| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| ·鸡传染性支气管炎研究进展 | 第12-16页 |
| ·IBV 的生物学分类地位 | 第12页 |
| ·IBV 粒子结构 | 第12-13页 |
| ·IBV 结构蛋白及其生物学功能 | 第13-14页 |
| ·IBV 理化特性 | 第14页 |
| ·IBV 疫苗研究进展 | 第14-16页 |
| ·鸡传染性法氏囊研究进展 | 第16-20页 |
| ·IBDV 生物学分类 | 第16页 |
| ·IBDV 粒子结构 | 第16页 |
| ·IBDV 的结构蛋白及生物学功能 | 第16-18页 |
| ·IBDV 理化特性 | 第18-19页 |
| ·IBDV 疫苗研究进展 | 第19-20页 |
| ·鸡白细胞介素（INTERLEUKIN）研究进展 | 第20-22页 |
| ·鸡白介素1（ChIL-1） | 第20-21页 |
| ·鸡白介素2（ChIL-2） | 第21页 |
| ·鸡白介素6（ChIL-6） | 第21页 |
| ·鸡白介素15（ChIL-15） | 第21-22页 |
| ·鸡白介素18（ChIL-18） | 第22页 |
| ·研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-42页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·病毒株 | 第23页 |
| ·试验动物 | 第23页 |
| ·细胞株、菌株、载体及质粒 | 第23页 |
| ·主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒 | 第23页 |
| ·主要生化试剂 | 第23-24页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-41页 |
| ·IBV S1 基因、IBDV VP2 基因的亚克隆及其真核表达质粒的构建 | 第24-28页 |
| ·IBV S1、IBDV VP2 融合基因真核表达质粒的构建 | 第28-31页 |
| ·抗IBDV VP2 蛋白多克隆抗体的制备和鉴定 | 第31-35页 |
| ·pVAX-IBV S1、pVAX-IBDV VP2、pVAX-IBV S1-linker-IBDV VP2 重组质粒体外瞬时表达及其表达产物的检测 | 第35页 |
| ·pVAX-IBV S1、pVAX-IBDV VP2 重组质粒稳定表达细胞系的建立和鉴定 | 第35-36页 |
| ·实验动物分组、免疫及各组免疫效果的检测 | 第36-41页 |
| ·数据处理 | 第41-42页 |
| 3 试验结果 | 第42-72页 |
| ·IBV S1 基因、IBDV VP2 基因的亚克隆及其真核表达质粒的构建及鉴定 | 第42-44页 |
| ·pVAX-IBV S1 重组质粒的构建及鉴定 | 第42-43页 |
| ·pVAX-IBDV VP2 重组质粒的构建与鉴定 | 第43-44页 |
| ·PVAX-IBV S1-IBDV VP2 重组质粒的构建与鉴定 | 第44-45页 |
| ·IBV S1、IBDV VP2 片断的亚克隆 | 第44-45页 |
| ·pVAX-IBV S1-IBDV VP2 重组质粒的PCR 及双酶切鉴定 | 第45页 |
| ·pVAX-IBV S1-IBDV VP2 重组质粒的测序鉴定 | 第45页 |
| ·抗IBDV VP2 蛋白多克隆抗体的制备及鉴定 | 第45-47页 |
| ·pGEX-IBDV VP2 原核表达质粒的单双酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测多抗效价 | 第46页 |
| ·western blot 检测多抗特异性 | 第46-47页 |
| ·PVAX-IBV S1、PVAX-IBDV VP2、PVAX-IBV S1-LINKER-IBDV VP2 重组质粒体外瞬时表达及其表达产物的检测 | 第47-50页 |
| ·pVAX-IBV S1 真核表达质粒体外转染及其检测 | 第47-48页 |
| ·pVAX-IBDV VP2 真核表达质粒体外转染及其检测 | 第48页 |
| ·pVAX-IBV S1-linker-IBDV VP2 真核表达质粒体外转染及其检测 | 第48-50页 |
| ·PVAX-IBV S1、PVAX-IBDV VP2 重组质粒稳定表达细胞系的建立 | 第50-52页 |
| ·RT-PCR 方法检测pVAX-IBV S1、pVAX-IBDV VP2 基因的表达 | 第50页 |
| ·间接免疫荧光检测pVAX-IBV S1、pVAX-IBDV VP2 重组质粒在两种稳定表达细胞系中的表达 | 第50-52页 |
| ·雏鸡外周血及免疫器官T、B 淋巴细胞增殖的动态变化 | 第52-60页 |
| ·雏鸡血液T 淋巴细胞增殖的动态变化 | 第52-53页 |
| ·雏鸡血液B 淋巴细胞增殖的动态变化 | 第53-55页 |
| ·雏鸡胸腺T 淋巴细胞增殖的动态变化 | 第55-56页 |
| ·雏鸡脾脏T 淋巴细胞增殖的动态变化 | 第56-58页 |
| ·雏鸡脾脏B 淋巴细胞增殖的动态变化 | 第58-60页 |
| ·雏鸡外周血及免疫器官CD4+、CD8+T 淋巴细胞动态变化 | 第60-66页 |
| ·雏鸡外周血及免疫器官CD4+T 淋巴细胞动态变化 | 第60-63页 |
| ·雏鸡外周血及免疫器官CD8+T 淋巴细胞动态变化 | 第63-66页 |
| ·雏鸡外周血抗IBV、IBDV 抗体含量动态变化 | 第66-67页 |
| ·雏鸡外周血抗IBV 抗体含量动态变化 | 第66页 |
| ·雏鸡外周血抗IBDV 抗体含量动态变化 | 第66-67页 |
| ·各组雏鸡细胞毒性T 淋巴细胞的检测 | 第67-69页 |
| ·各组雏鸡细胞毒性T 淋巴细胞（CTL）杀伤分泌IBVS1 靶细胞的检测 | 第67-68页 |
| ·各组雏鸡细胞毒性T 淋巴细胞杀伤分泌IBDV VP2 靶细胞的检测 | 第68-69页 |
| ·中和抗体 | 第69页 |
| ·攻毒后雏鸡病变的观察结果 | 第69-71页 |
| ·保护率计算结果 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-81页 |
| ·融合基因真核载体表达质粒的设计与构建 | 第73页 |
| ·多克隆抗体的制备及其效价鉴定结果分析 | 第73-74页 |
| ·融合基因真核载体表达质粒体外瞬时转染鉴定结果及分析 | 第74-75页 |
| ·融合基因真核载体表达质粒体外稳定转染及CTL 活性测定 | 第75页 |
| ·雏鸡进行核酸免疫的讨论与分析 | 第75-76页 |
| ·雏鸡免疫后淋巴细胞增殖功能变化结果分析 | 第76-78页 |
| ·雏鸡免疫后血液及免疫器官T 淋巴细胞增殖活性分析 | 第76-77页 |
| ·雏鸡免疫后血液及免疫器官B 淋巴细胞增殖活性分析 | 第77-78页 |
| ·雏鸡免疫后不同亚型T 细胞动态变化结果分析 | 第78页 |
| ·雏鸡免疫后免疫器官及血液CD4~+T 细胞动态变化结果分析 | 第78页 |
| ·雏鸡免疫后免疫器官及血液CD8~+T 细胞动态变化结果分析 | 第78页 |
| ·外周血液抗IBV 和IBDV IGG 抗体含量动态变化结果分析 | 第78-79页 |
| ·病毒攻击试验雏鸡后病理学观察结果、感染率及保护率计算结果的讨论与分析 | 第79-80页 |
| ·免疫效果比较分析 | 第80-81页 |
| 5 结论 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-87页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第87页 |
