摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-23页 |
·γ-氨基丁酸的生理作用机制 | 第11-13页 |
·GABA 的代谢途径 | 第11-12页 |
·GABA 的功能机理 | 第12-13页 |
·GABA 的研究进展 | 第13-17页 |
·GABA 在哺乳动物体内的生理功能 | 第13-14页 |
·GABA 在植物体内的生理功能 | 第14-15页 |
·富含GABA 食品的研发应用 | 第15-16页 |
·GABA 的检测 | 第16-17页 |
·谷氨酸脱羧酶研究进展 | 第17页 |
·转基因水稻研究概况 | 第17-23页 |
·将外源基因转入水稻 | 第18-20页 |
·水稻转基因技术 | 第20-21页 |
·水稻转化受体系统的研究 | 第21-22页 |
·水稻转基因研究存在的问题 | 第22-23页 |
·本研究的目的和意义 | 第23页 |
2 实验材料与方法 | 第23-39页 |
·实验材料 | 第23-26页 |
·植物材料 | 第23页 |
·质粒与菌株 | 第23-25页 |
·分子生物学常用酶和试剂盒 | 第25页 |
·PCR 引物 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·水稻组培的培养基 | 第26页 |
·PCDMAR-GAD-hpt 表达载体的构建方法 | 第26-31页 |
·目的基因编码序列(ORF)的扩增及TA 克隆 | 第26-29页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第29页 |
·连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态Cell | 第29页 |
·大肠杆菌质粒的小量提取 | 第29-30页 |
·酶切体系 | 第30页 |
·T4 DNA 聚合酶补平粘性末端 | 第30-31页 |
·T4 DNA 连接法 | 第31页 |
·PCDMAR-GAD-hpt 表达载体的构建过程 | 第31-33页 |
·重组PCDMAR-GAD-hpt 表达载体转化根癌农杆菌EHA105 | 第33-34页 |
·根癌农杆菌EHA105 感受态cell 的制备 | 第33页 |
·重组PCDMAR-GAD-hpt 表达载体转化根癌农杆菌EHA105 | 第33页 |
·根癌农杆菌转化子的鉴定 | 第33-34页 |
·胚性愈伤组织的再生 | 第34-35页 |
·水稻幼胚愈伤组织的诱导 | 第34-35页 |
·水稻成熟胚愈伤组织的诱导 | 第35页 |
·掐芽 | 第35页 |
·继代 | 第35页 |
·重组农杆菌共转化水稻 | 第35-37页 |
·胚性愈伤组织的预培养 | 第35页 |
·农杆菌培养 | 第35-36页 |
·共培养 | 第36页 |
·除菌 | 第36页 |
·筛选抗性愈伤及再生植株 | 第36-37页 |
·T0 代转基因植株的检测 | 第37-39页 |
·T0 代转基因植株的PCR 检测 | 第37-38页 |
·T0 代转基因水稻种子GABA 含量的测定 | 第38-39页 |
3. 结果与分析 | 第39-47页 |
·osGAD 基因编码序列的扩增及TA 克隆 | 第39-40页 |
·PCDMAR-GAD-hpt 表达载体的构建 | 第40-42页 |
·PCDMAR-GAD-hpt 表达载体转化根癌农杆菌EHA105 | 第42-43页 |
·T-9 水稻的遗传转化 | 第43-45页 |
·转osGAD 基因T-9 水稻T0 代植株的PCR 分析 | 第45-46页 |
·转osGAD 基因T-9 水稻T0 代种子GABA 含量分析 | 第46-47页 |
4. 讨论 | 第47-50页 |
·转基因技术在改良水稻营养品质中的应用 | 第47页 |
·启动子的选择 | 第47-48页 |
·双T-DNA 共转化策略在转基因水稻中的优势 | 第48页 |
·农杆菌介导的台粳9 号遗传转化 | 第48-49页 |
·后续工作及展望 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
附录 | 第57-62页 |
致谢 | 第62页 |