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γ-氨基丁酸合成关键酶基因遗传转化水稻的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 文献综述第11-23页
   ·γ-氨基丁酸的生理作用机制第11-13页
     ·GABA 的代谢途径第11-12页
     ·GABA 的功能机理第12-13页
   ·GABA 的研究进展第13-17页
     ·GABA 在哺乳动物体内的生理功能第13-14页
     ·GABA 在植物体内的生理功能第14-15页
     ·富含GABA 食品的研发应用第15-16页
     ·GABA 的检测第16-17页
   ·谷氨酸脱羧酶研究进展第17页
   ·转基因水稻研究概况第17-23页
     ·将外源基因转入水稻第18-20页
     ·水稻转基因技术第20-21页
     ·水稻转化受体系统的研究第21-22页
     ·水稻转基因研究存在的问题第22-23页
   ·本研究的目的和意义第23页
2 实验材料与方法第23-39页
   ·实验材料第23-26页
     ·植物材料第23页
     ·质粒与菌株第23-25页
     ·分子生物学常用酶和试剂盒第25页
     ·PCR 引物第25页
     ·主要仪器第25-26页
     ·水稻组培的培养基第26页
   ·PCDMAR-GAD-hpt 表达载体的构建方法第26-31页
     ·目的基因编码序列(ORF)的扩增及TA 克隆第26-29页
     ·大肠杆菌感受态的制备第29页
     ·连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态Cell第29页
     ·大肠杆菌质粒的小量提取第29-30页
     ·酶切体系第30页
     ·T4 DNA 聚合酶补平粘性末端第30-31页
     ·T4 DNA 连接法第31页
   ·PCDMAR-GAD-hpt 表达载体的构建过程第31-33页
   ·重组PCDMAR-GAD-hpt 表达载体转化根癌农杆菌EHA105第33-34页
     ·根癌农杆菌EHA105 感受态cell 的制备第33页
     ·重组PCDMAR-GAD-hpt 表达载体转化根癌农杆菌EHA105第33页
     ·根癌农杆菌转化子的鉴定第33-34页
   ·胚性愈伤组织的再生第34-35页
     ·水稻幼胚愈伤组织的诱导第34-35页
     ·水稻成熟胚愈伤组织的诱导第35页
     ·掐芽第35页
     ·继代第35页
   ·重组农杆菌共转化水稻第35-37页
     ·胚性愈伤组织的预培养第35页
     ·农杆菌培养第35-36页
     ·共培养第36页
     ·除菌第36页
     ·筛选抗性愈伤及再生植株第36-37页
   ·T0 代转基因植株的检测第37-39页
     ·T0 代转基因植株的PCR 检测第37-38页
     ·T0 代转基因水稻种子GABA 含量的测定第38-39页
3. 结果与分析第39-47页
   ·osGAD 基因编码序列的扩增及TA 克隆第39-40页
   ·PCDMAR-GAD-hpt 表达载体的构建第40-42页
   ·PCDMAR-GAD-hpt 表达载体转化根癌农杆菌EHA105第42-43页
   ·T-9 水稻的遗传转化第43-45页
   ·转osGAD 基因T-9 水稻T0 代植株的PCR 分析第45-46页
   ·转osGAD 基因T-9 水稻T0 代种子GABA 含量分析第46-47页
4. 讨论第47-50页
   ·转基因技术在改良水稻营养品质中的应用第47页
   ·启动子的选择第47-48页
   ·双T-DNA 共转化策略在转基因水稻中的优势第48页
   ·农杆菌介导的台粳9 号遗传转化第48-49页
   ·后续工作及展望第49-50页
参考文献第50-57页
附录第57-62页
致谢第62页

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