| 摘要 | 第4-8页 |
| abstract | 第8-11页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 1 材料与方法 | 第17-27页 |
| 1.1 实验动物 | 第17页 |
| 1.2 实验物品及试剂 | 第17-19页 |
| 1.3 各溶液配制 | 第19-20页 |
| 1.4 实验常用仪器 | 第20-21页 |
| 1.5 实验方法 | 第21-27页 |
| 1.5.1 在线数据库预测mi R-206 可能调控的靶基因 | 第21页 |
| 1.5.2 大鼠颈静脉插管技术、海洛因自身给药训练、条件性线索诱导的复吸行为测试 | 第21-22页 |
| 1.5.3 大鼠伏隔核处注射慢病毒 | 第22页 |
| 1.5.4 组织蛋白的提取步骤 | 第22页 |
| 1.5.5 提取脑组织总RNA | 第22-23页 |
| 1.5.6 逆转录过程及q RT-PCR实验 | 第23-24页 |
| 1.5.7 Western blot实验 | 第24-25页 |
| 1.5.8 脑组织切片灌流，观察病毒转染效率 | 第25页 |
| 1.5.9 双荧光素酶实验 | 第25-26页 |
| 1.5.10 数据统计 | 第26-27页 |
| 2 实验安排 | 第27-30页 |
| 2.1 实验一基因芯片分析大鼠伏隔核的miRNA表达谱，完成目标miRNA-206 的筛选和靶向分析 | 第27页 |
| 2.2 实验二验证海洛因成瘾大鼠伏隔核miR-206 表达 | 第27页 |
| 2.3 实验三观察海洛因成瘾大鼠的伏隔核不同程度表达miR2063p对线索诱导大鼠复吸行为的影响，并检测目的蛋白表达 | 第27-28页 |
| 2.4 实验四伏隔核抑制miR2065p的表达对线索诱导的大鼠复吸行为的影响 | 第28页 |
| 2.5 实验五大鼠伏隔核部位消减Gabbr1对海洛因复吸行为的影响 | 第28页 |
| 2.6 实验六在海洛因成瘾的大鼠伏隔核部位过表达MeCP2，观察其复吸行为变化 | 第28页 |
| 2.7 实验七双荧光素酶实验检测miR-206 与MeCP2基因的调控关系 | 第28-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-44页 |
| 3.1 实验一通过基因芯片分析大鼠伏隔核miRNA表达谱，完成miRNA-206 的筛选和Targetscan靶向分析 | 第30-31页 |
| 3.2 实验二验证海洛因成瘾大鼠的伏隔核miR-206 的表达 | 第31-33页 |
| 3.2.1 建立海洛因自身给药模型 | 第31-32页 |
| 3.2.2 qRT-PCR实验验证基因芯片表达谱 | 第32-33页 |
| 3.3 实验三海洛因成瘾大鼠伏隔核不同程度表达miR2063p对线索诱导的复吸行为和蛋白表达的影响 | 第33-37页 |
| 3.3.1 海洛因成瘾大鼠伏隔核注射miR-206 病毒对基因表达的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.2 伏隔核miR2063p不同程度的表达对大鼠海洛因复吸行为的影响 | 第34页 |
| 3.3.3 伏隔核miR2063p对GABBR1的表达调控 | 第34-35页 |
| 3.3.4 伏隔核miR2063p对BDNF/Me CP2的表达调控 | 第35-37页 |
| 3.4 实验四伏隔核抑制miR2065p的表达对线索诱导大鼠复吸行为的影响 | 第37-38页 |
| 3.4.1 抑制伏隔核miR2065p的表达对大鼠海洛因复吸行为的影响 | 第37-38页 |
| 3.4.2 观察大鼠海洛因复吸行为的变化，并灌流脑组织 | 第38页 |
| 3.5 实验五大鼠伏隔核部位消减Gabbr1对复吸行为的影响 | 第38-40页 |
| 3.5.1 大鼠伏隔核部位消减Gabbr1对复吸行为的影响 | 第38-39页 |
| 3.5.2 灌流脑组织，观察病毒转染效率 | 第39-40页 |
| 3.6 实验六对海洛因成瘾的大鼠伏隔核过表达MeCP2，观察其复吸行为变化 | 第40-42页 |
| 3.6.1 qRT-PCR实验发现大鼠伏隔核过表达MeCP2 | 第40页 |
| 3.6.2 观察伏隔核过表达MeCP2后，大鼠海洛因复吸行为的变化 | 第40-41页 |
| 3.6.3 伏隔核过表达MeCP2后，观察MeCP2及BDNF蛋白的表达变化 | 第41-42页 |
| 3.7 实验七双荧光素酶实验检测miR-206 与MeCP2基因的调控关系 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 5 结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录A 缩写词及中英文对照表 | 第53-54页 |
| 在学研究成果 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录B 文献综述 | 第56-66页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
