| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| ·猪传染性胃肠炎（TGE） | 第13页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）的基本特征 | 第13-15页 |
| ·TGEV 形态学特征 | 第13-14页 |
| ·TGEV 的培养特性 | 第14页 |
| ·TGEV 的理化特性 | 第14页 |
| ·TGE 的流行与症状 | 第14-15页 |
| ·TGE 的诊断 | 第15页 |
| ·TGEV 的分子生物学进展 | 第15-17页 |
| ·TGEV 基因组结构及表达 | 第15-16页 |
| ·TGEV 结构蛋白及其功能 | 第16-17页 |
| ·TGEV 非结构蛋白及其功能 | 第17页 |
| ·TGE 疫苗研究进展 | 第17-20页 |
| ·常规疫苗 | 第17-18页 |
| ·基因工程疫苗 | 第18-20页 |
| ·细胞因子免疫佐剂 | 第20-22页 |
| ·猪白细胞介素12 | 第20-21页 |
| ·猪白细胞介素18 | 第21-22页 |
| ·实验目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-40页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·细胞株、菌株、载体及质粒 | 第23页 |
| ·主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒 | 第23页 |
| ·主要生化试剂 | 第23-24页 |
| ·主要试剂的配制和贮存 | 第24页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-40页 |
| ·TGEV 51 基因、pIL-12 基因的亚克隆及其真核表达质粒的构建 | 第25-30页 |
| ·pIL-12(p40)原核表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·重组质粒pGEX-6p-pIL-12(p40)的诱导表达及纯化 | 第31-32页 |
| ·抗pIL-12(p40)多克隆抗体的制备及鉴定 | 第32-33页 |
| ·pVAX1-TGEV 51 和pVAX1-pIL-12(p40)-linker-pIL-12(p35)重组质粒体外瞬时表达及其表达产物的检测 | 第33-34页 |
| ·pVAX1-TGEV 51 、pVAX1-pIL-12(p40)-linker-pIL-12(p35)和pVAX-pIL-18 重组质粒在小鼠体内的应用及其免疫效果的检测 | 第34-40页 |
| 3 结果 | 第40-59页 |
| ·TGEV 51 基因及pIL-12 基因的亚克隆及其真核表达质粒的构建及鉴定 | 第40-42页 |
| ·TGEV 51 重组真核表达质粒的构建与鉴定 | 第40-41页 |
| ·pIL-12 重组真核表达质粒的构建与鉴定 | 第41-42页 |
| ·pGEX-6p-pIL-12(p40)重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第42-44页 |
| ·pGEX-6p-pIL-12(p40) 重组蛋白的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·pGEX-6p-pIL-12(p40)重组蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| ·抗pIL-12(p40)多克隆抗体的制备及鉴定 | 第44-45页 |
| ·酶联免疫吸附实验（ELISA）检测多抗效价 | 第44页 |
| ·蛋白免疫印记实验（western blot）检测抗体特异性 | 第44-45页 |
| ·真核表达质粒体外转染及其表达产物的检测 | 第45-47页 |
| ·TGEV S1 基因真核表达质粒的免疫荧光方法检测 | 第45-46页 |
| ·pIL-12(p40)-linker-pIL-12(p35)基因真核表达质粒的免疫荧光方法检测 | 第46-47页 |
| ·小鼠脾脏及外周血T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第47-49页 |
| ·小鼠脾脏T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第47-48页 |
| ·小鼠外周血T 淋巴细胞增殖功能动态变化 | 第48-49页 |
| ·小鼠脾脏及外周血不同亚型T 淋巴细胞动态变化 | 第49-54页 |
| ·小鼠脾脏及外周血CD4~+T 淋巴细胞动态变化 | 第49-52页 |
| ·小鼠脾脏及血液CD8~+T 淋巴细胞动态变化 | 第52-54页 |
| ·小鼠外周血抗TGEV 51 IgG 抗体含量动态变化 | 第54-55页 |
| ·小鼠外周血IFN-γ和IL-4 的检测 | 第55-56页 |
| ·病毒中和试验检测小鼠血液中TGEV 的中和抗体 | 第56-57页 |
| ·免疫小鼠脾脏及外周血特异性细胞毒性T 淋巴细胞活性检测结果 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-67页 |
| ·pIL-12、pIL-18 和TGEV 51 的免疫设计 | 第59页 |
| ·pIL-12 原核表达载体的构建及其在细菌中的表达 | 第59-60页 |
| ·真核表达载体的选择及真核重组质粒的构建 | 第60-61页 |
| ·真核表达载体重组质粒体外瞬时转染结果分析 | 第61页 |
| ·小鼠免疫后脾脏和外周血T 淋巴细胞的增殖效果 | 第61-62页 |
| ·小鼠免疫后脾脏和外周血CD4~+和CD8~+ T 淋巴细胞数量的动态变化 | 第62-63页 |
| ·小鼠免疫后抗TGEV S1 IgG 抗体含量动态变化 | 第63页 |
| ·小鼠免疫后IFN-γ和IL-4 的动态变化 | 第63-64页 |
| ·小鼠免疫后血液中TGEV 中和抗体含量分析 | 第64-65页 |
| ·小鼠免疫后脾脏及外周血特异性细胞毒性T 细胞活性 | 第65-67页 |
| 5.结论 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第76页 |
