| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第10-17页 |
| 1.1 辣椒白绢病病原菌背景 | 第10-12页 |
| 1.1.1 病原菌的形态特征 | 第10-11页 |
| 1.1.2 寄主和症状表现 | 第11页 |
| 1.1.3 生长环境 | 第11-12页 |
| 1.1.4 白绢病的分布和防治 | 第12页 |
| 1.1.5 主要的防治方法 | 第12页 |
| 1.2 钩状木霉的研究背景 | 第12-15页 |
| 1.2.0 木霉属的概况 | 第13页 |
| 1.2.1 木霉属的生物防治机制 | 第13-14页 |
| 1.2.2 木霉的重寄生作用和生防基因 | 第14-15页 |
| 1.3 研究的意义 | 第15-16页 |
| 1.4 研究的技术路线 | 第16-17页 |
| 第二章 钩状木霉中重要酶活的测定与分析 | 第17-27页 |
| 2.1 材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 菌种 | 第17页 |
| 2.1.2 培养基的配置 | 第17页 |
| 2.1.3 实验所用主要试剂配制 | 第17-18页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第18页 |
| 2.2 方法 | 第18-21页 |
| 2.2.1 钩状木霉和致病菌活化和培养 | 第18页 |
| 2.2.2 制备白绢病致病菌细胞壁 | 第18-19页 |
| 2.2.3 制备诱导培养基诱导酶活表达 | 第19页 |
| 2.2.4 DNS法测量样本中几丁质酶、β-1,3葡聚糖酶酶活力 | 第19-20页 |
| 2.2.5 Folin酚试剂法检测碱性蛋白酶的酶活力 | 第20-21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-25页 |
| 2.3.1 标准曲线的制作 | 第21-23页 |
| 2.3.2 几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶和碱性蛋白酶酶活力测定结果统计和趋势分析 | 第23-24页 |
| 2.3.3 SPSS数据分析软件分析各组酶活数据和抑菌率关系显著性 | 第24-25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 chit42和prb1基因的编码序列的克隆和chit42表达量分析 | 第27-42页 |
| 3.1 材料 | 第27页 |
| 3.1.1 研究使用的菌株 | 第27页 |
| 3.1.2 培养基 | 第27页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第27页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-32页 |
| 3.2.1 SDS法提取Th13总DNA | 第27-28页 |
| 3.2.2 Trizol法提取Th13中总mRNA | 第28-29页 |
| 3.2.3 引物设计 | 第29页 |
| 3.2.4 PCR扩增Th13几丁质酶chit42和碱性蛋白酶prb1的CDS片段 | 第29-30页 |
| 3.2.5 Th13几丁质酶chit42和碱性蛋白酶prb1的cDNA片段扩增 | 第30-31页 |
| 3.2.6 PCR产物切胶回收 | 第31-32页 |
| 3.2.7 基因片段比对及其编码氨基酸序列生物信息学分析 | 第32页 |
| 3.2.8 Trizol法提取钩状木霉中的RNA合成cDNA第一链 | 第32页 |
| 3.2.9 RT-PCR半定量检测钩状木霉中chit42基因表达量 | 第32页 |
| 3.3 结果与分析 | 第32-41页 |
| 3.3.1 Th13总mRNA提取琼脂糖凝胶电泳检测结果 | 第33页 |
| 3.3.2 PCR和RT-PCR产物琼脂糖电泳检测 | 第33-34页 |
| 3.3.3 扩增得到的DNA序列BLAST在线比对分析 | 第34-36页 |
| 3.3.4 cDNA和DNA克隆序列比对分析 | 第36-37页 |
| 3.3.5 氨基酸一级结构分析 | 第37-38页 |
| 3.3.6 氨基酸保守区结构域分析 | 第38-39页 |
| 3.3.7 蛋白质的二级结构和三级结构预测 | 第39-40页 |
| 3.3.8 RT-PCR反应的条件 | 第40页 |
| 3.3.9 半定量PCR检测诱导几丁质酶基因表达量电泳检测 | 第40-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 上游调控序列克隆和比对分析 | 第42-48页 |
| 4.1 材料 | 第42页 |
| 4.1.1 菌种 | 第42页 |
| 4.1.2 培养基的配置 | 第42页 |
| 4.1.3 试剂 | 第42页 |
| 4.2 方法 | 第42-43页 |
| 4.2.1 染色体步移技术延伸克隆chit42基因上游序列 | 第42-43页 |
| 4.2.2 Genome walking反应和琼脂糖凝胶电泳检测 | 第43页 |
| 4.2.3 目的片段回收纯化、测序和拼接 | 第43页 |
| 4.2.4 拼接片段序列用在线软件对调控元件进行分析 | 第43页 |
| 4.3 结果与分析 | 第43-47页 |
| 4.3.1 琼脂糖凝胶电泳检测条带 | 第43-44页 |
| 4.3.2 拼接片段在线序列比对 | 第44-45页 |
| 4.3.3 上游调控序列的分析 | 第45-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 总结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 作者简介 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
