代谢工程改造大肠杆菌生产白藜芦醇
| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 白藜芦醇概述 | 第9-10页 |
| 1.1.1 白藜芦醇的理化性质 | 第9-10页 |
| 1.1.2 白藜芦醇的生理活性 | 第10页 |
| 1.2 白藜芦醇生产研究进展 | 第10-14页 |
| 1.2.1 白藜芦醇的化学合成生产 | 第10页 |
| 1.2.2 白藜芦醇的提取生产 | 第10-11页 |
| 1.2.3 白藜芦醇的植物细胞生产 | 第11页 |
| 1.2.4 白藜芦醇的微生物合成生产 | 第11-14页 |
| 1.3 白藜芦醇稳定性的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 立题依据及意义 | 第15页 |
| 1.5 本论文主要研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-26页 |
| 2.1 菌株与质粒 | 第17页 |
| 2.2 培养基 | 第17-18页 |
| 2.3 试剂与仪器 | 第18-19页 |
| 2.3.1 主要试剂 | 第18页 |
| 2.3.2 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.4 培养方法 | 第19-20页 |
| 2.5 分子生物学操作 | 第20-23页 |
| 2.5.1 DNA操作方法 | 第20页 |
| 2.5.2 白藜芦醇生产菌株的质粒构建 | 第20-21页 |
| 2.5.3 基因组整合菌株构建 | 第21-23页 |
| 2.5.4 Western Blot验证 | 第23页 |
| 2.6 白藜芦醇降解的检测 | 第23-24页 |
| 2.6.1 温度及pH对白藜芦醇降解的影响 | 第23-24页 |
| 2.6.2 不同培养基对白藜芦醇降解的影响 | 第24页 |
| 2.7 检测与分析方法 | 第24-26页 |
| 2.7.1 白藜芦醇的检测方法 | 第24页 |
| 2.7.2 对香豆酸的检测方法 | 第24页 |
| 2.7.3 酪氨酸的检测方法 | 第24-25页 |
| 2.7.4 白藜芦醇生产中副产物的检测方法 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-42页 |
| 3.1 产白藜芦醇大肠杆菌全质粒体系的构建 | 第26-30页 |
| 3.1.1 白藜芦醇中心代谢途径的构建 | 第26-28页 |
| 3.1.2 葡萄糖代谢途径的优化 | 第28-29页 |
| 3.1.3 丙二酰辅酶A代谢途径的优化 | 第29页 |
| 3.1.4 本节小结 | 第29-30页 |
| 3.2 基因组整合菌株的构建 | 第30-35页 |
| 3.2.1 酪氨酸缺陷型菌株的改造 | 第30-31页 |
| 3.2.2 白藜芦醇中心代谢途径的整合 | 第31-33页 |
| 3.2.3 白藜芦醇及其中间代谢产物的检测 | 第33-35页 |
| 3.2.4 本节小结 | 第35页 |
| 3.3 白藜芦醇的降解研究 | 第35-42页 |
| 3.3.1 温度对白藜芦醇降解的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.2 pH对白藜芦醇降解的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.3 不同的培养基成分对白藜芦醇降解的影响 | 第37-38页 |
| 3.3.4 大肠杆菌对白藜芦醇降解的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.5 白藜芦醇在培养基中所生成副产物的分析 | 第39-41页 |
| 3.3.6 本节小结 | 第41-42页 |
| 主要结论与展望 | 第42-45页 |
| 主要结论 | 第42-43页 |
| 展望 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |
