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烟草全长cDNA文库的构建和LRR类受体蛋白激酶基因的克隆及表达分析

摘要第1-11页
Abstract第11-14页
第一章 植物富含亮氨酸重复类受体蛋白激酶研究进展第14-28页
 1 引言第14页
 2 植物类受体蛋白激酶RLK 的结构与分类第14-18页
   ·RLK 结构特征第14页
   ·RLK 分类第14-18页
     ·具有S-结构域型第15页
     ·富含亮氨酸重复(Leucine-rich repeats, LRR)型第15-16页
     ·类凝集素(Lectin-like)型第16-17页
     ·类表皮生长因子(EGF-like)型第17页
     ·类几丁质酶(Chitinase-related)型第17-18页
     ·其它RLK 类第18页
 3 LRR-RLK 的生物学功能第18-20页
   ·调控组织形成和器官发育第18-19页
   ·参与抗逆性反应第19页
   ·参与防御反应第19-20页
 4 LRR-RLK 参与的信号途径研究进展第20-22页
   ·BR 信号途径第20-21页
   ·CLV 信号途径第21-22页
 5 研究展望第22-23页
 参考文献第23-28页
第二章 烟草一个LRR 类受体蛋白激酶基因NtRLK1 的克隆与表达分析第28-44页
 1 引言第28-29页
 2 材料与方法第29-31页
   ·植物材料和细菌菌种第29页
   ·RACE 技术克隆NtRLK1 基因序列第29-30页
   ·NtRLK1 基因的生物信息学分析第30页
   ·RNA 的提取第30页
   ·NtRLK1 基因的组织器官特异性分析第30-31页
   ·NtRLK1 基因的表达模式分析第31页
 3 结果与分析第31-40页
   ·烟草NtRLK1 基因的全长cDNA 和gDNA 克隆及序列分析第31-34页
     ·RACE 克隆获得了NtRLK1 基因第31-32页
     ·cDNA 组成分析结果第32-33页
     ·DNA 组成分析结果第33-34页
   ·NtRLK1 编码的蛋白质结构特征与功能域预测第34-37页
     ·NtRLK1 编码的蛋白结构特征第34-35页
     ·LRR 保守域多重比较结果第35-37页
     ·NtRLK1 编码蛋白的理化特征第37页
   ·NtRLK1 编码的蛋白PKc 区同源性比对结果第37-38页
   ·RT-PCR 组织器官表达分析结果第38-39页
   ·RT-PCR 不同激素和环境胁迫下表达分析结果第39-40页
 4 讨论第40-42页
 参考文献第42-44页
第三章 烟草类受体蛋白激酶基因NtRLK2 的克隆与表达分析第44-60页
 1 引言第44-45页
 2 材料与方法第45-46页
   ·植物材料和细菌菌种第45页
   ·RACE 技术克隆NtRLK2 基因序列第45-46页
   ·NtRLK2 基因的生物信息学分析第46页
   ·NtRLK2 基因的表达模式分析第46页
 3 结果与分析第46-56页
   ·克隆了NtRLK2 基因的全长序列第46-50页
     ·RACE 克隆得到了目的基因第46-47页
     ·cDNA 结构特征分析结果第47-50页
     ·内含子和外显子分析结果第50页
   ·NtRLK2 编码的蛋白结构特征与功能域预测分析结果第50-53页
     ·NtRLK2 编码的氨基酸序列和理化特征第50-51页
     ·NtRLK2 编码的蛋白功能域分析结果第51-53页
   ·烟草NtRLK2 编码蛋白的同源性比对结果第53页
   ·NtRLK2 基因的表达特征第53-56页
     ·RNA 提取结果第53-54页
     ·NtRLK2 的时空表达特征第54-55页
     ·不同激素和环境胁迫下表达模式第55-56页
 4 讨论第56-58页
 参考文献第58-60页
第四章 烟草优质品种根全长cDNA 文库的构建和初步分析第60-70页
 1 引言第60页
 2 材料与方法第60-62页
   ·植物材料第60页
   ·实验试剂第60-61页
   ·实验方法第61-62页
     ·总RNA 提取第61页
