英文缩略词 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
前言 | 第10-12页 |
材料与方法 | 第12-31页 |
1. 主要材料 | 第12-17页 |
1.1 组织标本 | 第12页 |
1.2 细胞株来源 | 第12页 |
1.3 质粒来源 | 第12页 |
1.4 主要仪器和设备 | 第12-13页 |
1.5 主要试剂 | 第13-15页 |
1.6 主要试剂的配制 | 第15-17页 |
1.7 PCR引物 | 第17页 |
2. 实验方法 | 第17-31页 |
2.1 组织标本采集 | 第17-18页 |
2.2 细胞培养 | 第18页 |
2.3 慢病毒包装 | 第18-20页 |
2.4 慢病毒感染MGC-803 并诱导稳转株MGC-803/COUP-TFII | 第20-21页 |
2.5 总RNA提取及m RNA逆转成c DNA | 第21-23页 |
2.6 实时荧光定量PCR(染料法) | 第23-24页 |
2.7 Western-blot实验 | 第24-27页 |
2.8 免疫组化检测 | 第27-28页 |
2.9 裸鼠胃癌肝脏转移实验 | 第28页 |
2.10 Transwell实验检测细胞迁移/侵袭性 | 第28-29页 |
2.11 平板克隆形成实验 | 第29页 |
2.12 MTT实验检测细胞活性 | 第29-30页 |
2.13 统计学方法 | 第30-31页 |
结果 | 第31-40页 |
1. 胃癌组织中COUP-TFII的表达 | 第31-32页 |
1.1 Real-time PCR检测胃癌组织中COUP-TFII基因m RNA的相对表达量 | 第31页 |
1.2 Western-blot检测胃癌组织中COUP-TFII蛋白的表达 | 第31-32页 |
1.3 免疫组织化学结果 | 第32页 |
2. 不同胃癌细胞株与正常胃黏膜上皮细胞株中COUP-TFII的表达情况 | 第32-33页 |
2.1 Real-time PCR检测结果 | 第32-33页 |
2.2 Western-blot检测结果 | 第33页 |
3. 过表达COUP-TFII对胃癌细胞肿瘤特性的影响 | 第33-36页 |
3.1 过表达COUP-TFII稳转细胞株的建立和鉴定 | 第33-34页 |
3.2 MTT法检测过表达COUP-TFII对胃癌细胞增殖能力的影响。 | 第34页 |
3.3 稳转株Transwell细胞迁移/侵袭实验 | 第34-35页 |
3.4 稳转株裸鼠胃癌肝转移实验 | 第35-36页 |
4. 正常胃黏膜上皮细胞株敲低COUP-TFII后对生物学特性的影响 | 第36-38页 |
4.1 敲低细胞株的建立及鉴定 | 第36页 |
4.2 平板克隆形成实验法检测敲低COUP-TFII对GES-1 增殖能力的影响 | 第36-37页 |
4.3 MTT法检测敲低COUP-TFII对GES-1 增殖能力的影响 | 第37页 |
4.4 敲低COUP-TFII对GES-1 迁移/侵袭能力的影响 | 第37-38页 |
5. 胃癌病例临床资料与预后生存率分析 | 第38-40页 |
5.1 Oncomine数据库中胃癌病例临床资料分析 | 第38-39页 |
5.2 在线生存分析数据库分析胃癌患者生存率 | 第39-40页 |
讨论 | 第40-42页 |
结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-46页 |
综述 | 第46-51页 |
致谢 | 第51页 |