| 摘要 | 第10-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 缩略词表 | 第17-18页 |
| 前言 | 第18-21页 |
| 1 研究背景 | 第18页 |
| 2 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 3 研究内容及技术路线 | 第19-21页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-41页 |
| 第一节 小麦田杂草发生及防除 | 第21-25页 |
| 1 小麦生产概况 | 第21-22页 |
| 2 小麦田杂草发生情况 | 第22-23页 |
| 3 小麦田杂草的化学防除现状 | 第23-25页 |
| 第二节 日本看麦娘研究现状 | 第25-27页 |
| 1 日本看麦娘的生物学及生态学特性 | 第25页 |
| 2 日本看麦娘的发生及危害 | 第25-26页 |
| 3 日本看麦娘的抗药性现状 | 第26-27页 |
| 第三节 乙酰辅酶A羧化酶抑制剂的抗药性研究现状 | 第27-41页 |
| 1 乙酰辅酶A羧化酶的结构与功能 | 第27-28页 |
| 2 乙酰辅酶A羧化酶抑制剂的作用机制及其应用 | 第28-32页 |
| 3 乙酰辅酶A羧化酶抑制剂的抗药性概况 | 第32-33页 |
| 4 乙酰辅酶A羧化酶抑制剂的抗药性机理 | 第33-38页 |
| 4.1 靶标抗性机理 | 第34-37页 |
| 4.2 非靶标抗性机理 | 第37-38页 |
| 5 乙酰辅酶A羧化酶抑制剂的交互抗性 | 第38-39页 |
| 6 乙酰辅酶A羧化酶抗性突变的分子检测方法 | 第39-41页 |
| 第二章 日本看麦娘对精噁唑禾草灵的抗药性检定 | 第41-53页 |
| 1 材料与方法 | 第42-47页 |
| 1.1 供试材料 | 第42-44页 |
| 1.1.1 供试种子 | 第42-43页 |
| 1.1.2 供试药剂 | 第43-44页 |
| 1.2 试验方法 | 第44-46页 |
| 1.2.1 不同日本看麦娘种群对精噁唑禾草灵的敏感性研究 | 第44-45页 |
| 1.2.2 抗精噁唑禾草灵日本看麦娘种群的交互抗性研究 | 第45页 |
| 1.2.3 抗精噁唑禾草灵日本看麦娘种群的多抗性研究 | 第45-46页 |
| 1.3 数据处理 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-51页 |
| 2.1 不同日本看麦娘种群对精噁唑禾草灵的敏感性 | 第47-49页 |
| 2.1.1 种子生物测定法测定不同日本看麦娘种群对精噁唑禾草灵的敏感性 | 第47页 |
| 2.1.2 整株生物测定法测定不同日本看麦娘种群对精噁唑禾草灵的敏感性 | 第47-49页 |
| 2.2 抗精噁唑禾草灵日本看麦娘种群的交互抗性 | 第49-50页 |
| 2.3 抗精噁唑禾草灵日本看麦娘种群的多抗性 | 第50-51页 |
| 3 讨论与结论 | 第51-53页 |
| 第三章 日本看麦娘乙酰辅酶A羧化酶的基因克隆及序列分析 | 第53-77页 |
| 第一节 日本看麦娘的倍性鉴定 | 第54-58页 |
| 1 材料与方法 | 第54-56页 |
| 1.1 供试材料 | 第54-55页 |
| 1.1.1 供试杂草 | 第54页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第54-55页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第55页 |
| 1.2 试验方法 | 第55-56页 |
| 1.2.1 染色体计数法 | 第55页 |
| 1.2.2 流式细胞术 | 第55-56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-57页 |
| 2.1 染色体计数法对日本看麦娘倍性的鉴定 | 第56-57页 |
| 2.2 流式细胞术对日本看麦娘倍性的鉴定 | 第57页 |
| 3 讨论与结论 | 第57-58页 |
| 第二节 日本看麦娘ACCase的基因克隆 | 第58-71页 |
| 1 材料与方法 | 第58-66页 |
| 1.1 供试材料 | 第58-59页 |
| 1.1.1 供试杂草 | 第58页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第58-59页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第59页 |
| 1.2 试验方法 | 第59-66页 |
| 1.2.1 植株培养 | 第59页 |
| 1.2.2 总DNA的提取 | 第59-60页 |
| 1.2.3 总RNA的提取 | 第60-61页 |
| 1.2.4 cDNA第一链的合成 | 第61页 |
| 1.2.5 引物设计 | 第61-62页 |
| 1.2.6 PCR反应 | 第62页 |
| 1.2.7 PCR产物的回收纯化 | 第62-63页 |
| 1.2.8 回收产物的克隆及测序 | 第63-64页 |
| 1.2.9 ACCase基因的系统发育分析 | 第64页 |
| 1.2.10 Southem杂交 | 第64-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-70页 |
| 2.1 日本看麦娘ACCase CT区的基因克隆 | 第66-68页 |
| 2.2 日本看麦娘ACCase基因的系统发育分析 | 第68-69页 |
| 2.3 Southem杂交对ACCase基因拷贝数的验证 | 第69-70页 |
| 3 讨论与结论 | 第70-71页 |
| 第三节 不同抗性日本看麦娘种群ACCase的基因序列分析 | 第71-77页 |
| 1 材料与方法 | 第71-72页 |
| 1.1 供试材料 | 第71-72页 |
| 1.1.1 供试杂草 | 第71-72页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第72页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第72页 |
| 1.2 试验方法 | 第72页 |
| 1.2.1 植株培养 | 第72页 |
