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长牡蛎神经内分泌免疫系统调节机制的初步研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 绪论第14-40页
    第一节 NEI系统概述第14-21页
        一、高等动物NEI系统第14-17页
        二、无脊椎动物NEI系统第17-21页
    第二节 软体动物是研究NEI系统的理想材料第21-25页
        一、软体动物的免疫应答过程第22页
        二、软体动物的神经内分泌应答过程第22-23页
        三、高等动物与软体动物NEI系统的共性第23-25页
    第三节 软体动物中存在多种类型的NEI系统第25-37页
        一、儿茶酚胺系统第26-28页
        二、脑啡肽系统第28-30页
        三、胆碱系统第30-32页
        四、NO系统第32-36页
        五、氨基酸系统第36-37页
    第四节 本研究的目的和意义第37-40页
        一、研究意义第37页
        二、研究目的第37-40页
第二章 实验材料与方法第40-68页
    第一节 实验材料第40-45页
        一、实验动物、细胞株及菌株第40页
        二、试剂耗材及引物信息第40-44页
        三、主要仪器设备第44-45页
    第二节 实验方法第45-68页
        一、长牡蛎血淋巴细胞原代培养第45-46页
        二、长牡蛎个体LPS、TNF-α 刺激及神经递质和受体拮抗剂孵育实验第46页
        三、长牡蛎血淋巴细胞刺激实验第46-47页
        四、长牡蛎幼虫灿烂弧菌刺激和高温胁迫第47页
        五、长牡蛎幼虫ENK孵育实验第47页
        六、总RNA提取和cDNA文库构建第47-48页
        七、目的基因克隆及序列分析第48-49页
        八、荧光实时定量PCR第49页
        九、幼虫及细胞蛋白的提取第49-50页
        十、Western blotting分析第50页
        十一、免疫相关酶活检测第50-52页
        十二、长牡蛎神经系统的显微解剖第52-53页
        十三、石蜡组织切片的制备和免疫组织化学实验第53-54页
        十四、免疫荧光实验第54页
        十五、外源基因的瞬时转染第54-55页
        十六、细胞内二级信使Ca~(2+)和cAMP含量的测定第55页
        十七、细胞内二级信使cAMP含量的测定第55-56页
        十八、血淋巴上清及细胞培养基中神经递质含量的检测第56-59页
        十九、血淋巴细胞中神经递质合成/分解相关酶活力的测定第59-60页
        二十、血淋巴细胞裂解液抗菌活力的测定第60-61页
        二十一、长牡蛎血淋巴细胞吞噬活性和凋亡指数的检测第61-62页
        二十二、长牡蛎幼虫的扫描电镜观察第62页
        二十三、转录组测序及数据分析第62-64页
        二十四、蛋白质组测序及分析第64-68页
第三章 实验结果第68-136页
    第一节 长牡蛎NEI系统的形态观察和分子鉴定第68-93页
        一、长牡蛎神经系统的显微解剖及组织切片观察第68-70页
        二、长牡蛎神经递质受体基因的分子特征及功能分析第70-90页
        三、长牡蛎脑啡肽能系统的早期发生观察第90-93页
    第二节 长牡蛎神经内分泌系统的激活模式第93-113页
        一、灿烂弧菌刺激和高温胁迫激活长牡蛎幼虫儿茶酚胺系统第93-100页
        二、LPS刺激促进血淋巴细胞中大量免疫基因发生差异表达第100-102页
        三、体内LPS刺激激活长牡蛎神经内分泌免疫应答第102-104页
        四、LPS刺激激活体外培养的长牡蛎血淋巴细胞的神经内分泌免疫应答第104-110页
        五、体内细胞因子TNF-α 通过MAPK通路激活血淋巴细胞神经性免疫调控第110-113页
    第三节 神经递质的免疫调节方式及作用第113-136页
        一、膜受体介导神经递质的免疫调控作用第113-114页
        二、ENK处理增强长牡蛎幼虫体液免疫防御能力第114-119页
        三、儿茶酚胺提升长牡蛎幼虫抗菌和耐热能力第119-120页
        四、神经递质调控长牡蛎血淋巴细胞的转录过程第120-124页
        五、神经递质调控长牡蛎血淋巴细胞的蛋白表达第124-129页
        六、神经递质调节长牡蛎细胞免疫应答过程第129-132页
        七、神经递质调节长牡蛎体液免疫应答过程第132-133页
        八、神经内分泌免疫调节在长牡蛎的环境适应中发挥重要作用第133-136页
第四章 分析与讨论第136-154页
    第一节 长牡蛎NEI系统的组织基础特征第137-144页
        一、长牡蛎神经系统的组织定位和形态鉴定第137-139页
        二、神经递质受体的分子特征第139-144页
    第二节 长牡蛎神经内分泌系统的激活模式第144-147页
        一、细胞因子TNF-α 对长牡蛎神经内分泌系统的激活第144-145页
        二、外部环境因子对长牡蛎神经内分泌系统的激活第145-147页
    第三节 长牡蛎神经内分泌系统的调控机制第147-154页
        一、血淋巴细胞作为免疫细胞,通过控制其细胞膜表面受体的表达水平和结合活性,选择性介导神经性免疫调节第148-150页
        二、血淋巴细胞也可以作为神经内分泌细胞,通过自分泌或旁分泌的方式调控免疫应答第150-151页
        三、多种细胞因子、转录因子和信号转导通路参与了长牡蛎的神经内分泌免疫调控第151-154页
第五章 结论第154-158页
参考文献第158-182页
致谢第182-184页
博士期间完成和发表的论文第184-188页
作者简历第188页

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