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DNA甲基化在二斑叶螨个体发育及其两种色型差异中的作用研究

摘要第7-10页
ABSTRACT第10-13页
第一章 文献综述第14-38页
    1. 表观遗传学第14-16页
        1.1 表观遗传学的概念第14-15页
        1.2 表观遗传学调控的研究内容第15-16页
    2. DNA甲基化作用第16-24页
        2.1 DNA甲基化作用的概念第16-17页
        2.2 DNA甲基化分布模式与基因调控第17-20页
        2.3 DNA甲基化水平的常规检测第20-23页
        2.4 DNA甲基化抑制剂第23-24页
    3. DNA C5-胞嘧啶甲基化转移酶(DNA nucleotide methyltransferase,Dnmt)第24-30页
        3.1 Dnmts的分子结构第24-25页
        3.2 Dnmts在不同生物中的存在情况第25-27页
        3.3 Dnmts的生物学功能研究第27-30页
    4. 转录组测序(RNA-sequencing)研究基因表达与DNA甲基化的关系第30-32页
    5. 二斑叶螨红色型与绿色型的概述第32-38页
        5.1 二斑叶螨红色型与绿色型的生物学特征第32-33页
        5.2 二斑叶螨红色型与绿色型的危害第33-34页
        5.3 二斑叶螨红色型与绿色型的分类地位的研究第34-38页
第二章 二斑叶螨中甲基化转移酶3 (Tudnmt3)基因的克隆与基因结构的生物信息学分析第38-52页
    1. 材料与方法第39-45页
        1.1 供试材料的采集与鉴定第39页
        1.2 供试材料的饲养第39-40页
        1.3 供试材料的收集第40页
        1.4 二斑叶螨的甲基化转移酶3(Tudnmt3)基因的克隆第40-44页
        1.5 二斑叶螨的Tudnmt3基因的生物学信息分析第44-45页
    2. 结果与分析第45-50页
        2.1 二斑叶螨RNA质检结果第45-46页
        2.2 二斑叶螨的Tudnmt3基因克隆结果第46页
        2.3 二斑叶螨的Tudnmt3基因初级结构的分析结果第46-48页
        2.4 二斑叶螨的TuDNMT3蛋白二级与三级结构预测结果第48-50页
    3. 讨论第50-52页
第三章 二斑叶螨的雌雄不同发育时期中甲基化转移酶3 (Tudnmt3)基因的表达量研究第52-82页
    1. 材料与方法第53-65页
        1.1 供试材料第53页
        1.2 供试材料不同发育时期的样品收集第53-54页
        1.3 叶螨总DNA与RNA的提取第54-55页
        1.4 cDNA的合成第55-56页
        1.5 SYBR Green荧光定量PCR检测第56-57页
        1.6 RNA整体原位杂交第57-61页
        1.7 MSAP分析第61-65页
        1.8 数据处理与分析第65页
    2. 结果与分析第65-79页
        2.1 DNA与RNA质检结果第65-66页
        2.2 内参基因的稳定性检测结果第66页
        2.3 标准曲线的制作结果第66-67页
        2.4 二斑叶螨雌雄螨不同发育阶段中Tudnmt3表达量的结果第67-68页
        2.5 二斑叶螨雌雄成螨中Tudnmt3基因原位杂交结果第68-70页
        2.6 二斑叶螨雌雄成螨中DNA甲基化水平与模式的分析结果第70-79页
    3. 讨论第79-82页
第四章 二斑叶螨雌雄成螨中甲基化转移酶3蛋白(TuDNMT3)的表达水平分析第82-96页
    1. 材料与方法第83-90页
        1.1 供试材料第83页
        1.2 雌雄成螨的收集第83页
        1.3 多肽抗体的合成第83-85页
        1.4 Western blot检测第85-89页
        1.5 免疫荧光检测第89-90页
        1.6 数据处理与分析第90页
    2. 结果与分析第90-94页
        2.1 多克隆抗体效价第90-91页
        2.2 Western blot检测二斑叶螨雌雄成螨中TuDNMT3蛋白的表达量结果第91-92页
        2.3 甲基化转移酶3蛋白在雌雄叶螨体内的分布及定位第92-94页
    3. 讨论第94-96页
第五章 二斑叶螨红色型与绿色型不同发育时期中甲基化转移酶3(Tudnmt3)基因的表达量研究第96-102页
    1. 材料与方法第97-98页
        1.1 供试材料第97-98页
        1.2 叶螨的收集第98页
        1.3 叶螨总RNA的提取第98页
        1.4 cDNA的合成第98页
        1.5 SYBR Green荧光定量PCR检测第98页
        1.6 相对表达量的数据分析第98页
    2. 结果与分析第98-100页
        2.1 二斑叶螨红色型与绿色型中Tudnmt3扩增片段的结果第98-99页
        2.2 二斑叶螨红色型与绿色型不同发育阶段中Tudnmt3的相对表达量第99-100页
        2.3 二斑叶螨红色型与绿色型不同日龄的成螨中Tudnmt3的相对表达量第100页
    3. 讨论第100-102页
第六章 二斑叶螨红色型与绿色型差异表达的色素基因与DNA甲基化的关系第102-134页
    1. 材料与方法第104-113页
        1.1 供试材料第104页
        1.2 供试材料的收集第104页
        1.3 叶螨总RNA的提取与质检第104页
        1.4 转录组测序、拼接与注释第104-106页
        1.5 基因的表达量计算及差异分析第106-107页
        1.6 差异表达的功能富集分析第107页
        1.7 参考转录组中色素基因的鉴定第107页
        1.8 转录组数据的qRT-PCR验证第107-110页
        1.9 亚硫酸氢盐PCR检测基因的甲基化水平第110-111页
        1.10 DNA甲基化抑制剂的处理第111-113页
    2. 结果与分析第113-130页
        2.1 二斑叶螨红色型与绿色型总RNA质量检测第113页
        2.2 测序数据质量评估的结果第113-115页
        2.3 转录组数据结果统计第115-116页
        2.4 基因的注释结果第116-118页
        2.5 基因表达水平的分析结果第118-119页
        2.6 二斑叶螨红色型与绿色型中的差异表达基因情况第119-120页
        2.7 差异表达基因的GO富集结果第120-121页
        2.8 侯选的色素基因第121-123页
        2.9 色素基因的定量验证结果第123-124页
        2.10 二斑叶螨红、绿色型体色变化阶段中色素基因表达水平的检测第124-126页
        2.11 差异表达的色素基因的甲基化水平检测第126-129页
        2.12 5-AZA处理后基因表达量变化的结果第129-130页
    3. 讨论第130-134页
全文总结第134-136页
参考文献第136-156页
附录第156-162页
在读期间论文发表及奖励情况第162-164页
致谢第164页

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