| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 毕赤酵母表达系统 | 第11-15页 |
| 1.1.1 毕赤酵母应用发展历程 | 第11页 |
| 1.1.2 毕赤酵母表达载体 | 第11-12页 |
| 1.1.3 毕赤酵母表达启动子 | 第12-13页 |
| 1.1.4 常用毕赤酵母宿主菌株 | 第13页 |
| 1.1.5 毕赤酵母的外源蛋白表达 | 第13-14页 |
| 1.1.6 外源蛋白表达导致的代谢压力 | 第14-15页 |
| 1.1.7 碳源对毕赤酵母外源蛋白表达的影响 | 第15页 |
| 1.2 ~(13)C代谢流分析技术 | 第15-18页 |
| 1.2.1 基于~(13)C代谢流分析技术原理 | 第16页 |
| 1.2.2 基于同位素非稳态的~(13)C代谢流分析技术 | 第16-18页 |
| 1.3 基于~(13)C标记的代谢流分析技术在代谢瓶颈鉴别中的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 课题背景,目的及研究意义 | 第19-20页 |
| 第2章 谷氨酸对毕赤酵母发酵宏观代谢影响 | 第20-33页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 材料和方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 实验菌株 | 第20页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第20-22页 |
| 2.2.3 培养基配方与溶液 | 第22-23页 |
| 2.2.4 分析和测定方法 | 第23-26页 |
| 2.2.5 毕赤酵母培养 | 第26页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第26-31页 |
| 2.3.1 谷氨酸添加对产物表达水平的影响 | 第26-28页 |
| 2.3.2 谷氨酸添加对底物消耗的影响 | 第28-29页 |
| 2.3.3 谷氨酸添加对毕赤酵母生长的影响 | 第29-30页 |
| 2.3.4 谷氨酸添加对细胞呼吸代谢的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.5 产物与菌体的得率系数 | 第31页 |
| 2.4 本章小结 | 第31-33页 |
| 第3章 谷氨酸对毕赤酵母发酵微观代谢影响 | 第33-56页 |
| 3.1 引言 | 第33-34页 |
| 3.2 材料与方法 | 第34-40页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第34页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第34页 |
| 3.2.3 药品与试剂 | 第34-36页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第36-40页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第40-55页 |
| 3.3.1 代谢网络构建 | 第40-42页 |
| 3.3.2 同位素丰度变化 | 第42-47页 |
| 3.3.3 胞内代谢物组学分析 | 第47-52页 |
| 3.3.4 非稳态~(13)C代谢流分析 | 第52-55页 |
| 3.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第4章 能量与辅因子状态以及胞内调控机制 | 第56-65页 |
| 4.1 引言 | 第56页 |
| 4.2 材料与方法 | 第56-59页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第56页 |
| 4.2.2 药品与试剂 | 第56-57页 |
| 4.2.3 分析与测定方法 | 第57-59页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第59-64页 |
| 4.4.1 胞内NADPH代谢 | 第59-60页 |
| 4.4.2 胞内NADH代谢 | 第60-61页 |
| 4.4.3 胞内ATP代谢 | 第61-63页 |
| 4.4.4 谷氨酸添加后毕赤酵母胞内代谢调控机理 | 第63-64页 |
| 4.5 本章小结 | 第64-65页 |
| 第5章 结论与展望 | 第65-67页 |
| 5.1 结论 | 第65-66页 |
| 5.2 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-77页 |