苹果褪绿叶斑病毒的组织定位研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| ·苹果病毒病的研究现状 | 第9-10页 |
| ·苹果褪绿叶斑病毒 | 第10页 |
| ·植物病毒病的检测方法 | 第10-14页 |
| ·生物学检测法 | 第10-11页 |
| ·电子显微镜观察 | 第11页 |
| ·血清学方法 | 第11-12页 |
| ·分子生物学检测法 | 第12-14页 |
| ·原位PCR技术 | 第14-16页 |
| ·原位RT-PCR技术的原理 | 第14页 |
| ·原位PCR的基本步骤与方法 | 第14-16页 |
| ·原位PCR的应用 | 第16页 |
| ·本论文的研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-26页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·试剂与设备 | 第17-19页 |
| ·提取植物总RNA所需的用品 | 第17页 |
| ·电泳相关设备与试剂 | 第17页 |
| ·回收特异性片段所用试剂 | 第17页 |
| ·RT-PCR所需试剂 | 第17页 |
| ·克隆所用试剂与器皿 | 第17-18页 |
| ·以质粒为模板制备探针所需用品 | 第18页 |
| ·冰冻切片所需试剂与设备 | 第18页 |
| ·切片固定、消化所用试剂与药品 | 第18页 |
| ·原位PCR所需仪器及药品 | 第18页 |
| ·原位杂交试剂(含点杂交)与用品 | 第18页 |
| ·玻片处理 | 第18-19页 |
| ·引物 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-23页 |
| ·CTAB法提取总RNA及电泳检测 | 第19页 |
| ·RT-PCR | 第19页 |
| ·PCR产物中目的片段的回收 | 第19-20页 |
| ·目的片段的克隆 | 第20-21页 |
| ·质粒的提取及测序 | 第21-22页 |
| ·以质粒为模板制备探针 | 第22页 |
| ·分子杂交检测 | 第22-23页 |
| ·点杂交对粗提RNA的检测 | 第23页 |
| ·防脱处理 | 第23页 |
| ·原位PCR | 第23-26页 |
| ·冰冻切片的制作、固定、消化 | 第23-24页 |
| ·原位RT-PCR | 第24-25页 |
| ·原位杂交检测 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-35页 |
| ·CTAB法提取苹果总RNA | 第26页 |
| ·RT-PCR及电泳检测 | 第26-27页 |
| ·特异性片段克隆测序 | 第27-29页 |
| ·目的片段胶回收 | 第27页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第27-28页 |
| ·目的片段的克隆测序与序列分析 | 第28-29页 |
| ·分子杂交检测结果 | 第29-31页 |
| ·探针的制备 | 第29-30页 |
| ·点杂交检测结果 | 第30-31页 |
| ·叶片冰冻切片的制备、固定与消化 | 第31-32页 |
| ·杂交前切片的组织形态 | 第31页 |
| ·切片的固定与消化 | 第31-32页 |
| ·原位杂交后的检测 | 第32-35页 |
| 4 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
