摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-39页 |
·杆状病毒的分类 | 第13页 |
·杆状病毒的复制特点 | 第13-17页 |
·杆状病毒的感染 | 第17-19页 |
·杆状病毒的宿主特异性 | 第19-25页 |
·杆状病毒的功能蛋白 | 第25-30页 |
·杆状病毒的进化 | 第30-31页 |
·杆状病毒的应用 | 第31-34页 |
·家蚕血液型脓病 | 第34-35页 |
·狂犬病病毒糖蛋白 | 第35-36页 |
·本研究的目的及意义 | 第36-39页 |
第二章 广西流行BmNPV的polh和p10基因序列测定及其分子流行病学分析 | 第39-80页 |
1. 材料与方法 | 第39-47页 |
·材料 | 第39-42页 |
·方法 | 第42-47页 |
2. 结果 | 第47-77页 |
·BmNPV感染病蚕材料采集标准 | 第47-48页 |
·BmNPV分离株多角体形态 | 第48页 |
·广西各养蚕区BmNPV病蚕材料采集情况 | 第48-50页 |
·多角体蛋白polh基因的克隆测序与序列分析 | 第50-65页 |
·微管相关蛋白p10基因的克隆测序与序列分析 | 第65-74页 |
·广西BmNPV分离株地理分布情况 | 第74-75页 |
·p10基因编码区单核苷酸多态性分析(coding-region single nucleotidepolymorphisms,cSNPs) | 第75-77页 |
3. 讨论 | 第77-79页 |
4. 小结 | 第79-80页 |
第三章 携带狂犬病病毒糖蛋白基因重组杆状病毒表达载体构建及重组糖蛋白在家蚕幼虫体内表达 | 第80-101页 |
1. 材料与方法 | 第80-90页 |
·材料 | 第80-83页 |
·方法 | 第83-90页 |
2. 结果 | 第90-98页 |
·目的基因扩增和克隆 | 第90-91页 |
·重组供体质粒双酶切鉴定 | 第91-92页 |
·重组大肠杆菌DH10蓝白斑筛选 | 第92页 |
·重组bacmid DNA的PCR鉴定 | 第92-93页 |
·重组BmNPV感染家蚕幼虫 | 第93-95页 |
·重组RVG表达鉴定 | 第95-98页 |
3. 讨论 | 第98-100页 |
4. 小结 | 第100-101页 |
第四章 重组BmNPV在非受纳细胞系Sf9的感染和复制 | 第101-115页 |
1. 材料与方法 | 第101-105页 |
·材料 | 第101-102页 |
·方法 | 第102-105页 |
2. 结果 | 第105-110页 |
·重组rBm-P_(CMV)-RVG感染Sf9细胞引起细胞膜融合 | 第105页 |
·重组RVG在Sf9细胞中表达 | 第105-106页 |
·携带GFP报告基因重组rBm-GFP感染Sf9细胞形态 | 第106-107页 |
·重组rBm-GFP感染Sf9细胞引起细胞膜融合 | 第107-108页 |
·重组rBm-GFP在Sf9细胞增殖的生长曲线 | 第108-109页 |
·传代和原代重组rBm-GFP生长曲线比较 | 第109-110页 |
3. 讨论 | 第110-113页 |
4. 小结 | 第113-115页 |
第五章 家蚕抗BmNPV病毒基因Bmlipase-1和BmSP-2的克隆与原核表达 | 第115-132页 |
1. 材料与方法 | 第115-118页 |
·材料及主要试剂 | 第115页 |
·“两广二号”家蚕肠道组织细胞总RNA提取 | 第115-116页 |
·引物设计与基因克隆 | 第116-117页 |
·“两广二号”家蚕Bmlipase-1和BmSP-2基因序列分析 | 第117页 |
·重组原核表达载体构建 | 第117页 |
·在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白 | 第117页 |
·SDS-PAGE和Western-blot检测目的蛋白表达 | 第117-118页 |
2. 结果 | 第118-129页 |
·“两广二号”家蚕Bmlipase-1基因完整ORF克隆 | 第118-123页 |
·“两广二号”家蚕BmSP-2基因完整ORF克隆 | 第123-128页 |
·原核表达载体构建 | 第128页 |
·目的蛋白在大肠杆菌中表达 | 第128-129页 |
3. 讨论 | 第129-131页 |
4. 小结 | 第131-132页 |
第六章 结论 | 第132-134页 |
参考文献 | 第134-145页 |
致谢 | 第145页 |