| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 术语及符号说明 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 芳香族化合物污染现状 | 第12-15页 |
| 1.1.1 多环芳烃类污染物 | 第12页 |
| 1.1.2 邻苯二甲酸酯类污染物 | 第12-13页 |
| 1.1.3 邻苯二酚类污染物 | 第13-14页 |
| 1.1.4 芳香族污染物的修复 | 第14-15页 |
| 1.2 酯酶 | 第15-19页 |
| 1.2.1 酯酶 | 第15页 |
| 1.2.2 酯酶的分类 | 第15-16页 |
| 1.2.3 酯酶的结构特征 | 第16页 |
| 1.2.4 酯酶的反应机制 | 第16-17页 |
| 1.2.5 酯酶的应用 | 第17-19页 |
| 1.3 邻苯二酚 1,2-双加氧酶 | 第19-21页 |
| 1.3.1 邻苯二酚 1,2-双加氧酶 | 第19页 |
| 1.3.2 邻苯二酚 1,2-双加氧酶的分类 | 第19-20页 |
| 1.3.3 邻苯二酚 1,2-双加氧酶的结构 | 第20页 |
| 1.3.4 邻苯二酚 1,2-双加氧酶的反应机制 | 第20-21页 |
| 1.3.5 邻苯二酚 1,2-双加氧酶的应用 | 第21页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 1.5 研究内容 | 第22页 |
| 1.6 技术路线 | 第22-23页 |
| 第2章 酯酶EstCf8、Est A12和邻苯二酚 1,2-双加氧酶CatPLCgl的异源表达、纯化及酶学性质 | 第23-73页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 样品、菌株和载体 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 2.1.4 常用培养基 | 第24页 |
| 2.1.5 常用试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.6 引物合成与DNA测序 | 第26页 |
| 2.2 方法 | 第26-39页 |
| 2.2.1 倭蜂猴粪便微生物宏基因组文库Fosmid混合质粒提取 | 第26页 |
| 2.2.2 倭蜂猴粪便微生物宏基因组文库Fosmid混合质粒DNA测序 | 第26-27页 |
| 2.2.3 序列分析 | 第27-28页 |
| 2.2.4 重组质粒的构建 | 第28-30页 |
| 2.2.5 胶回收纯化PCR扩增产物 | 第30-31页 |
| 2.2.6 重组质粒的构建 | 第31页 |
| 2.2.7 重组质粒的转化 | 第31-33页 |
| 2.2.8 重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达 | 第33-34页 |
| 2.2.9 纯化、鉴定及酶蛋白含量的测定 | 第34-36页 |
| 2.2.10 酯酶活力的测定 | 第36-37页 |
| 2.2.11 邻苯二酚 1,2-双加氧酶活性测定 | 第37-39页 |
| 2.3 结果分析 | 第39-63页 |
| 2.3.1 EstCf8的序列分析、表达、纯化及酶学性质研究 | 第39-46页 |
| 2.3.2 EstA12的序列分析、表达、纯化及酶学性质研究 | 第46-54页 |
| 2.3.3 catPLCgl的序列分析、表达、纯化及酶学性质研究 | 第54-63页 |
| 2.4 讨论 | 第63-72页 |
| 2.5 本章小结 | 第72-73页 |
| 第3章 酯酶EstCf8、EstA12对邻苯二甲酸酯类的降解研究 | 第73-88页 |
| 3.1 材料 | 第73-74页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第73页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第73-74页 |
| 3.2 方法 | 第74-75页 |
| 3.2.1 降解体系制备 | 第74-75页 |
| 3.2.2 降解产物检测 | 第75页 |
| 3.3 结果与分析 | 第75-86页 |
| 3.3.1 酯酶EstCf8对邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二异丁脂(DiBP)的降解分析 | 第75-80页 |
| 3.3.2 酯酶EstA12对邻苯二甲酸二丁酯DBP、邻苯二甲酸二乙酯DEP、邻苯二甲酸二异丁脂DiBP的降解分析 | 第80-86页 |
| 3.4 讨论 | 第86-87页 |
| 3.5 本章小结 | 第87-88页 |
| 第4章 邻苯二酚 1,2-双加氧酶CatPLCgl对邻苯二酚的降解研究 | 第88-92页 |
| 4.1 材料 | 第88-89页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第88页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第88-89页 |
| 4.2 方法 | 第89页 |
| 4.2.1 降解产物的制备 | 第89页 |
| 4.2.2 降解产物的检测 | 第89页 |
| 4.3 结果与分析 | 第89-91页 |
| 4.4 讨论 | 第91页 |
| 4.5 本章小结 | 第91-92页 |
| 第5章 总结、创新、展望 | 第92-96页 |
| 5.1 总结 | 第92-94页 |
| 5.1.1 序列分析 | 第92页 |
| 5.1.2 酶学性质分析 | 第92-93页 |
| 5.1.3 酯酶EstCf8、EstA12对邻苯二甲酸酯类的降解分析 | 第93-94页 |
| 5.1.4 邻苯二酚 1,2-双加氧酶CatPLCgl对邻苯二酚的降解分析 | 第94页 |
| 5.2 创新 | 第94页 |
| 5.3 展望 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-106页 |
| 附录 | 第106-110页 |
| 附录A 本文使用缓冲液配方 | 第106-107页 |
| A1 柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液的配制 | 第106页 |
| A2 Tris-HCl缓冲液的配制 | 第106-107页 |
| A3 硼砂-氢氧化钠缓冲液 | 第107页 |
| A4 甘氨酸-氢氧化钠缓冲液 | 第107页 |
| 附录B 本文酶的氨基酸序列 | 第107-109页 |
| B1 酯酶EstCf8氨基酸序列 | 第107页 |
| B2 酯酶EstA12氨基酸序列 | 第107-108页 |
| B3 邻苯二酚 1,2-双加氧酶CatPLCgl氨基酸序列 | 第108-109页 |
| 附录C 氨基酸中英文对照及缩写表 | 第109-110页 |
| 攻读学位期间发表的论文和研究成果 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
