| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略语表 | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1.1 植物转化外源基因常用方法 | 第12-17页 |
| 1.1.1 化学诱导法 | 第12-13页 |
| 1.1.2 物理诱导法 | 第13-15页 |
| 1.1.3 生物载体转化法 | 第15-17页 |
| 1.2 转基因技术在棉花中的应用 | 第17-21页 |
| 1.2.1 抗虫棉 | 第18-19页 |
| 1.2.2 耐除草剂棉 | 第19页 |
| 1.2.3 抗病棉 | 第19页 |
| 1.2.4 抗逆性棉 | 第19-20页 |
| 1.2.5 纤维品质改良棉 | 第20-21页 |
| 1.3 棉花转基因常用方法及影响因素 | 第21-24页 |
| 1.4 蔗糖合成酶研究进展 | 第24-25页 |
| 1.5 本课题研究的目的及意义 | 第25-26页 |
| 第2章 AtSUS3基因的克隆及载体构建 | 第26-40页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第26-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 载体和菌种 | 第26页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.1.4 主要生化试剂 | 第27页 |
| 2.1.5 抗生素和植物激素 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-35页 |
| 2.2.1 拟南芥总RNA提取 | 第28页 |
| 2.2.2 gDNA的去除及逆转录反应 | 第28-30页 |
| 2.2.3 AtSUS3的克隆 | 第30-31页 |
| 2.2.4 目的片段的回收与纯化 | 第31页 |
| 2.2.5 克隆反应体系的连接转化 | 第31页 |
| 2.2.6 质粒提取 | 第31-32页 |
| 2.2.7 生物信息学分析 | 第32页 |
| 2.2.8 双元表达载体pBI121-AtSUS3构建 | 第32-35页 |
| 2.3 结果与分析 | 第35-39页 |
| 2.3.1 拟南芥总RNA提取 | 第35-36页 |
| 2.3.2 AtSUS3扩增及序列分析 | 第36-37页 |
| 2.3.3 pBI121-AtSUS3表达载体构建 | 第37-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 第3章 转AtSUS3基因棉花的获得及鉴定 | 第40-57页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第40-41页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第40页 |
| 3.1.2 菌种 | 第40页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第40页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第40-41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-46页 |
| 3.2.1 农杆菌LBA4404感受态的制备 | 第41页 |
| 3.2.2 表达载体转化农杆菌LBA4404 | 第41-42页 |
| 3.2.3 AtSUS3基因对棉花的转化 | 第42页 |
| 3.2.4 嫁接技术 | 第42-43页 |
| 3.2.5 转基因棉苗的抗性鉴定 | 第43页 |
| 3.2.6 转基因棉花幼苗DNA提取 | 第43-44页 |
| 3.2.7 转基因棉苗PCR检测 | 第44页 |
| 3.2.8 AtSUS3在转录水平的检测 | 第44-45页 |
| 3.2.9 转AtSUS3棉花相关酶含量,酶活力检测 | 第45-46页 |
| 3.3 结果与分析 | 第46-54页 |
| 3.3.1 pBI121-AtSUS3表达载体转化农杆菌 | 第46页 |
| 3.3.2 嫁接实验 | 第46-49页 |
| 3.3.3 AtSUS3基因对棉花的转化及筛选 | 第49页 |
| 3.3.4 再生棉花植株的鉴定 | 第49-51页 |
| 3.3.5 转基因棉中AtSUS3转录水平表达量的检测 | 第51-52页 |
| 3.3.6 转AtSUS3基因植株相关酶活性分析 | 第52-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-57页 |
| 第4章 利用棉花活体胚转化外源基因 | 第57-71页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第57页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第57页 |
| 4.1.2 载体和菌种 | 第57页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第57页 |
| 4.1.4 生化试剂 | 第57页 |
| 4.1.5 抗生素和植物激素 | 第57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-60页 |
| 4.2.1 菌种培养及转化液制备 | 第57-58页 |
| 4.2.2 以棉花幼胚为受体的转化体系 | 第58页 |
| 4.2.3 转GFP棉的鉴定 | 第58-60页 |
| 4.2.4 利用胚转化法转化AtSUS3 | 第60页 |
| 4.3 结果与分析 | 第60-68页 |
| 4.3.1 转化体系的建立及优化 | 第60-64页 |
| 4.3.2 通过胚转化法的棉苗遗传转化过程 | 第64-65页 |
| 4.3.3 嫁接成活棉花鉴定 | 第65-66页 |
| 4.3.4 胚转化法转化AtSUS3棉检测 | 第66-68页 |
| 4.4 讨论 | 第68-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第88页 |
