| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第1章 引言 | 第13-23页 |
| 1.1 蛋白质分离纯化 | 第13页 |
| 1.2 重组蛋白及其分离纯化方法 | 第13-17页 |
| 1.2.1 重组蛋白 | 第13-14页 |
| 1.2.2 重组蛋白分离纯化方法 | 第14-17页 |
| 1.2.2.1 层析技术 | 第14-16页 |
| 1.2.2.2 电泳技术 | 第16-17页 |
| 1.3 壳聚糖和纤维素概述 | 第17-19页 |
| 1.3.1 壳聚糖和纤维素简介 | 第17-19页 |
| 1.3.2 壳聚糖和纤维素在蛋白分离纯化方面的应用 | 第19页 |
| 1.4 本论文的选题意义及研究方案 | 第19-23页 |
| 1.4.1 选题意义 | 第19-20页 |
| 1.4.2 研究方案 | 第20-23页 |
| 第2章 壳聚糖/纤维素球珠的制备及其表征 | 第23-35页 |
| 2.1 引言 | 第23-24页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第24-25页 |
| 2.2.1 实验材料与试剂 | 第24页 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 | 第24-25页 |
| 2.3 实验与方法 | 第25-27页 |
| 2.3.1 离子液体的合成 | 第25页 |
| 2.3.2 离子液体的表征 | 第25页 |
| 2.3.3 壳聚糖/纤维素球珠(CCB)的制备 | 第25-26页 |
| 2.3.4 壳聚糖/纤维素球珠(CCB)的表征 | 第26页 |
| 2.3.4.1 壳聚糖/纤维素球珠(CCB)含湿率的测定 | 第26页 |
| 2.3.4.2 傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析 | 第26页 |
| 2.3.4.3 热重分析(TGA) | 第26页 |
| 2.3.4.4 透射电镜(TEM)观察 | 第26页 |
| 2.3.5 不同浓度金属离子对壳聚糖/纤维素球珠(CCB)吸附性能的探究 | 第26-27页 |
| 2.4 结果与分析 | 第27-33页 |
| 2.4.1 离子液体 | 第27页 |
| 2.4.2 壳聚糖/纤维素球珠(CCB)的制备 | 第27-29页 |
| 2.4.3 壳聚糖/纤维素球珠(CCB)的结构表征 | 第29-32页 |
| 2.4.3.1 壳聚糖/纤维素球珠(CCB)的含湿率的测定 | 第29页 |
| 2.4.3.2 壳聚糖/纤维素球珠(CCB)的红外光谱(FT-IR)分析 | 第29-30页 |
| 2.4.3.3 壳聚糖/纤维素球珠(CCB)的热重曲线分析(TGA) | 第30-31页 |
| 2.4.3.4 壳聚糖,纤维素和壳聚糖/纤维素球珠(CCB)的透射电镜图(TEM) | 第31-32页 |
| 2.4.4 金属离子初始浓度对金属离子吸附的影响 | 第32-33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-35页 |
| 第3章 组氨酸标签增强型绿色荧光蛋白(his-tagged EGFP)的表达及其分离纯化条件优化 | 第35-57页 |
| 3.1 引言 | 第35-36页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第36-37页 |
| 3.2.1 实验材料及试剂 | 第36-37页 |
| 3.2.2 实验仪器和设备 | 第37页 |
| 3.3 实验与方法 | 第37-41页 |
| 3.3.1 组氨酸标签增强型绿色荧光蛋白(his-tagged EGFP)在E. coli中表达和分离 | 第37-38页 |
| 3.3.2 不同介质(M~(2+)-CCB)(M=Ni,Cu,Zn)的量对一定量蛋白吸附的影响 | 第38页 |
| 3.3.3 不同吸附时间对一定量蛋白吸附的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.4 M~(2+)-CCB (M=Ni,Cu,Zn)在不同离子强度下对his-tagged EGFP亲和吸附性能的探究 | 第39页 |
| 3.3.5 M~(2+)-CCB (M=Ni,Cu,Zn)在不同pH环境下对his-tagged EGFP亲和吸附性能的探究 | 第39-40页 |
| 3.3.6 不同浓度梯度咪唑缓冲液浓度对蛋白洗脱能力的探究 | 第40页 |
| 3.3.7 介质(M~(2+)-CCB)(M=Ni,Cu,Zn)重复利用能力的探究 | 第40-41页 |
| 3.3.8 SDS-PAGE分析 | 第41页 |
| 3.4 结果与分析 | 第41-55页 |
| 3.4.1 介质(M~(2+)-CCB)(M=Ni, Cu,Zn)的量对一定量蛋白吸附的影响 | 第41-42页 |
| 3.4.2 吸附时间的影响 | 第42-44页 |
| 3.4.3 离子强度的影响 | 第44-46页 |
| 3.4.4 缓冲液pH的影响 | 第46-49页 |
| 3.4.5 缓冲液中咪唑浓度的影响 | 第49-52页 |
| 3.4.6 最适条件下对E.coli表达的his-tagged EGFP分离纯化 | 第52-53页 |
| 3.4.7 重复利用能力的探究 | 第53-55页 |
| 3.5 本章小结 | 第55-57页 |
| 第4章 分离纯化体系的拓展应用 | 第57-63页 |
| 4.1 引言 | 第57页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第57-58页 |
| 4.2.1 实验材料及试剂 | 第57-58页 |
| 4.2.2 实验仪器和设备 | 第58页 |
| 4.3 实验与方法 | 第58-59页 |
| 4.3.1 介质(Zn~(2+)-CCB)在最适条件下对于BSA的分离纯化 | 第58页 |
| 4.3.2 介质(Zn~(2+)-CCB)在最适条件下对于SPI的分离纯化 | 第58-59页 |
| 4.4 结果分析与讨论 | 第59-61页 |
| 4.4.1 对于BSA的分离纯化 | 第59-60页 |
| 4.4.2 对于SPI的分离纯化 | 第60-61页 |
| 4.5 本章小结 | 第61-63页 |
| 第5章 总结与展望 | 第63-67页 |
| 5.1 总结 | 第63-64页 |
| 5.2 展望 | 第64-67页 |
| 参考文献 | 第67-76页 |
| 研究生阶段发表的论文 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
