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弓形虫效应分子GRA15_Ⅱ诱导巨噬细胞极化抗小鼠肝癌的研究

中文摘要第7-10页
英文摘要第10-13页
1 前言第14-17页
2 材料与方法第17-39页
    2.1 材料第17-21页
        2.1.1 弓形虫、质粒构建和慢病毒感染第17页
        2.1.2 细胞株第17页
        2.1.3 实验动物第17-18页
        2.1.4 主要试剂第18-19页
        2.1.5 常规试剂的配制第19-20页
        2.1.6 主要仪器设备第20-21页
    2.2 实验方法第21-39页
        2.2.1 LV-gra15_Ⅱ-Mφ, LV-Mφ,Mφ 和 Hepa1-6 的复苏、传代,与冻存第21-22页
        2.2.2 LV-gra15_Ⅱ-Mφ, LV-Mφ 稳转后的筛选第22-23页
        2.2.3 流式细胞仪检测细胞转染效率和细胞表面标记第23页
        2.2.4 MTS测定第23页
        2.2.5 Transwell共培养实验第23-24页
        2.2.6 划痕实验第24-25页
        2.2.7 侵袭实验第25-26页
        2.2.8 动物模型的建立第26页
        2.2.9 动物实验分组,尾静脉高压注射和标本留取第26-27页
        2.2.10 总RNA的提取、浓度和纯度的测定第27-28页
        2.2.11 cDNA的合成第28-29页
        2.2.12 逆转录PCR( RT-PCR)第29-30页
        2.2.13 实时定量PCR(qRT-PCR)第30-31页
        2.2.14 蛋白印迹(western blot, WB)第31-33页
        2.2.15 酶联免疫实验(ELISA)第33-35页
        2.2.16 Griess试剂盒检测细胞培养上清中的NO第35-36页
        2.2.17 脾淋巴细胞的分离和培养第36页
        2.2.18 脾和瘤体的冰冻切片(frozen section)第36-37页
        2.2.19 免疫组化(immunohistochemistry, IHC)第37-38页
        2.2.20 数据处理第38-39页
3 结果第39-49页
    3.1 获得RAW264.7 稳定转染细胞第39-40页
    3.2 GRA15_Ⅱ驱动RAW264.7 向M1极化第40-41页
    3.3 LV-gra15_Ⅱ-Mφ 体内抑制肿瘤细胞Hepa1-6 的增殖第41-44页
    3.4 LV-gra15_Ⅱ-Mφ 治疗荷瘤小鼠脾细胞分泌细胞因子的变化第44-46页
    3.5 LV-gra15_Ⅱ-Mφ 体外抑制Hepa1-6 的侵袭和迁移第46-48页
    3.6 LV-gra15_Ⅱ-Mφ 不会引起 C57BL/6 小鼠明显的同种异体反应第48-49页
4 讨论第49-52页
5 结论第52页
6 参考文献第52-56页
7 附录第56-58页
    7.1 个人简历第56页
    7.2 攻读硕士期间所获荣誉第56-57页
    7.3 在读期间发表论文情况第57页
    7.4 硕士研究生期间参与科研项目第57-58页
8 致谢第58-59页
9 综述第59-70页
    参考文献第65-70页

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