| 1.2.2 不同抗性日本看麦娘种群ACCase CT区的基因克隆及分析 | 第72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-74页 |
| 3 讨论与结论 | 第74-77页 |
| 第四章 乙酰辅酶A羧化酶1999位氨基酸突变日本看麦娘的抗药性研究 | 第77-107页 |
| 第一节 ACCase 1999位氨基酸突变日本看麦娘的交互抗性研究 | 第78-86页 |
| 1 材料与方法 | 第78-82页 |
| 1.1 供试材料 | 第78-79页 |
| 1.1.1 供试杂草 | 第78页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第78-79页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第79页 |
| 1.2 试验方法 | 第79-82页 |
| 1.2.1 植株培养及处理 | 第79-80页 |
| 1.2.2 总DNA的提取 | 第80页 |
| 1.2.3 引物及内切酶设计 | 第80-81页 |
| 1.2.4 PCR反应 | 第81-82页 |
| 1.2.5 酶切反应 | 第82页 |
| 1.2.6 扩增产物的电泳检测 | 第82页 |
| 2 结果与分析 | 第82-85页 |
| 2.1 W1999C和W1999L突变检测方法的确立 | 第82-83页 |
| 2.2 W1999C和W1999L突变导致的交互抗性 | 第83-85页 |
| 3 讨论与结论 | 第85-86页 |
| 第二节 ACCase 1999位氨基酸突变日本看麦娘ACCase的活性研究 | 第86-90页 |
| 1 材料与方法 | 第86-89页 |
| 1.1 供试材料 | 第86-87页 |
| 1.1.1 供试杂草 | 第86页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第86-87页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第87页 |
| 1.2 试验方法 | 第87-89页 |
| 1.2.1 植株培养 | 第87-88页 |
| 1.2.2 ACCase的提取 | 第88页 |
| 1.2.3 ACCase活性的测定 | 第88-89页 |
| 1.2.4 数据处理 | 第89页 |
| 2 结果与分析 | 第89-90页 |
| 3 讨论与结论 | 第90页 |
| 第三节 ACCase 1999位氨基酸突变日本看麦娘ACCase的基因表达量研究 | 第90-107页 |
| 1 材料与方法 | 第90-96页 |
| 1.1 供试材料 | 第90-91页 |
| 1.1.1 供试杂草 | 第90-91页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第91页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第91页 |
| 1.2 试验方法 | 第91-96页 |
| 1.2.1 植株培养 | 第91-92页 |
| 1.2.2 总RNA的提取 | 第92页 |
| 1.2.3 gDNA的去除及cDNA第一链的合成 | 第92页 |
| 1.2.4 引物设计 | 第92-94页 |
| 1.2.5 RT-PCR反应 | 第94页 |
| 1.2.6 PCR产物的回收纯化、克隆及测序 | 第94页 |
| 1.2.7 qPCR反应 | 第94页 |
| 1.2.8 扩增效率分析 | 第94页 |
| 1.2.9 ACCase的基因表达量分析 | 第94-95页 |
| 1.2.10 数据处理 | 第95-96页 |
| 2 结果与分析 | 第96-105页 |
| 2.1 内参基因的特异性及其扩增效率 | 第96-98页 |
| 2.2 内参基因的表达水平 | 第98页 |
| 2.3 内参基因表达的稳定性 | 第98-103页 |
| 2.4 日本看麦娘ACCase基因的表达量 | 第103-105页 |
| 3 讨论与结论 | 第105-107页 |
| 第五章 日本看麦娘乙酰辅酶A羧化酶抗性突变分子检测方法研究 | 第107-117页 |
| 第一节 dCAPS分子检测方法的建立 | 第108-114页 |
| 1 材料与方法 | 第108-111页 |
| 1.1 供试材料 | 第108页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第108页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第108页 |
| 1.2 试验方法 | 第108-111页 |
| 1.2.1 总DNA的提取 | 第108-109页 |
| 1.2.2 引物及内切酶设计 | 第109-110页 |
| 1.2.3 PCR反应 | 第110页 |
| 1.2.4 酶切反应 | 第110页 |
| 1.2.5 扩增产物的电泳检测 | 第110-111页 |
| 2 结果与分析 | 第111-113页 |
| 3 讨论与结论 | 第113-114页 |
| 第二节 dCAPS方法对抗性种群突变的检测 | 第114-117页 |
| 1 材料与方法 | 第114页 |
| 1.1 供试材料 | 第114页 |
| 1.1.1 供试杂草 | 第114页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第114页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第114页 |
| 1.2 试验方法 | 第114页 |
| 1.2.1 植株培养 | 第114页 |
| 1.2.2 dCAPS的检测 | 第114页 |
| 2 结果与分析 | 第114-115页 |
| 3 讨论与结论 | 第115-117页 |
| 全文讨论 | 第117-123页 |
| 1 杂草抗药性的发生与发展 | 第117页 |
| 2 日本看麦娘对精噁唑禾草灵的抗药性 | 第117-118页 |
| 3 日本看麦娘对精噁唑禾草灵的靶标抗性机理 | 第118-121页 |
| 4 抗性突变的分子检测 | 第121-123页 |
| 全文结论 | 第123-125页 |
| 本文创新点与不足之处 | 第125-127页 |
| 参考文献 | 第127-139页 |
| 附录 | 第139-141页 |
| 致谢 | 第141-143页 |
| 攻读学位期间发表的论文目录 | 第143页 |
