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苹果褪绿叶斑病毒的组织定位研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 绪论第9-17页
   ·苹果病毒病的研究现状第9-10页
   ·苹果褪绿叶斑病毒第10页
   ·植物病毒病的检测方法第10-14页
     ·生物学检测法第10-11页
     ·电子显微镜观察第11页
     ·血清学方法第11-12页
     ·分子生物学检测法第12-14页
   ·原位PCR技术第14-16页
     ·原位RT-PCR技术的原理第14页
     ·原位PCR的基本步骤与方法第14-16页
     ·原位PCR的应用第16页
   ·本论文的研究目的和意义第16-17页
2 材料与方法第17-26页
   ·实验材料第17页
   ·试剂与设备第17-19页
     ·提取植物总RNA所需的用品第17页
     ·电泳相关设备与试剂第17页
     ·回收特异性片段所用试剂第17页
     ·RT-PCR所需试剂第17页
     ·克隆所用试剂与器皿第17-18页
     ·以质粒为模板制备探针所需用品第18页
     ·冰冻切片所需试剂与设备第18页
     ·切片固定、消化所用试剂与药品第18页
     ·原位PCR所需仪器及药品第18页
     ·原位杂交试剂(含点杂交)与用品第18页
     ·玻片处理第18-19页
   ·引物第19页
   ·实验方法第19-23页
     ·CTAB法提取总RNA及电泳检测第19页
     ·RT-PCR第19页
     ·PCR产物中目的片段的回收第19-20页
     ·目的片段的克隆第20-21页
     ·质粒的提取及测序第21-22页
     ·以质粒为模板制备探针第22页
     ·分子杂交检测第22-23页
     ·点杂交对粗提RNA的检测第23页
     ·防脱处理第23页
   ·原位PCR第23-26页
     ·冰冻切片的制作、固定、消化第23-24页
     ·原位RT-PCR第24-25页
     ·原位杂交检测第25-26页
3 结果与分析第26-35页
   ·CTAB法提取苹果总RNA第26页
   ·RT-PCR及电泳检测第26-27页
   ·特异性片段克隆测序第27-29页
     ·目的片段胶回收第27页
     ·重组质粒鉴定第27-28页
     ·目的片段的克隆测序与序列分析第28-29页
   ·分子杂交检测结果第29-31页
     ·探针的制备第29-30页
     ·点杂交检测结果第30-31页
   ·叶片冰冻切片的制备、固定与消化第31-32页
     ·杂交前切片的组织形态第31页
     ·切片的固定与消化第31-32页
   ·原位杂交后的检测第32-35页
4 结论第35-36页
参考文献第36-39页
攻读学位期间发表的学术论文第39-40页
致谢第40-41页

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