| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略表 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-21页 |
| ·芸苔属SI反应决定因子SRK与SCR相互作用研究进展 | 第11-14页 |
| ·芸薹属自交不亲和性的雌雄决定因子 | 第11-13页 |
| ·SRK与SCR相互作用研究及意义 | 第13-14页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第14-21页 |
| ·酵母双杂交系统及其研究进展 | 第14页 |
| ·酵母双杂交系统的基本原理 | 第14-15页 |
| ·酵母双杂交系统的特点 | 第15-16页 |
| ·酵母双杂交系统实验基本过程 | 第16-18页 |
| ·酵母双杂交系统的发展 | 第18-20页 |
| ·定位蛋白间发生相互作用所必需的结构域 | 第20-21页 |
| 2 绪论 | 第21-23页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| ·甘蓝SRK胞外结构域不同区段的系列pGADT7载体的构建及鉴定 | 第21页 |
| ·应用酵母双杂交体系研究甘蓝SRK的S域不同片段与SCR的不同片段间的相互作用及初步定位其作用区段 | 第21-22页 |
| ·研究技术路线 | 第22-23页 |
| 3 材料与方法 | 第23-31页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·菌株、载体及甘蓝叶片 | 第23页 |
| ·酶和试剂 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-31页 |
| ·甘蓝gDNA的提取 | 第23-24页 |
| ·SRK的S结构域和SCR编码基因的克隆 | 第24-28页 |
| ·表达载体pGADT7-eSRKs及钓饵载体pGBKT7-SCRs的构建与鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的提取 | 第29页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·酵母感受态细胞的转化 | 第29-30页 |
| ·钓饵蛋白毒性及其自激活检测 | 第30页 |
| ·eSRK与SCR相互作用分析 | 第30-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-49页 |
| ·ESRKs及SCRs的基因克隆及序列分析 | 第31-33页 |
| ·ESRKs系列PCR产物的克隆及鉴定 | 第33-34页 |
| ·甘蓝ESRK与SCR相互作用预测分析 | 第34-35页 |
| ·重组载体制备 | 第35-37页 |
| ·重组质粒PGADT7-ESRKs及PGBKT7-SCRs的构建及酶切鉴定 | 第37-39页 |
| ·质粒PGBKT7-SCRs钓饵蛋白毒性及其自激活检测分析 | 第39-41页 |
| ·酵母感受态细胞的转化 | 第41-42页 |
| ·融合表达分析 | 第42-43页 |
| ·甘蓝ESRK与SCR相互作用分析 | 第43-47页 |
| ·应用SD/-Trp-Leu检测甘蓝eSRK与SCR相互作用 | 第43-44页 |
| ·SD/-Trp-Leu平板单克隆阳性菌落PCR验证 | 第44-45页 |
| ·应用SD/-Ade-His-Trp-Leu/AbA检测甘蓝eSRK与SCR相互作用 | 第45页 |
| ·应用X-a-Gal显色反应验证eSRK与SCR相互作用 | 第45-46页 |
| ·应用SD/-Ade-His-Trp-Leu/X-a-Gal/AbA进一步验证eSRK与SCR相互作用 | 第46-47页 |
| ·酵母菌落统计分析 | 第47-49页 |
| 5 讨论与结论 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55-57页 |
| 在读期间(拟)发表的学术论文 | 第57-59页 |
| 在读期间参与的科研项目 | 第59页 |
