| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第11-34页 |
| 1.1 卵子发生和卵泡发育 | 第11-17页 |
| 1.1.1 概述 | 第11-12页 |
| 1.1.2 PGCs的迁徙和增殖 | 第12-13页 |
| 1.1.3 原始泡的形成和激活 | 第13-14页 |
| 1.1.4 卵泡发育 | 第14-16页 |
| 1.1.5 卵母细胞的成熟及排卵 | 第16-17页 |
| 1.2 卵泡闭锁与卵母细胞凋亡 | 第17-21页 |
| 1.2.1 活性氧(Reactive oxygen species) | 第17-21页 |
| 1.2.1.1 活性氧的产生及危害 | 第17-18页 |
| 1.2.1.2 非酶类抗氧化剂与卵泡发育 | 第18-19页 |
| 1.2.1.3 抗氧化酶与卵泡发育 | 第19-21页 |
| 1.2.2 卵母细胞-颗粒细胞连接 | 第21页 |
| 1.3 表观遗传调控与卵泡发育 | 第21-28页 |
| 1.3.1 概述 | 第21页 |
| 1.3.2 DNA甲基化 | 第21-22页 |
| 1.3.3 组蛋白甲基化 | 第22-23页 |
| 1.3.4 组蛋白磷酸化 | 第23页 |
| 1.3.5 非编码RNA | 第23-24页 |
| 1.3.6 蛋向质乙酰化 | 第24-28页 |
| 1.3.6.1 组蛋白乙酰化 | 第24-25页 |
| 1.3.6.2 组蛋白乙酰化与染色体的组装 | 第25-26页 |
| 1.3.6.3 组蛋白乙酰化与染色体的分离 | 第26页 |
| 1.3.6.4 组蛋白乙酰化与卵子发生和卵泡发育 | 第26-27页 |
| 1.3.6.5 非组蛋白乙酰化的功能 | 第27-28页 |
| 1.4 组蛋白乙酰化转移酶KAT8 | 第28-31页 |
| 1.4.1 概述 | 第28-29页 |
| 1.4.2 KAT8的调控机制 | 第29页 |
| 1.4.3 KAT8 (MOF)与基因转录调控 | 第29-30页 |
| 1.4.4 KAT8与DNA损伤应答及修复 | 第30页 |
| 1.4.5 KAT8与肿瘤 | 第30-31页 |
| 1.4.6 KAT8与细胞凋亡 | 第31页 |
| 1.4.7 KAT8与细胞代谢 | 第31页 |
| 1.5 条件性敲除小鼠 | 第31-32页 |
| 1.6 转录组测序 | 第32-33页 |
| 1.7 研究内容及意义 | 第33-34页 |
| 第2章 材料和方法 | 第34-57页 |
| 2.1 材料 | 第34-39页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第34页 |
| 2.1.2 试剂 | 第34-37页 |
| 2.1.3 实验耗材 | 第37-38页 |
| 2.1.4 仪器 | 第38-39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-57页 |
| 2.2.1 卵母细胞及颗粒细胞的分离 | 第39-40页 |
| 2.2.1.1 减数分裂不完全卵母细胞的分离 | 第39页 |
| 2.2.1.2 GV期小鼠卵母细胞及颗粒细胞的分离 | 第39页 |
| 2.2.1.3 GVBD-MI期小鼠卵母细胞的分离 | 第39-40页 |
| 2.2.1.4 MII期小鼠卵母细胞的分离 | 第40页 |
| 2.2.2 卵母细胞RNA提取、反转录及cDNA合成 | 第40-41页 |
| 2.2.2.1 卵母细胞RNA提取 | 第40-41页 |
| 2.2.2.2 反转录及cDNA合成 | 第41页 |
| 2.2.3 反转录PCR (Reverse Transcription,RT-PCR) | 第41-42页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR (Real-time PCR) | 第42-43页 |
| 2.2.5 卵母细胞免疫荧光染色 | 第43-44页 |
| 2.2.6 小鼠基因型鉴定 | 第44-46页 |
| 2.2.7 小鼠生育力检测 | 第46页 |
| 2.2.8 Western Blot | 第46-48页 |
| 2.2.9 卵巢组织包埋及切片 | 第48页 |
| 2.2.10 卵巢石蜡切片PAS-苏木精染色 | 第48-49页 |
| 2.2.11 TUNEL染色 | 第49-50页 |
| 2.2.12 卵巢石蜡切片免疫组织化学染色 | 第50-51页 |
| 2.2.13 BrdU染色 | 第51页 |
| 2.2.14 卵巢石蜡切片免疫荧光染色 | 第51页 |
| 2.2.15 卵巢冰冻切片免疫荧光 | 第51-52页 |
| 2.2.16 卵母细胞转录组测序 | 第52页 |
| 2.2.17 卵母细胞活性氧检测 | 第52-53页 |
| 2.2.18 N-乙酰半胱氨酸(NAC)注射 | 第53页 |
| 2.2.19 免疫染色质共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP) | 第53-56页 |
| 2.2.20 数据统计 | 第56-57页 |
| 第3章 结果和讨论 | 第57-79页 |
| 3.1 结果 | 第57-76页 |
| 3.1.1 Kat8在小鼠卵巢中的表达和定位 | 第57-58页 |
| 3.1.2 卵母细胞敲除Kat8导致小鼠不育以及卵子发生异常 | 第58-61页 |
| 3.1.3 卵母细胞敲除Kat8抑制卵泡发育并导致卵母细胞凋亡 | 第61-63页 |
| 3.1.4 卵母细胞敲除Kat8不影响颗粒细胞的增殖 | 第63-65页 |
| 3.1.5 Kat8影响卵母细胞H4K16的乙酰化及异染色质形态 | 第65-68页 |
| 3.1.6 Kat8影响小鼠卵母细胞基因的正常表达 | 第68-70页 |
| 3.1.7 卵母细胞敲除Kat8导致细胞活性氧水平升高 | 第70-71页 |
| 3.1.8 N-乙酰半胱氨酸能够回复Kat8~(Gdf9)cKO小鼠表型 | 第71-74页 |
| 3.1.9 KAT8直接调控抗氧化基因的表达 | 第74-75页 |
| 3.1.10 颗粒细胞敲除Kat8不影响小鼠生育力 | 第75-76页 |
| 3.2 讨论 | 第76-79页 |
| 参考文献 | 第79-93页 |
| 附录一: 参加会议情况 | 第93-94页 |
| 附录二: 在读期间发表的学术论文 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
