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棉蚜热激蛋白的基因克隆与分析

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
第一章 引言第9-20页
   ·热激蛋白及其分类第9-10页
   ·小热激蛋白第10-17页
     ·sHSPs的结构和多样性第10-11页
     ·sHSPs寡聚体的多样性第11-12页
     ·sHSPs的分子伴侣功能第12-13页
     ·sHSPs底物多样性第13-15页
     ·sHSPs与结合底物蛋白的多类型残基第15-16页
     ·sHSPs与疾病第16-17页
   ·Heat shock protein 10第17-18页
     ·Hsp10的分子伴侣功能第17-18页
     ·Hsp10功能的多样性第18页
   ·热激蛋白与自噬的关系第18-19页
   ·研究的目的和意义第19-20页
第二章 材料与方法第20-33页
   ·实验材料第20页
   ·实验仪器第20-21页
   ·主要的试剂盒、工具酶和试剂第21页
   ·常用试剂配方第21-22页
   ·实验方法第22-33页
     ·昆虫饲养第22页
     ·RNA的提取第22-23页
     ·RNA纯度及浓度检测第23页
     ·cDNA合成第23-24页
     ·实验所用引物第24-25页
     ·普通PCR反应第25-26页
     ·荧光定量PCR反应第26页
     ·DNA序列的测定第26-27页
     ·酶切反应第27页
     ·DNA片段的凝胶回收第27-28页
     ·表达载体的构建第28页
     ·高效感受态细胞的制备第28-29页
     ·热激法转化大肠杆菌第29页
     ·阳性菌落鉴定与测序第29-30页
     ·质粒的提取第30页
     ·热激蛋白的原核表达第30-31页
     ·重组蛋白的可溶性分析及纯化第31页
     ·高温下融合蛋白对E.coli细胞存活率的影响第31-33页
第三章 结果与讨论第33-47页
   ·棉蚜转录组数据分析第33-34页
   ·RNA的提取第34-35页
   ·热激蛋白基因序列的克隆与验证第35-36页
   ·生物信息学分析第36-37页
   ·Hsp的表达量分析第37-40页
   ·AgosHsp的原核表达第40-44页
     ·表达载体的构建第40-41页
     ·重组蛋白的表达第41-42页
     ·重组蛋白表达的优化第42-43页
     ·pGEX-4T-1-Agoshsp融合表达蛋白的可溶性分析第43-44页
     ·蛋白的纯化第44页
   ·高温下重组蛋白对大肠杆菌存活的影响第44-45页
   ·讨论第45-47页
第四章 结论第47-48页
参考文献第48-58页
致谢第58-59页
个人简历第59页

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