| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第11-31页 |
| 1.1 弧菌 | 第11-19页 |
| 1.1.1 溶藻弧菌的生物学特性 | 第11页 |
| 1.1.2 溶藻弧菌的致病性与毒力因子 | 第11-16页 |
| 1.1.2.1 黏附素 | 第12页 |
| 1.1.2.2 外膜蛋白 | 第12-13页 |
| 1.1.2.3 胞外产物 | 第13-14页 |
| 1.1.2.4 脂多糖 | 第14-15页 |
| 1.1.2.5 铁吸收系统 | 第15-16页 |
| 1.1.3 弧菌病 | 第16-17页 |
| 1.1.4 拮抗菌及其代谢产物抗弧菌研究 | 第17-19页 |
| 1.2 鞭毛 | 第19-24页 |
| 1.2.1 鞭毛细丝 | 第20页 |
| 1.2.2 鞭毛基体 | 第20-21页 |
| 1.2.3 鞭毛马达 | 第21-22页 |
| 1.2.4 FlgA和FlgP蛋白 | 第22页 |
| 1.2.5 FlhG和FlhF蛋白 | 第22-23页 |
| 1.2.6 鞭毛组装 | 第23页 |
| 1.2.7 鞭毛的基因调控 | 第23-24页 |
| 1.3 芽孢杆菌脂肽 | 第24-29页 |
| 1.3.1 芽孢杆菌脂肽的研究概况 | 第24-29页 |
| 1.3.1.1 伊枯草菌素家族Iturins | 第24-26页 |
| 1.3.1.2 芬荠素家族Fengycins | 第26-27页 |
| 1.3.1.3 表面活性素家族Surfactins | 第27-29页 |
| 1.3.2 芽孢杆菌脂肽的分离与鉴定研究 | 第29页 |
| 1.3.2.1 脂肽的定性检测 | 第29页 |
| 1.3.2.2 脂肽的纯化与鉴定 | 第29页 |
| 1.4 本论文研究目的与意义 | 第29-31页 |
| 第二章 实验材料 | 第31-34页 |
| 2.1 菌株 | 第31页 |
| 2.2 培养基 | 第31页 |
| 2.3 实验试剂 | 第31-32页 |
| 2.4 实验设备 | 第32-34页 |
| 第三章 实验方法 | 第34-46页 |
| 3.1 溶藻弧菌的分离与鉴定 | 第34页 |
| 3.2 溶藻弧菌的运动性 | 第34页 |
| 3.3 溶藻弧菌的致病性 | 第34-35页 |
| 3.4 菌株的分离、筛选与鉴定 | 第35-37页 |
| 3.4.1 菌种库的扩充 | 第35页 |
| 3.4.2 活性菌株的筛选 | 第35页 |
| 3.4.3 菌株的鉴定 | 第35-37页 |
| 3.5 活性物质的发酵优化及性质确定 | 第37-38页 |
| 3.5.1 发酵条件的优化 | 第37页 |
| 3.5.2 活性物质类型性质的确定 | 第37-38页 |
| 3.6 活性物质的分离纯化 | 第38-39页 |
| 3.6.1 菌株规模发酵培养 | 第38页 |
| 3.6.2 粗提物的制备 | 第38-39页 |
| 3.6.3 Sephadex LH-20凝胶过滤层析 | 第39页 |
| 3.6.4 HPLC分离纯化 | 第39页 |
| 3.7 活性物质的结构鉴定 | 第39-40页 |
| 3.7.1 活性物质的氨基酸分析 | 第39-40页 |
| 3.7.2 活性物质的质谱分析 | 第40页 |
| 3.7.3 活性物质的核磁共振波谱分析 | 第40页 |
| 3.8 活性物质对溶藻弧菌运动性的影响 | 第40-41页 |
| 3.8.1 平板抑制实验 | 第40页 |
| 3.8.2 生长状态曲线 | 第40-41页 |
| 3.9 活性物质对溶藻弧菌致病性的影响 | 第41页 |
| 3.10 活性物质对溶藻弧菌的聚集作用 | 第41页 |
| 3.10.1 聚集效应 | 第41页 |
| 3.10.2 溶藻弧菌形态变化 | 第41页 |
| 3.11 活性物质对其他细菌聚集和生物膜的影响 | 第41-42页 |
| 3.12 活性物质对溶藻弧菌黏附能力的影响 | 第42页 |
| 3.13 活性物质对溶藻弧菌鞭毛形成相关基因转录的影响 | 第42-46页 |
| 3.13.1 细菌总RNA提取 | 第42-43页 |
| 3.13.2 cDNA合成 | 第43页 |
| 3.13.3 qRT-PCR定量 | 第43-46页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第46-70页 |
| 4.1 溶藻弧菌的分离与鉴定 | 第46-47页 |
| 4.2 溶藻弧菌的运动性 | 第47-49页 |
| 4.3 溶藻弧菌的致病性 | 第49-50页 |
| 4.4 菌株的分离、筛选与鉴定 | 第50-51页 |
| 4.4.1 菌株的分离 | 第50页 |
| 4.4.2 抑制运动性的筛选 | 第50-51页 |
| 4.4.3 活性菌株的鉴定 | 第51页 |
| 4.5 活性物质的发酵优化及性质确定 | 第51-53页 |
| 4.5.1 发酵条件的优化 | 第51-52页 |
| 4.5.2 活性物质类型性质的确定 | 第52-53页 |
| 4.6 活性物质的分离纯化 | 第53-55页 |
| 4.6.1 活性物质的发酵和粗提物制备 | 第53页 |
| 4.6.2 Sephadex LH-20凝胶过滤层析 | 第53-54页 |
| 4.6.3 HPLC分离纯化 | 第54-55页 |
| 4.7 活性物质的结构鉴定 | 第55-60页 |
| 4.7.1 活性物质的氨基酸分析 | 第55页 |
| 4.7.2 活性物质的高分辨质谱分析 | 第55-56页 |
| 4.7.3 活性物质的二级质谱分析 | 第56-57页 |
| 4.7.4 活性物质的核磁共振波谱分析 | 第57-60页 |
| 4.8 活性物质对溶藻弧菌运动性的影响 | 第60页 |
| 4.9 活性物质对溶藻弧菌致病性的影响 | 第60-61页 |
| 4.10 活性物质对溶藻弧菌的聚集沉降 | 第61-63页 |
| 4.10.1 聚集效应 | 第61-62页 |
| 4.10.2 溶藻弧菌形态变化 | 第62-63页 |
| 4.11 活性物质对其他细菌聚集和生物膜的影响 | 第63-64页 |
| 4.12 活性物质对溶藻弧菌黏附能力的影响 | 第64-65页 |
| 4.13 活性物质对溶藻弧菌鞭毛形成相关基因表达的影响 | 第65-67页 |
| 4.14 讨论 | 第67-70页 |
| 第五章 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 附录 1 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文 | 第82页 |
