| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第18-34页 |
| 1.1 凝集索的研究进展 | 第18-22页 |
| 1.1.1 凝集素的分类与性质 | 第18-20页 |
| 1.1.2 凝集素的获得途径 | 第20-21页 |
| 1.1.3 凝集素类物质的研究意义 | 第21-22页 |
| 1.2 P.pastoris表达系统简介 | 第22-25页 |
| 1.3 P.pastoris体系发酵条件的研究进展 | 第25-30页 |
| 1.3.1 培养基 | 第26-27页 |
| 1.3.2 接种量 | 第27页 |
| 1.3.3 装液量 | 第27页 |
| 1.3.4 温度 | 第27页 |
| 1.3.5 pH值 | 第27页 |
| 1.3.6 溶氧 | 第27-28页 |
| 1.3.7 碳源 | 第28页 |
| 1.3.8 氮源 | 第28页 |
| 1.3.9 甲醇流加 | 第28-29页 |
| 1.3.10 不同诱导策略在P.pastoris表达系统中的研究 | 第29-30页 |
| 1.4 酶联免疫吸附法检测蛋白质类物质的应用 | 第30-32页 |
| 1.4.1 酶联免疫吸附法概述 | 第30-31页 |
| 1.4.2 酶联免疫吸附法的实验原理 | 第31-32页 |
| 1.5 本课题研究的意义和目的 | 第32-34页 |
| 第二章 材料、试剂与方法 | 第34-36页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第34-36页 |
| 2.1.1 菌株 | 第34页 |
| 2.1.2 培养基 | 第34-35页 |
| 2.1.3 抗生素 | 第35页 |
| 2.1.4 试剂盒与试剂 | 第35页 |
| 2.1.5 实验方法 | 第35页 |
| 2.1.6 专业软件 | 第35-36页 |
| 第三章 ELISA法检测重组中国水仙凝集素方法的建立 | 第36-46页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第36-38页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.1.2 试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第36页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第36-38页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第38-44页 |
| 3.2.1 中国水仙凝集素天然产物的分离纯化 | 第38页 |
| 3.2.2 ELISA法检测中国水仙凝集素多克隆抗体产物 | 第38-39页 |
| 3.2.3 ELISA法检测发酵液中重组中国水仙凝集素抗原包被浓度 | 第39-41页 |
| 3.2.4 ELISA法检测发酵液中重组中国水仙凝集素一抗比例 | 第41-42页 |
| 3.2.5 ELISA法检测发酵液中重组中国水仙凝集素二抗比例 | 第42-44页 |
| 3.2.6 ELISA法检测发酵液中重组中国水仙凝集素的最佳条件 | 第44页 |
| 3.3 本章小结 | 第44-46页 |
| 第四章 毕赤酵母GS115/pPIC9K-NTL表达重组蛋白的鉴定 | 第46-52页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第46页 |
| 4.1.1 菌种与材料 | 第46页 |
| 4.1.2 试剂 | 第46页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 4.2.1 基因工程菌的重悬培养 | 第46-47页 |
| 4.2.2 发酵液的浓缩富集 | 第47页 |
| 4.2.3 免疫印迹法鉴定基因工程菌表达量 | 第47页 |
| 4.2.4 基因工程菌表达产物凝血活性的测定 | 第47-48页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第48-51页 |
| 4.3.1 发酵上清液中蛋白质富集方法的优化 | 第48-49页 |
| 4.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测产物表达情况 | 第49-50页 |
| 4.3.3 Western印记法检测产物表达丰度结果 | 第50页 |
| 4.3.4 基因工程菌凝血活性的检测结果 | 第50-51页 |
| 4.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第五章 毕赤酵母GS115/pPIC9K-NTL发酵条件的研究 | 第52-70页 |
| 5.1 实验材料与方法 | 第52页 |
| 5.1.1 菌种 | 第52页 |
| 5.1.2 试剂 | 第52页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第52页 |
| 5.2 实验方法 | 第52-56页 |
| 5.2.1 毕赤酵母GS115/pPIC9K-NTL2在生长阶段发酵条件的考察 | 第52-53页 |
| 5.2.2 毕赤酵母GS115/pPIC9K-NTL2在诱导阶段的发酵条件考察 | 第53-54页 |
| 5.2.3 毕赤酵母GS115/pPIC9K-NTL2生长及诱导曲线的制作 | 第54页 |
| 5.2.4 毕赤酵母GS115/pPIC9K-NTL2发酵过程中诱导策略的考察 | 第54页 |
| 5.2.5 毕赤酵母GS115/pPIC9K-NTL2在发酵罐中表达条件的摸索 | 第54-56页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第56-69页 |
| 5.3.1 毕赤酵母GS115/pPIC9K-NTL2生长阶段发酵条件的优化 | 第56-60页 |
| 5.3.2 毕赤酵母GS115/pPIC9K-NTL2诱导阶段发酵条件的优化 | 第60-64页 |
| 5.3.3 毕赤酵母GS115/pPIC9K-NTL2发酵的生长及诱导曲线 | 第64-65页 |
| 5.3.4 毕赤酵母GS115/pPIC9K-NTL2的诱导策略 | 第65-66页 |
| 5.3.5 发酵罐生产重组中国水仙凝集素的条件 | 第66-69页 |
| 5.4 木章小结 | 第69-70页 |
| 第六章 重组中国水仙凝集素的分离纯化 | 第70-78页 |
| 6.1 实验材料与方法 | 第70页 |
| 6.1.1 材料 | 第70页 |
| 6.1.2 主要仪器 | 第70页 |
| 6.2 实验方法 | 第70-72页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第72-77页 |
| 6.3.1 重组中国水仙凝集素分离纯化层析介质的选择 | 第72-75页 |
| 6.3.2 重组中国水仙凝集素分离纯化工艺的优化 | 第75-76页 |
| 6.3.3 重组中国水仙凝集素免疫印迹检测结果 | 第76-77页 |
| 6.4 本章结论 | 第77-78页 |
| 第七章 结论与建议 | 第78-80页 |
| 7.1 结论 | 第78-79页 |
| 7.2 建议 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
| 附录 | 第84-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第98-100页 |
| 作者及导师简介 | 第100-101页 |
| 附件 | 第101-102页 |
