| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 引言 | 第9-14页 |
| 1.1 植物原生质体分离研究概况 | 第9-12页 |
| 1.1.1 原生质体的特点和应用 | 第9页 |
| 1.1.2 原生质体的分离与纯化及其影响因素 | 第9-11页 |
| 1.1.3 原生质体产量与活力的测定 | 第11-12页 |
| 1.2 植物蛋白质亚细胞定位分析方法 | 第12-13页 |
| 1.2.1 报告基因 | 第12页 |
| 1.2.2 转化受体材料 | 第12页 |
| 1.2.3 转化方法 | 第12-13页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第13-14页 |
| 2 实验材料与方法 | 第14-21页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第14页 |
| 2.2 所用引物 | 第14页 |
| 2.3 实验方法 | 第14-21页 |
| 2.3.1 缓冲液及主要试剂的配制 | 第14-15页 |
| 2.3.2 沙冬青原生质体分离与纯化 | 第15-16页 |
| 2.3.3 沙冬青原生质体产量与活力检测 | 第16页 |
| 2.3.4 蛋白亚细胞定位预测 | 第16-17页 |
| 2.3.5 植物瞬时表达载体的构建 | 第17-18页 |
| 2.3.6 重组表达载体质粒DNA的提取 | 第18-19页 |
| 2.3.7 质粒DNA导入拟南芥原生质体与荧光显微观察 | 第19页 |
| 2.3.8 质粒DNA导入沙冬青原生质体与荧光显微观察 | 第19-21页 |
| 3 结果与分析 | 第21-31页 |
| 3.1 蒙古沙冬青原生质体分离与转化技术的建立 | 第21-24页 |
| 3.1.1 酶解液中不同酶类浓度的确定 | 第21页 |
| 3.1.2 酶解液中渗透压稳定剂浓度的确定 | 第21-22页 |
| 3.1.3 酶解时间的确定 | 第22-23页 |
| 3.1.4 离心速度的选择 | 第23页 |
| 3.1.5 原生质体活力的检测 | 第23-24页 |
| 3.2 蒙古沙冬青抗逆相关基因植物瞬时表达载体的构建 | 第24-28页 |
| 3.2.1 目的基因片段的PCR扩增与测序验证 | 第24-26页 |
| 3.2.2 目的基因片段与瞬时表达载体的连接与鉴定 | 第26-28页 |
| 3.3 AmDREB1F、AmDREB2和AmCAT蛋白的亚细胞定位分析 | 第28-31页 |
| 3.3.1 三种蛋白亚细胞定位的生物信息学预测 | 第28页 |
| 3.3.2 利用拟南芥原生质体进行蛋白亚细胞定位分析 | 第28-29页 |
| 3.3.3 利用蒙古沙冬青原生质体进行蛋白亚细胞定位分析 | 第29-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 5 结论 | 第33-34页 |
| 致谢 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-39页 |
| 作者简介 | 第39页 |
