摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
第一章 植物抗逆基因研究进展 | 第13-28页 |
1.抗逆功能基因 | 第14-17页 |
·渗透调节相关的功能基因 | 第14-16页 |
·脯氨酸合成相关酶基因 | 第14页 |
·甜菜碱合成相关酶基因 | 第14页 |
·海草糖合成相关酶基因 | 第14-15页 |
·果聚糖合成相关酶基因 | 第15页 |
·糖醇合成相关基因 | 第15页 |
·水通道蛋白基因 | 第15-16页 |
·具有解毒作用的功能基因 | 第16-17页 |
·超氧化物歧化酶基因 | 第16页 |
·过氧化物酶基因 | 第16页 |
·过氧化氢酶基因 | 第16-17页 |
·保护生物大分子和细胞膜结构的功能基因 | 第17页 |
·LEA 蛋白基因 | 第17页 |
·抗冻蛋白基因 | 第17页 |
2. 抗逆调控基因 | 第17-20页 |
·感应和转导胁迫信号的蛋白激酶 | 第18-19页 |
·传递信号和调控基因表达的转录因子 | 第19-20页 |
3. 植物抗逆基因分离策略 | 第20-22页 |
·基于胁迫前后mRNA 表达差异的分离发法 | 第20-21页 |
·基于基因图谱和基因序列的分离方法 | 第21页 |
·基于基因加标签的分离方法 | 第21页 |
·基于基因产物的分离方法 | 第21-22页 |
·基因组学/蛋白组学/生物信息学分离方法 | 第22页 |
4. 展望 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-28页 |
第二章 烟草AP2/ERF 转录因子基因的克隆与表达分析 | 第28-45页 |
1. 材料和方法 | 第29-31页 |
·实验材料准备 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-31页 |
·RNA 的提取与cDNA 的合成 | 第30页 |
·RACE 法克隆基因全长 | 第30-31页 |
·目的基因的cDNA 和基因组序列扩增 | 第31页 |
·基因生物信息学分析 | 第31页 |
·半定量RT-PCR | 第31页 |
2. 结果与分析 | 第31-41页 |
·利用RACE 获得了AP2/ERF 基因的全长 | 第31-32页 |
·烟草AP2/ERF 基因的组成和结构分析 | 第32-36页 |
·烟草AP2/ERF 基因理化特征和功能域预测 | 第36-38页 |
·烟草AP2/ERF 基因功能域三级结构预测及分析 | 第38-39页 |
·NtAP2/ERF1 基因的演化分析 | 第39-40页 |
·NtAP2/ERF 基因的表达特征 | 第40-41页 |
3. 结论与讨论 | 第41-43页 |
参考文献 | 第43-45页 |
第三章 烟草CDI 基因的克隆与表达分析 | 第45-58页 |
1. 材料和方法 | 第46-48页 |
·实验材料 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-48页 |
·RNA 的提取与cDNA 的合成 | 第46-47页 |
·RACE 方法克隆基因全长 | 第47页 |
·基因cDNA 和基因组序列扩增 | 第47页 |
·基因生物信息学分析 | 第47-48页 |
·基因的半定量RT-PCR 分析 | 第48页 |
2. 结果与分析 | 第48-54页 |
·烟草CDI 基因的全长克隆与测序分析 | 第48-50页 |
·利用RACE 方法克隆了基因全长 | 第48-49页 |
·烟草CDI 基因cDNA 和基因组扩增 | 第49页 |
·烟草CDI 基因结构和序列分析 | 第49-50页 |
·NtCDI 蛋白的理化和生物学特征预测 | 第50-52页 |
·NtCDI 蛋白的功能域预测 | 第50页 |
·NtCDI 蛋白的理化和生物学特征预测 | 第50-52页 |
·NtCDI1 基因的同源性分析 | 第52页 |
·NtCDI 基因表达特征及其与环境胁迫的关系 | 第52-54页 |
3. 结论与讨论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-58页 |
第四章 烟草受水杨酸和脱落酸诱导的bHLH 基因的克隆与表达分析 | 第58-70页 |
1. 材料和方法 | 第59-61页 |
·实验材料 | 第59页 |
·实验方法 | 第59-61页 |
·RNA 的提取与cDNA 的合成 | 第59-60页 |
·RACE 方法克隆基因3’端及cDNA 和基因组扩增 | 第60页 |
·基因生物信息学分析 | 第60页 |
·半定量RT-PCR 分析基因表达 | 第60-61页 |
2. 结果与分析 | 第61-67页 |
·烟草bHLH 基因全长cDNA 和gDNA 克隆及序列分析 | 第61-64页 |
·利用RACE 方法克隆了基因全长 | 第61页 |
·烟草bHLH 基因cDNA 序列分析 | 第61-63页 |
·烟草bHLH 基因gDNA 序列分析和功能域预测 | 第63-64页 |
·烟草NtbHLH 蛋白保守域的三级结构预测 | 第64页 |
·NtbHLH 蛋白的理化和生物学特征预测 | 第64页 |
·NtbHLH1 基因的演化分析 | 第64-65页 |
·烟草NtbHLH 基因的表达特征鉴定 | 第65-67页 |
3. 结论与讨论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
第五章 烟草GLP 基因的克隆、表达分析及沉默载体的构建 | 第70-86页 |
1. 材料和方法 | 第71-73页 |
·实验材料 | 第71页 |
·实验方法 | 第71-73页 |
·RNA 的提取与第一链cDNA 的合成 | 第71-72页 |
·RACE 法克隆基因全长 | 第72页 |
·cDNA 和基因组扩增 | 第72页 |
·基因生物信息学分析 | 第72-73页 |
·半定量RT-PCR | 第73页 |
·目的基因VIGS 载体构建 | 第73页 |
2. 结果与分析 | 第73-79页 |
·烟草GLP 基因全长cDNA 和gDNA 克隆及序列分析 | 第73-76页 |
·利用RACE 方法克隆了基因全长 | 第73-74页 |
·烟草GLP 基因cDNA 序列分析 | 第74-75页 |
·烟草GLP 基因gDNA 序列分析和功能域预测 | 第75页 |
·NtGLP1 蛋白保守域的三级结构预测 | 第75-76页 |
·NtGLP1 蛋白的理化和生物学特征预测 | 第76-77页 |
·NtGLP1 基因的同源性分析 | 第77-78页 |
·烟草GLP 基因的半定量RT-PCR 分析 | 第78-79页 |
3. NtGLP 基因VIGS 载体的构建 | 第79-81页 |
4. 结论与讨论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-86页 |
第六章 烟草LEA 基因的表达分析 | 第86-95页 |
1. 材料和方法 | 第87-89页 |
·实验材料 | 第87-88页 |
·实验方法 | 第88-89页 |
·烟草RNA 提取 | 第88页 |
·芯片杂交分析过程 | 第88页 |
·半定量RT-PCR | 第88-89页 |
2. 结果与分析 | 第89-92页 |
·烟草LEA 基因的生物信息学分析 | 第89页 |
·RNA 的提取 | 第89-90页 |
·cDNA 合成和RT-PCR 分析 | 第90-91页 |
·基因RT-PCR 结果与芯片杂交结果比较 | 第91-92页 |
3. 结论与讨论 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-95页 |
致谢 | 第95页 |