| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 研究意义 | 第13-14页 |
| 1.2 研究背景 | 第14-20页 |
| 1.2.1 纤维素的分子特征 | 第14页 |
| 1.2.2 纤维素合酶基因的研究历史 | 第14页 |
| 1.2.3 植物纤维素合酶基因的结构 | 第14-15页 |
| 1.2.4 纤维素合酶复合物 | 第15-17页 |
| 1.2.5 植物纤维素合酶与纤维素合成的关系 | 第17页 |
| 1.2.6 参与纤维素生物合成的非CesA基因 | 第17-18页 |
| 1.2.7 林木纤维素合成酶基因研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3 技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 实验材料及方法 | 第21-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 植物材料及培养方法 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第21页 |
| 2.1.3 试剂及配制方法 | 第21-23页 |
| 2.2 兴安落叶松LgCesA3基因的克隆 | 第23-30页 |
| 2.2.1 RNA的提取及反转录产物的检测 | 第23-24页 |
| 2.2.2 LgCesA3基因片段的扩增 | 第24-26页 |
| 2.2.3 LgCesA3基因末端序列的克隆 | 第26-29页 |
| 2.2.4 LgCesA3 cDNA全长序列的克隆 | 第29-30页 |
| 2.2.5 LgCesA3基因组DNA全长序列的克隆 | 第30页 |
| 2.3 兴安落叶松LgCesA3基因的生物信息学分析 | 第30-31页 |
| 2.4 兴安落叶松LgCesA3基因亚细胞定位分析 | 第31-34页 |
| 2.4.1 pUC18-LgCesA3-GFP载体的构建 | 第31-34页 |
| 2.4.2 基因枪介导pUC18-LgCesA3-GFP载体转化洋葱表皮细胞 | 第34页 |
| 2.5 兴安落叶松LgCesA3基因的表达特性分析 | 第34-38页 |
| 2.5.1 LgCesA3基因启动子的克隆 | 第34-37页 |
| 2.5.2 LgCesA3基因的表达模式分析 | 第37-38页 |
| 2.5.3 LgCesA3基因的表达调控机理分析 | 第38页 |
| 2.6 兴安落叶松LgCesA3基因的功能分析 | 第38-46页 |
| 2.6.1 pBI101-LgCesA3双元表达载体的构建 | 第38-41页 |
| 2.6.2 拟南芥的遗传转化及转化子的筛选和鉴定 | 第41-43页 |
| 2.6.3 CesA酶活性检测 | 第43-44页 |
| 2.6.4 纤维素和半纤维素含量的测定 | 第44-46页 |
| 第三章 结果与分析 | 第46-66页 |
| 3.1 LgCesA3基因的克隆 | 第46-50页 |
| 3.1.1 LgCesA3基因片段的克隆 | 第46-47页 |
| 3.1.2 LgCesA3基因末端序列的克隆 | 第47-48页 |
| 3.1.3 LgCesA3 cDNA全长序列的克隆 | 第48页 |
| 3.1.4 LgCesA3基因组DNA全长序列的克隆 | 第48-50页 |
| 3.2 LgCesA3基因生物信息学分析 | 第50-56页 |
| 3.2.1 LgCesA3的序列分析 | 第50-51页 |
| 3.2.2 二级结构预测 | 第51页 |
| 3.2.3 亚细胞定位预测 | 第51页 |
| 3.2.4 信号肽预测 | 第51-52页 |
| 3.2.5 蛋白质跨膜结构域预测 | 第52页 |
| 3.2.6 疏水性/亲水性分析 | 第52-53页 |
| 3.2.7 保守结构域预测 | 第53页 |
| 3.2.8 同源性分析 | 第53-55页 |
| 3.2.9 系统进化分析 | 第55-56页 |
| 3.3 亚细胞定位分析 | 第56-58页 |
| 3.3.1 亚细胞定位表达载体pUC18-LgCesA3-GFP的构建 | 第56-57页 |
| 3.3.2 基因枪介导pUC18-LgCesA3-GFP转化洋葱表皮细胞 | 第57-58页 |
| 3.4 LgCesA3基因的表达特性分析 | 第58-61页 |
| 3.4.1 LgCesA3基因启动子分析 | 第58-60页 |
| 3.4.2 LgCesA3基因的表达模式分析 | 第60-61页 |
| 3.5 | 第61-66页 |
| 3.5.1 pBI101-LgCesA3双元表达载体的构建 | 第61-62页 |
| 3.5.2 pBI101-LgCesA3重组载体转化农瘤杆菌 | 第62-63页 |
| 3.5.3 转基因拟南芥幼苗的筛选与鉴定 | 第63-64页 |
| 3.5.4 转基因拟南芥CesA酶活性的鉴定 | 第64-65页 |
| 3.5.5 转基因拟南芥纤维素和半纤维素含量的测定 | 第65-66页 |
| 第四章 讨论 | 第66-68页 |
| 4.1 兴安落叶松LgCesA3基因的克隆及生物信息学分析 | 第66页 |
| 4.2 亚细胞定位分析 | 第66页 |
| 4.3 LgCesA3的表达特性分析 | 第66-67页 |
| 4.4 LgCesA3基因的功能分析 | 第67-68页 |
| 第五章 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
