强于WT | 第48页 |
| 3.3.2 H~+-ATPase抑制剂Na_3VO_4抑制p250根际酸化 | 第48-49页 |
| 3.3.3 突变体p250低磷处理下H~+-ATP酶活性更高 | 第49-50页 |
| 3.3.4 突变体p250含有更多的H~+-ATPase | 第50-51页 |
| 3.3.5 突变体p250磷浓度测定 | 第51-52页 |
| 3.3.6 突变体p250低磷处理下积累更多花青素 | 第52-53页 |
| 3.3.7 突变体p250低磷处理下侧根密度高于WT | 第53-54页 |
| 3.4 突变体p1-31初步分析 | 第54-59页 |
| 3.4.1 突变体p1-31根际酸化能力强于WT | 第54-55页 |
| 3.4.2 突变体p1-31磷浓度测定 | 第55页 |
| 3.4.3 突变体p1-31低磷处理下积累较少的花青素 | 第55-56页 |
| 3.4.4 突变体p1-31低磷处理下侧根密度高于WT | 第56-57页 |
| 3.4.5 突变体p1-31根毛密度更高,根毛长度更长 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 4.1 磷相关突变体筛选方法的探究 | 第59页 |
| 4.2 突变体p328更加不耐受低磷胁迫 | 第59-60页 |
| 4.3 突变体p250、p1-31更加耐受低磷胁迫 | 第60-61页 |
| 5 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
