| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-24页 |
| ·模式动物斑马鱼概述 | 第9-10页 |
| ·斑马鱼作为模式动物的优点及研究现状 | 第9页 |
| ·斑马鱼早期胚胎发育 | 第9-10页 |
| ·斑马鱼心脏发育简述 | 第10-12页 |
| ·Sox9在发育中的作用 | 第12-18页 |
| ·斑马鱼sox9a和sox9b是哺乳动物Sox9的同源基因 | 第13-14页 |
| ·sox9在骨骼发育中的作用 | 第14-15页 |
| ·sox9在性别发育中的作用 | 第15-16页 |
| ·sox9在胰管发育中的作用 | 第16-17页 |
| ·sox9在心脏发育中的作用 | 第17-18页 |
| ·sox9在其他组织发育中的作用 | 第18页 |
| ·SOX9与人类疾病 | 第18-20页 |
| ·CRISPR-Cas9技术及在斑马鱼上的应用 | 第20-22页 |
| ·KCNJ2 基因的功能及研究进展 | 第22页 |
| ·立题意义和主要研究内容 | 第22-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-53页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·实验仪器及来源 | 第24-25页 |
| ·实验试剂及来源 | 第25-26页 |
| ·缓冲液与常用试剂的配制 | 第26-28页 |
| ·核酸琼脂糖凝胶电泳溶液 | 第26页 |
| ·蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳溶液 | 第26页 |
| ·细菌培养基及抗生素 | 第26页 |
| ·Inoue法制备超级感受态细胞相关溶液 | 第26页 |
| ·原位杂交相关溶液 | 第26-27页 |
| ·冰冻切片相关溶液 | 第27页 |
| ·其他溶液 | 第27-28页 |
| ·引物设计及合成 | 第28-29页 |
| ·实验设计与方法 | 第29-53页 |
| ·斑马鱼的交配与胚胎的收集 | 第29页 |
| ·斑马鱼基因组DNA的提取 | 第29页 |
| ·斑马鱼总RNA的提取 | 第29-30页 |
| ·RNA反转录制备cDNA模板 | 第30-31页 |
| ·聚合酶链式反应（PCR）与琼脂糖凝胶电泳 | 第31-33页 |
| ·限制性内切酶消化反应 | 第33页 |
| ·DNA片段的回收连接及转化 | 第33-35页 |
| ·重组质粒的鉴定与提取 | 第35页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定与测序 | 第35-36页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
| ·mRNA的体外转录 | 第37-39页 |
| ·原位杂交 | 第39-42页 |
| ·细胞培养与转染 | 第42-43页 |
| ·CRISPR-Cas9构建斑马鱼sox9b突变体 | 第43-47页 |
| ·胚胎冰冻切片及HE染色 | 第47页 |
| ·Western Blot | 第47-49页 |
| ·Ch IP（Millipore Cat.#17-295） | 第49-51页 |
| ·o-dianisidine染色 | 第51页 |
| ·转录组测序 | 第51-52页 |
| ·数据统计分析 | 第52-53页 |
| 第三章 结果 | 第53-80页 |
| ·用CRISPR-Cas9技术构建斑马鱼sox9b基因靶向敲除突变体 | 第53-54页 |
| ·斑马鱼sox9b缺失对个体发育的影响 | 第54-56页 |
| ·sox9b缺失对心脏发育及功能的影响 | 第56-62页 |
| ·采用高通量测序技术对斑马鱼sox9b突变体进行基因表达分析 | 第62-65页 |
| ·kcnj2a基因在斑马鱼中的表达分析 | 第65-68页 |
| ·Sox9b对kcnj2a基因表达的调控研究 | 第68-71页 |
| ·斑马鱼kcnj2a基因的过表达与敲降对心脏发育的影响 | 第71-77页 |
| ·斑马鱼kcnj2a基因过表达 | 第71-74页 |
| ·斑马鱼kcnj2a基因的敲降 | 第74-77页 |
| ·拯救实验 | 第77-78页 |
| ·用CRISPR-Cas9技术构建斑马鱼kcnj2a基因突变体 | 第78-80页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第80-86页 |
| ·斑马鱼sox9b突变体的构建 | 第80-81页 |
| ·斑马鱼sox9b对心脏功能的影响 | 第81-84页 |
| ·斑马鱼sox9b基因对个体发育的影响 | 第84-86页 |
| 第五章 结论 | 第86-87页 |
| 第六章 硕士研究阶段参与的其他研究 | 第87-92页 |
| ·斑马鱼cry1bb突变体的构建及节律性分析 | 第87-89页 |
| ·斑马鱼1号染色体敲除计划 | 第89-92页 |
| 参考文献 | 第92-101页 |
| 缩略词 | 第101-103页 |
| 硕士研究生期间已发表和待发表的论文 | 第103-104页 |
| 资助项目 | 第104-105页 |
| 硕士研究生期间参与的会议 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