     ·第一链cDNA 的合成第61页
     ·第二链cDNA 的合成第61页
     ·cDNA 的蛋白酶K 消化和SfiI 酶切第61页
     ·胶回收纯化和连接反应第61-62页
     ·电转化和原始文库的获得第62页
     ·cDNA 文库质量鉴定第62页
     ·文库的初步测序与生物信息学分析第62页
 3 结果与分析第62-68页
   ·总RNA 的提取鉴定第62-63页
   ·双链cDNA 合成结果第63页
   ·文库质量鉴定第63-65页
     ·文库库容量计算结果第63页
     ·文库重组率及插入片段鉴定第63-65页
   ·测序结果初步分析第65-68页
     ·BlastN 分析结果第65-66页
     ·Blast2Go 分析结果第66-68页
 4 讨论第68-69页
 参考文献第69-70页
第五章 利用SMART 技术构建烟草茎全长cDNA 文库第70-79页
 1 引言第70-71页
 2 材料与方法第71-72页
   ·植物材料第71页
   ·实验方法第71-72页
     ·RNA 提取、双链cDNA 的合成第71页
     ·胶回收纯化和连接反应第71页
     ·电转化和原始文库的获得第71页
     ·cDNA 文库质量鉴定第71页
     ·文库初步测序与生物信息学分析第71-72页
 3 结果与分析第72-75页
   ·总RNA 的提取结果第72页
   ·双链cDNA 合成结果第72页
   ·文库库容量及质量鉴定结果第72-73页
     ·文库库容量第72页
     ·文库重组率及插入片段鉴定第72-73页
   ·测序结果初步分析第73-75页
 4 讨论第75-77页
 参考文献第77-79页
第六章 烟草优质品种叶片全长cDNA 文库的构建和质量分析第79-89页
 1 引言第79-80页
 2 材料与方法第80-81页
   ·植物材料第80页
   ·实验方法第80-81页
     ·全长cDNA 文库的构建第80页
     ·全长cDNA 文库质量鉴定第80页
     ·文库初步测序及分析第80-81页
 3 结果与分析第81-86页
   ·总RNA 的提取结果第81页
   ·双链cDNA 合成结果第81页
   ·文库质量鉴定第81-83页
   ·测序结果初步分析第83-86页
     ·BlastN 和BlastX 比对结果第83-86页
     ·Blast2GO 注释结果第86页
 4 讨论第86-87页
 参考文献第87-89页
第七章 烟草优质品种花全长cDNA 文库的构建和质量鉴定第89-98页
 1 引言第89-90页
 2 材料与方法第90页
   ·烟草材料第90页
   ·实验方法第90页
     ·全长cDNA 文库的构建第90页
     ·全长cDNA 文库质量鉴定第90页
     ·文库初步测序及分析第90页
 3 结果与分析第90-95页
   ·总RNA 的提取结果第90-91页
   ·双链cDNA 合成结果第91页
   ·文库质量鉴定第91-92页
     ·文库库容量及滴度测定第91页
     ·文库重组率及插入片段鉴定第91-92页
   ·测序结果初步分析第92-95页
 4 讨论第95-96页
 参考文献第96-98页
第八章 烟草经激素诱导和环境胁迫下混合全长cDNA 文库构建第98-110页
 1 引言第98-99页
 2 材料与方法第99-100页
   ·植物材料第99页
   ·实验方法第99-100页
     ·全长cDNA 文库的构建第99页
     ·全长cDNA 文库质量鉴定第99-100页
     ·文库初步测序与生物信息学分析第100页
 3 结果与分析第100-105页
   ·RNA 提取结果第100页
   ·双链合成结果第100-101页
   ·文库质量鉴定第101-102页
     ·文库库容量第101页
     ·文库重组率及插入片段鉴定结果第101-102页
   ·文库部分克隆测序及BlastX 分析结果第102-105页
 4 讨论第105-107页
 参考文献第107-110页
致谢第110页

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